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采用噬菌體展示技術(shù)篩選腸致病性大腸埃希菌EspB蛋白結(jié)合短肽的實驗研究

發(fā)布時間:2018-07-04 13:46

  本文選題:腸致病大腸埃希菌 + 噬菌體展示技術(shù); 參考:《中國微生態(tài)學雜志》2015年12期


【摘要】:目的探討是否能夠通過噬菌體展示技術(shù)篩選與腸致病性大腸埃希菌(EPEC)關(guān)鍵蛋白EspB結(jié)合的短肽。方法采用體外大腸埃希菌中表達和純化EspB蛋白情況,Western blot驗證蛋白的表達;Ph.D.12-蛋氨酸噬菌體展示技術(shù)用來篩選EspB特異結(jié)合蛋白;ELISA方法用來鑒定這些特異性結(jié)合蛋白與EspB的親和力。結(jié)果 Western blot驗證從pET21b-EspB轉(zhuǎn)染質(zhì)粒中提取的EspB蛋白。噬菌體展示技術(shù)篩選出了噬菌體6、7、8、12候選蛋白,ELISA檢測結(jié)果顯示這些候選蛋白與EspB蛋白的親和力高于對照蛋白。結(jié)論我們的數(shù)據(jù)提供了一種潛在的研究策略即通過靶向結(jié)合EspB蛋白可抑制EPEC對上皮細胞的粘附。
[Abstract]:Objective to investigate the ability of phage display to screen short peptides binding to the key protein EspB of Escherichia coli (EPEC). Methods EspB protein was expressed and purified in Escherichia coli in vitro. Western blot assay was used to identify the affinity of EspB specific binding protein to EspB by Phage display technique. Results EspB protein was extracted from pET21b-EspB transfection plasmid by Western blot. Bacteriophage display technique showed that these candidate proteins had higher affinity to EspB protein than the control protein by Elisa. Conclusion our data provide a potential strategy to inhibit the adhesion of EPEC to epithelial cells by targeting EspB protein.
【作者單位】: 廣東醫(yī)學院附屬深圳市南山區(qū)人民醫(yī)院感染科深圳市內(nèi)源性感染診治重點實驗室;
【基金】:國家自然科學基金(81170370/H0312) 深圳市衛(wèi)人委課題和南山區(qū)科技創(chuàng)新委課題(2012028,201303179,201302199,2011022)
【分類號】:R378

【參考文獻】

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【共引文獻】

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【相似文獻】

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本文編號:2096267

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