本文選題：抗體庫 + 噬菌體展示技術(shù)　； 參考：《細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志》2008年09期

【摘要】：目的:構(gòu)建小兒呼吸道合胞病毒感染患者人源性噬菌體抗體庫,搭建人源性抗體制備的技術(shù)平臺(tái),為小兒呼吸道合胞病毒感染發(fā)病機(jī)制的研究、診斷、治療和預(yù)防提供新的有效途徑。方法:從52例呼吸道合胞病毒感染患兒外周血淋巴細(xì)胞中提取總RNA,并逆轉(zhuǎn)錄為cDNA。用PCR擴(kuò)增輕鏈和重鏈Fd段(即重鏈的可變區(qū)和第一恒定區(qū))基因,并將擴(kuò)增的輕鏈和重鏈基因片段克隆于pComb3x噬粒載體,電轉(zhuǎn)化XL1-Blue大腸桿菌,經(jīng)輔助噬菌體M13K07超感染后構(gòu)建成Fab段噬菌體抗體庫。對(duì)此抗體庫雙酶切進(jìn)行鑒定,并用呼吸道合胞病毒顆粒作抗原進(jìn)行初步篩選。結(jié)果:經(jīng)過重輕鏈基因的重組,成功構(gòu)建一免疫噬菌體抗體基因庫,共有2.6×106個(gè)不同的克隆菌,其中70%的克隆均含有輕鏈和重鏈Fd基因。因此,所構(gòu)建的噬菌體抗體庫的庫容量為1.8×106,經(jīng)初步篩選,抗體庫得到了不同程度的富集。結(jié)論:利用基因重組技術(shù)和噬菌體展示技術(shù),成功構(gòu)建小兒呼吸道合胞病毒感染患者人源性免疫噬菌體抗體庫,為進(jìn)一步的研究奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:Objective: to construct the human phage antibody library of children with respiratory syncytial virus infection and to set up a technical platform for the preparation of human phage antibody for the study and diagnosis of the pathogenesis of respiratory syncytial virus infection in children. Treatment and prevention provide a new and effective way. Methods: total RNAs were extracted from peripheral blood lymphocytes of 52 children with respiratory syncytial virus infection. Light chain and heavy chain FD segment (i.e. variable region and first constant region of heavy chain) were amplified by PCR. The amplified light chain and heavy chain gene fragments were cloned into pComb3x phagocyte vector and electrotransformed into XL1-Blue Escherichia coli. Fab fragment phage antibody library was constructed after superinfection of bacteriophage M13K07. The antibody library was digested and screened with respiratory syncytial virus particles as antigen. Results: after recombination of heavy chain and light chain gene, an immune phage antibody gene library was successfully constructed. There were 2.6 脳 10 6 different clones, 70% of which contained light chain and heavy chain FD gene. Therefore, the library capacity of the constructed phage antibody library was 1.8 脳 106, and the antibody library was enriched in different degrees after preliminary screening. Conclusion: the human immune phage antibody library of children with respiratory syncytial virus infection was successfully constructed by gene recombination and phage display, which laid a foundation for further research.
【作者單位】： 第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院兒童醫(yī)學(xué)中心;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(30571948)
【分類號(hào)】：R392.33

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)會(huì)議論文 前1條

1 李曉琳;孟明耀;劉建生;李琦涵;侯宗柳;;人源性抗甲型肝炎病毒Fab噬菌體抗體分子的初步篩選[A];節(jié)能環(huán)保 和諧發(fā)展——2007中國科協(xié)年會(huì)論文集（二）[C];2007年

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 謝平麗;李官成;李艷東;周國華;李躍輝;郭鋒杰;王甲甲;;全人源抗結(jié)腸癌噬菌體單鏈抗體庫的構(gòu)建及篩選鑒定[J];生命科學(xué)研究;2010年01期

2 丁寧;肖慧;高巨;許立新;佘守章;;應(yīng)用噬菌體展示技術(shù)篩選HMGB1啟動(dòng)子結(jié)合蛋白[J];中國病理生理雜志;2010年01期

3 陳紅秀;張小鶯;陳琛;趙建樂;韓水仲;李引乾;劉曉強(qiáng);;單克隆卵黃抗體技術(shù)研究進(jìn)展[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;2010年04期

4 王雅楠;劉章鎖;邢國蘭;趙國強(qiáng);肖靜;王沛;;抗GBM抗體特異性單鏈抗體scFv3原核表達(dá)載體的構(gòu)建及表達(dá)[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2010年03期

5 劉銳;孫立娟;何成彥;周勁松;;大腸癌轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)構(gòu)建人源性抗大腸癌噬菌體Fab抗體庫[J];中國老年學(xué)雜志;2010年06期

6 周敏;石必枝;顧健人;李宗海;;抗EGFRvⅢ噬菌體抗體庫的構(gòu)建和篩選[J];中國生物工程雜志;2010年04期

7 吳懿娜;杜欣軍;張偉偉;董峰;王碩;;噬菌體抗體庫技術(shù)及其應(yīng)用[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2010年04期

8 趙鑫;王宏;向軍儉;朱中松;宋其芳;鄧寧;;血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子表位肽體外抗腫瘤作用研究[J];中國免疫學(xué)雜志;2010年05期

9 秦琴;王毅民;盧先鋒;牛勃;;噬菌體展示技術(shù)構(gòu)建人源性抗乙型肝炎表面抗原單鏈抗體庫[J];中國中西醫(yī)結(jié)合消化雜志;2010年02期

10 張榮娟;于穎彥;;腫瘤相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白的識(shí)別與研究進(jìn)展[J];中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué);2010年04期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 賀微;周辰;劉叔文;;快速構(gòu)建哺乳動(dòng)物細(xì)胞表面展示的全長人抗體基因庫[A];第十屆全國抗炎免疫藥理學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2010年

2 劉國振;劉斯奇;吳琳;;水稻抗體庫及基于抗體的蛋白質(zhì)組學(xué)[A];植物分子生物學(xué)與現(xiàn)代農(nóng)業(yè)——全國植物生物學(xué)研討會(huì)論文摘要集[C];2010年

3 魏偉;;生物制劑與風(fēng)濕免疫病治療[A];合理用藥及新藥評(píng)價(jià)專題研討會(huì)日程安排與論文摘要[C];2010年

4 徐雪松;彭春華;紀(jì)迪;;基于獨(dú)特型網(wǎng)絡(luò)的復(fù)雜不確定系統(tǒng)辨識(shí)[A];Proceedings of 2010 Chinese Control and Decision Conference[C];2010年

5 賈園;沈陽;邱亞峰;史子學(xué);邵東華;趙福廣;馬志永;;桿狀病毒的應(yīng)用[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)獸醫(yī)公共衛(wèi)生學(xué)分會(huì)第二次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2010年

6 顏世敢;朱麗萍;;動(dòng)物病原高通量檢測新技術(shù)[A];動(dòng)物檢疫學(xué)分會(huì)2010年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2010年

7 顏世敢;朱麗萍;;動(dòng)物病原高通量檢測新技術(shù)[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)畜牧獸醫(yī)生物技術(shù)學(xué)分會(huì)暨中國免疫學(xué)會(huì)獸醫(yī)免疫分會(huì)第八次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2010年

8 鄭志明;金社勝;肖希龍;候曉林;;抗諾氟沙星噬菌體單鏈抗體庫的構(gòu)建與篩選[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)食品衛(wèi)生學(xué)分會(huì)第十一次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2010年

9 郭莉;湯永民;徐曉軍;沈紅強(qiáng);錢柏芹;羅春芳;;惡性淋巴瘤細(xì)胞cDNA T7噬菌體展示文庫的建立及意義[A];第七屆全國血液免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)暨2008年浙江省血液病學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2008年

10 郭莉;湯永民;徐曉軍;沈紅強(qiáng);錢柏芹;羅春芳;;惡性淋巴瘤細(xì)胞cDNAT7噬菌體展示文庫的建立及意義[A];2007年浙江省兒科學(xué)、小兒外科學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2007年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 記者 張文天;我國發(fā)現(xiàn)317種精子定位蛋白并在國際注冊[N];科技日報(bào);2011年

2 記者 張文天;我國發(fā)現(xiàn)317種精子定位蛋白并在國際注冊[N];科技日報(bào);2011年

3 本報(bào)記者 吳紅梅;江蘇開始參與“國際研發(fā)分工”[N];新華日報(bào);2010年

4 ;南京國際科技合作成效明顯[N];中國高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報(bào);2010年

5 本報(bào)記者 吳紅梅;江蘇開始參與“國際研發(fā)分工”[N];新華日報(bào);2010年

6 ;南京國際科技合作成效明顯[N];中國高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報(bào);2010年

7 本報(bào)記者 吳紅梅;江蘇開始參與“國際研發(fā)分工”[N];新華日報(bào);2010年

8 ;南京國際科技合作成效明顯[N];中國高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報(bào);2010年

9 本報(bào)記者 吳紅梅;江蘇開始參與“國際研發(fā)分工”[N];新華日報(bào);2010年

10 ;南京國際科技合作成效明顯[N];中國高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報(bào);2010年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 萬小妹;幾種藥物與藥物載體生物功能的研究[D];中國科學(xué)技術(shù)大學(xué);2010年

2 郭愛疆;豬帶絳蟲六鉤蚴TSOL18抗原表位及組織定位的研究[D];甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

3 別彩群;抗肝癌噬菌體單鏈抗體二聚體的制備與初步應(yīng)用研究[D];暨南大學(xué);2009年

4 盛唯瑾;抗EGFR單鏈抗體與力達(dá)霉素融合蛋白的構(gòu)建及其抗腫瘤活性研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2009年

5 徐潔;神經(jīng)節(jié)苷脂GD2：一個(gè)分離和鑒定間充質(zhì)干細(xì)胞的新型表面分子[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2009年

6 顧建友;禽白細(xì)胞介素2功能域鑒定及與其受體的相互作用研究[D];浙江大學(xué);2009年

7 鄭馬慶;MMP-2抑制性結(jié)合肽篩選及其模擬化合物體內(nèi)、外抗腫瘤作用的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2008年

8 吳靜;重組人ADAM15去整合素結(jié)構(gòu)域蛋白的制備及其作用機(jī)理[D];江南大學(xué);2008年

9 晏向華;人肺癌單鏈抗體庫的構(gòu)建、篩選及其抗體結(jié)構(gòu)與功能的研究[D];浙江大學(xué);2006年

10 郭莉;一個(gè)新的白細(xì)胞膜抗原ZCH-2B8a編碼基因及其生物學(xué)特性的研究[D];浙江大學(xué);2006年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 楊乃娣;全人源胃癌噬菌體單鏈抗體庫的構(gòu)建及其初步篩選[D];浙江大學(xué);2010年

2 于揚(yáng);具有谷胱甘肽過氧化物酶活性的人源含硒單鏈抗體Se-scFv-2D8催化位點(diǎn)的研究[D];吉林大學(xué);2010年

3 才琳;抗黃曲霉毒素B1單克隆抗體和單鏈抗體的制備及活性研究[D];黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué);2010年

4 楊磊;重組人cTnI優(yōu)化表達(dá)和純化工藝建立及其抗體制備[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2010年

5 陳穎;Cd~(2+)結(jié)合肽篩選及多肽—金屬離子互作模擬[D];西南交通大學(xué);2010年

6 陳貽玲;用T7噬菌體展示肽庫篩選肺癌早期檢測分子標(biāo)志群[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2010年

7 楊麟;12H23單抗的嵌合型抗體的生物學(xué)活性分析及其模擬表位篩選[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

8 于紅;鼠源抗柑橘潰瘍病菌Fab抗體庫的構(gòu)建[D];重慶大學(xué);2010年

9 楊瀾波;骨肉瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞特異性結(jié)合肽的功能驗(yàn)證[D];南方醫(yī)科大學(xué);2010年

10 孫雙春;NR1抗原與TfR融合蛋白真核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建[D];瀘州醫(yī)學(xué)院;2010年

，

本文編號(hào)：2113285