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日本血吸蟲(chóng)硫氧還蛋白谷胱甘肽還原酶免疫功能的研究

發(fā)布時(shí)間:2018-07-07 10:37

  本文選題:日本血吸蟲(chóng) + 硫氧還蛋白谷胱甘肽還原酶; 參考:《中國(guó)血吸蟲(chóng)病防治雜志》2015年04期


【摘要】:目的研究日本血吸蟲(chóng)硫氧還蛋白谷胱甘肽還原酶(Thioredoxin Glutathione Reductase of Schistosoma japonicum,SjTGR)的免疫原性及抗日本血吸蟲(chóng)感染的免疫保護(hù)性作用。方法 75只小鼠隨機(jī)分為5組:空白組、PBS組、CpG2免疫組、TGR免疫組和TGR+CpG2聯(lián)合免疫組,免疫3次。首次免疫前及第3次免疫后2周經(jīng)尾靜脈采血,采用酶聯(lián)免疫法分別檢測(cè)血清中抗SjTGR蛋白IgG、IgG1和IgG2a的抗體水平。第3次免疫后2周,每只小鼠經(jīng)腹部感染日本血吸蟲(chóng)尾蚴40±2條,42 d后剖殺,收集成蟲(chóng)和蟲(chóng)卵,計(jì)算減蟲(chóng)率和減卵率;制備各組小鼠單個(gè)脾淋巴細(xì)胞,采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)脾細(xì)胞表面標(biāo)志物CD44high、CD4+CD44high或CD8+CD44high水平;用SjTGR刺激免疫小鼠脾細(xì)胞72 h,采用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)脾細(xì)胞的IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ的水平。結(jié)果第3次免疫后2周TGR與CpG2+TGR免疫組小鼠血清抗SjTGR抗體的IgG滴度均達(dá)1:200 000以上,IgG2a與IgG1的比值(IgG2a/IgG1)隨時(shí)間的延長(zhǎng)緩慢增高。TGR免疫組和TGR+CpG2聯(lián)合免疫組細(xì)胞上清中的IFN-γ和IL-2水平與空白組、PBS組、CpG2免疫組相比明顯增高(P0.05)。TGR免疫組與TGR+CpG2免疫組小鼠脾細(xì)胞的CD44high、CD8+CD44high及CD4+CD44high與空白組和PBS組相比細(xì)胞比值增加(P0.05)。TGR免疫組和CpG2+TGR免疫組的減蟲(chóng)率分別為9.4%,10.5%,減卵率分別為9.2%和32.8%。結(jié)論 SjTGR具有較強(qiáng)的免疫原性,可誘導(dǎo)小鼠免疫反應(yīng)向Th1型極化,但不足以產(chǎn)生抗日本血吸蟲(chóng)感染的保護(hù)效應(yīng)。CpG2 ODN可能是一種有效的Th1型免疫佐劑。
[Abstract]:Objective to study the immunogenicity of thioredoxin Glutathione Reductase of Schistosoma japonicum SjTGR and its protective effect on Schistosoma japonicum infection. Methods Seventy-five mice were randomly divided into five groups: the control group (PBS) was immunized with CpG2 and the control group was immunized with TGR and TGR CpG2. Blood samples were collected from caudal vein before the first immunization and 2 weeks after the third immunization. The levels of anti-SjTGR IgG _ 1 and IgG _ 2a in serum were detected by enzyme-linked immunosorbent assay (Elisa). Two weeks after the third immunization, each mouse was infected with Schistosoma japonicum cercariae 40 鹵2 cercariae by abdominal cavity for 42 days. The adult worm and eggs were collected, the worm reduction rate and egg reduction rate were calculated, and a single spleen lymphocyte was prepared in each group. The levels of CD44high CD4 CD44high or CD8 CD44high were detected by flow cytometry, and the levels of IL-2IL-4IL-10 and IFN- 緯 were detected by enzyme-linked immunosorbent assay (Elisa) after SjTGR stimulated spleen cells in mice for 72 h. Results the IgG titers of anti-SjTGR antibody in serum of TGR and CpG2 TGR immunized mice reached 1: 200 000 or more (IgG2a / IgG1) slowly increased with the time prolonging. The supernatant of TGR immunized group and TGR CpG2 combined immunized group was increased slowly. The levels of IFN- 緯 and IL-2 were significantly higher than those of the control group (P0.05). The percentage of CD44highpCD8 CD44high and CD4 / CD44high in spleen cells of mice immunized with TGR and TGR CpG2 were significantly higher than those in the control group and PBS group (P0.05). The worm abatement in TGR immunized group and CpG2 TGR immunized group was higher than that in PBS group (P0.05). The rate of egg reduction was 9.2% and 32.8g, respectively. Conclusion SjTGR has strong immunogenicity and can induce the immune response of mice to Th1 type polarization, but it is not sufficient to produce protective effect against Schistosoma japonicum infection. CpG2 ODN may be an effective Th1 type immune adjuvant.
【作者單位】: 江蘇省血吸蟲(chóng)病防治研究所、衛(wèi)生部寄生蟲(chóng)病預(yù)防與控制技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、江蘇省寄生蟲(chóng)病分子生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(81201316;30972581) 江蘇省自然科學(xué)基金(BK2012544) 國(guó)家傳染病重大專項(xiàng)(2012ZX1004-220) 江蘇省衛(wèi)生廳血地寄科技項(xiàng)目(X201429;X201402)
【分類號(hào)】:R383.24

【共引文獻(xiàn)】

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10 張e,

本文編號(hào):2104703


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