【摘要】：目的研究小鼠胸腺上皮細(xì)胞的分離培養(yǎng)方法、鑒定及其對(duì)胸腺淋巴細(xì)胞的促增殖作用。方法無菌取4~5周齡BALB/c小鼠的胸腺,組織塊培養(yǎng)30天,觀察不同時(shí)間細(xì)胞形態(tài)的變化;0.1%胰蛋白酶消化細(xì)胞傳代;用波形蛋白和角蛋白進(jìn)行免疫組化鑒定;新型細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒比色法檢測(cè)地塞米松對(duì)胸腺、脾臟淋巴細(xì)胞單獨(dú)培養(yǎng)及胸腺淋巴細(xì)胞與胸腺上皮細(xì)胞共培養(yǎng)的抑制作用。結(jié)果培養(yǎng)至第3~4天可見貼壁的組織塊周圍出現(xiàn)少量胸腺上皮細(xì)胞,從內(nèi)到外細(xì)胞形狀為圓形、多邊形、樹突狀、梭形等;培養(yǎng)至10天左右時(shí),細(xì)胞生長較快,出現(xiàn)大量的貼壁細(xì)胞;培養(yǎng)21天左右細(xì)胞大量融合并呈典型的鵝卵石樣排列;細(xì)胞免疫組化顯示廣譜角蛋白呈陽性反應(yīng),波形蛋白呈陰性反應(yīng);隨著藥物濃度的增加,胸腺、脾臟淋巴細(xì)胞存活率均降低,共培養(yǎng)后胸腺淋巴細(xì)胞的存活率升高。結(jié)論組織塊法體外培養(yǎng)小鼠胸腺上皮細(xì)胞簡(jiǎn)單可行;胸腺上皮細(xì)胞具有促胸腺淋巴細(xì)胞增殖的作用。
[Abstract]:Objective to study the method of isolation and culture of mouse thymus epithelial cells and its proliferative effect on thymocytes. Methods the thymus of BALB / c mice aged 4 weeks and 5 weeks old were collected and cultured for 30 days. The changes of cell morphology in different time were observed and the digestive cells were subcultured with 0.1% trypsin, and identified by immunohistochemistry with vimentin and keratin. The inhibitory effects of dexamethasone on thymocytes, spleen lymphocytes and coculture of thymus lymphocytes and thymoepithelial cells were detected by colorimetric assay. Results on the 3rd day of culture, a few thymus epithelial cells were found around the adherent tissue mass. The cells were round, polygonal, dendritic, fusiform and so on from the inside to the outside, and the cells grew faster when cultured for about 10 days. A large number of adherent cells appeared; after 21 days of culture, the cells fused in large numbers and presented a typical cobblestone arrangement. Cell immunohistochemistry showed that broad-spectrum keratin was positive, vimentin was negative, and the thymus gland was increased with the increase of drug concentration. The survival rate of spleen lymphocytes decreased and the survival rate of thymus lymphocytes increased after co-culture. Conclusion it is simple and feasible to culture mouse thymoepithelial cells by tissue mass method, and thymoepithelial cells can promote the proliferation of thymocytes.
【作者單位】： 廣東醫(yī)學(xué)院生物學(xué)教研室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31200679) 廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2011B031800388) 廣東省大學(xué)生創(chuàng)新訓(xùn)練項(xiàng)目(1057112027)
【分類號(hào)】：R329.2

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2121688