發(fā)布時間：2018-07-09 12:23

  本文選題：人骨髓間充質(zhì)干細胞 + 縫隙連接��； 參考：《華中科技大學(xué)》2010年碩士論文

【摘要】：目的研究縫隙連接和縫隙連接蛋白在人骨髓基質(zhì)干細胞體外向軟骨分化過程中的作用。 方法體外培養(yǎng)人骨髓基質(zhì)干細胞(hMSCs),取第3代細胞,以生長分化因子-5(GDF-5)(100ng/ml)和縫隙連接阻斷劑甘珀酸(carbenoxolone,CBX)(2μmol/L)干預(yù)培養(yǎng),分3個實驗組,A:對照組。B:GDF-5組。C:CBX組。MTT法測定甘珀酸對人骨髓基質(zhì)干細胞增殖的影響,免疫熒光細胞化學(xué)法檢測軟骨細胞特異性Ⅱ型膠原的表達,Western blotting檢測Cx43蛋白的表達,阿辛蘭染色蛋白多糖,利用激光共聚焦檢測熒光并繪制熒光恢復(fù)曲線。 結(jié)果MTT結(jié)果顯示2μmol/L濃度甘珀酸對hMSCs的增殖不產(chǎn)生影響,對細胞沒有毒性抑制作用;免疫熒光細胞化學(xué)染色結(jié)果顯示CBX能夠抑制Ⅱ型膠原蛋白的表達(p 0.05) ;Western blotting結(jié)果表明CBX對Cx43蛋白的表達無明顯作用;阿辛蘭染色結(jié)果顯示CBX酸抑制分化細胞分泌蛋白多糖基質(zhì),共聚焦檢測下熒光恢復(fù)曲線顯示CBX組熒光恢復(fù)幅度較其他組降低,差異有顯著性意義(p0.05)。 結(jié)論GDF-5可以誘導(dǎo)hMSC分化為軟骨細胞,Cx43介導(dǎo)的縫隙連接細胞間通訊(GJIC)在此過程中發(fā)揮著重要作用;縫隙連接阻斷劑甘珀酸阻斷縫隙連接細胞間通訊,但是對Cx43蛋白的表達沒有影響。
[Abstract]:Objective to study the role of gap junction and gap junction protein in the differentiation of human bone marrow stromal cells into cartilage in vitro. Methods Human bone marrow mesenchymal stem cells (hMSCs) were cultured in vitro and cultured with growth differentiation factor-5 (GDF-5) (100ng/ml) and carbenoxolone (CBX) (2 渭 mol / L). Three experimental groups were divided into three groups: control group. B: GDF-5 group. C: CBX group. MTT assay was used to detect the proliferation of human bone marrow stromal cells. Immunofluorescence cytochemistry was used to detect the expression of chondrocyte-specific type 鈪，

本文編號：2109347