本文選題：多能干細胞 + 心肌細胞��； 參考：《基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床》2015年04期

【摘要】：目的研究丙二醇甲醚醋酸酯(PMA)對小鼠誘導(dǎo)多能干細胞體外分化為心肌細胞的影響,以建立一種高效安全的體外誘導(dǎo)i PSC分化為心肌細胞的實驗方法。方法用懸滴法形成擬胚體(EBs),PMA誘導(dǎo)其向心肌細胞定向分化。免疫細胞學(xué)標記檢測心肌肌鈣蛋白T(c Tn T)和α橫紋肌輔肌動蛋白(α-actinin)的表達;RT-PCR和q-PCR檢測Brachyury,c Tn T,MLC2a,NKX2.5和GATA4等mRNA的表達。以添加相應(yīng)DMSO作為對照組,觀察各組出現(xiàn)搏動擬胚體的數(shù)量,計算分化比率。結(jié)果 PMA誘導(dǎo)小鼠誘導(dǎo)多能干細胞分化為心肌細胞的最佳濃度為100 nmol/L,此時擬胚體搏動率可達53%,顯著高于對照組(12%),且PMA誘導(dǎo)產(chǎn)生的心肌細胞表達多種心肌蛋白及基因,具有心肌細胞的結(jié)構(gòu)特征。結(jié)論 PMA能夠促進mi PSC在體外定向分化為心肌樣細胞。
[Abstract]:Objective to study the effect of propanediol methyl ether acetate (PMA) on the differentiation of mouse pluripotent stem cells into cardiomyocytes in vitro, and to establish an efficient and safe method for inducing iPSC to differentiate into cardiomyocytes in vitro. Methods the embryoid body (EBs) PMA was induced to differentiate into cardiomyocytes by suspension drop method. The expressions of cardiac troponin T (c TnT) and 偽 -striated actin (偽 -actinin) were detected by immunocytochemistry. The mRNA expressions of BrachyuryytnTnTnTnTnTnTnTnTMLC2aNKX2.5 and GATA4 were detected by RT-PCR and q-PCR respectively. The number of pulsatile embryoid bodies in each group was observed and the differentiation ratio was calculated by adding corresponding DMSO as control group. Results the optimal concentration of PMA induced pluripotent stem cells to differentiate into cardiomyocytes was 100 nmol / L, and the pulsatile rate of embryoid body was 53, which was significantly higher than that of control group (12%), and the cardiomyocytes induced by PMA expressed many kinds of myocardial proteins and genes. It has the structural characteristics of cardiomyocytes. Conclusion PMA can promote the differentiation of mi PSC into cardiomyocytes in vitro.
【作者單位】： 第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院心血管內(nèi)科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(31271039;31400832)
【分類號】：R329.2

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