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香煙煙霧暴露對小鼠學(xué)習(xí)能力和神經(jīng)發(fā)生的影響研究

發(fā)布時(shí)間:2018-06-30 04:46

  本文選題:神經(jīng)發(fā)生 + 小膠質(zhì)細(xì)胞。 參考:《廣西醫(yī)科大學(xué)》2008年碩士論文


【摘要】: 為了探討香煙煙霧暴露(cigarette smoking exposure,CSE,亦即被動吸煙)對發(fā)育中神經(jīng)系統(tǒng)的影響及其作用機(jī)理,本實(shí)驗(yàn)研究了對幼年小鼠學(xué)習(xí)能力、神經(jīng)發(fā)生和小膠質(zhì)細(xì)胞的影響,首次發(fā)現(xiàn)CSE抑制了海馬的神經(jīng)發(fā)生并減少了激活的小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量,證明了神經(jīng)發(fā)生在學(xué)習(xí)記憶中起著關(guān)鍵性的作用。闡明了香煙煙霧暴露對學(xué)習(xí)能力的影響是通過抑制神經(jīng)發(fā)生進(jìn)行的,為CSE對幼年神經(jīng)系統(tǒng)的危害提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。實(shí)驗(yàn)分為兩部份: 第一部分:香煙煙霧暴露對幼年小鼠學(xué)習(xí)能力、神經(jīng)發(fā)生和小膠質(zhì)細(xì)胞的影響 【目的】 研究香煙煙霧暴露對幼年小鼠學(xué)習(xí)能力、神經(jīng)發(fā)生和小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量的影響。 【材料和方法】 選取出生后30天的SPF級昆明小鼠,經(jīng)旋棒實(shí)驗(yàn),方型水迷宮實(shí)驗(yàn)篩選以排除體力和學(xué)習(xí)能力上存在的差異后隨機(jī)分成對照組、低強(qiáng)度組、高強(qiáng)度組,每組12只,CSE實(shí)驗(yàn)中兩處理組被分別置于仿Younoszai的自制被動吸煙箱內(nèi)接受共8天,3次/天,1支/次,10分鐘/次(低強(qiáng)度組)和8天,3次/天,2支/次,30分鐘/次(高強(qiáng)度組)的香煙煙霧暴露,而對照組亦被放置于沒有香煙煙霧的同樣環(huán)境中接受8天,3次/天,30分鐘/次的處理。通過Morris水迷宮訓(xùn)練檢測其學(xué)習(xí)記憶能力,采用5-溴脫氧尿苷(5-bromodeoxyuridine,BrdU)免疫細(xì)胞染色標(biāo)記新生細(xì)胞,西非單葉豆同工凝集素(Bandeirae Simplicifolia Isolectin-B4,BSI-B4)親和組織化學(xué)方法標(biāo)記小膠質(zhì)細(xì)胞。 【結(jié)果】 CSE組動物較對照組花費(fèi)更多的時(shí)間才能找到平臺,其DG內(nèi)的BrdU~+細(xì)胞數(shù)目的明顯減少,BSUI-B4~+細(xì)胞數(shù)量也顯著減少,其中分枝狀的細(xì)胞(代表了激活的小膠質(zhì)細(xì)胞)數(shù)量同樣平行地減少。 【結(jié)論】 1.CSE損害了幼年小鼠的空間學(xué)習(xí)能力。 2.CSE抑制了DG內(nèi)的神經(jīng)發(fā)生并使小膠質(zhì)細(xì)胞尤其是激活的小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量減少。 3.空間學(xué)習(xí)能力與DG內(nèi)神經(jīng)發(fā)生、小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量存在著正相關(guān)的關(guān)系,提示它們之間可能存在著某種方式的相互作用。 第二部分:神經(jīng)發(fā)生對學(xué)習(xí)記憶的影響 【目的】 研究神經(jīng)發(fā)生對學(xué)習(xí)記憶的影響,探討香煙煙霧暴露損害幼年小鼠學(xué)習(xí)記憶的機(jī)理 【材料和方法】 用腦內(nèi)埋管微量注射技術(shù)將細(xì)胞分裂促進(jìn)劑-酸性成纖維細(xì)胞生長因子(acid fibroblast growth factor,aFGF)和細(xì)胞分裂抑制劑-甲氨蝶呤(Methotrexate,MTX)注入側(cè)腦室內(nèi),之后使用神經(jīng)行為學(xué)、免疫組織化學(xué)技術(shù)及親和組織化學(xué)技術(shù)檢測其空間學(xué)習(xí)記憶能力、神經(jīng)發(fā)生及激活的小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量變化。 【結(jié)果】 細(xì)胞分裂促進(jìn)劑aFGF組觀察到了水迷宮訓(xùn)練中潛伏期的縮短,BrdU~+細(xì)胞數(shù)目的明顯增多,BSI-B4~+細(xì)胞數(shù)量也顯著增加;而抑制劑MTX組在水迷宮訓(xùn)練中的表現(xiàn)明顯比對照組和aFGF組要差,BrdU~+細(xì)胞數(shù)目減少,但BSI-B4~+細(xì)胞數(shù)量同對照組相比并沒有顯著的變化。 【結(jié)論】 1.aFGF有促神經(jīng)發(fā)生和促小膠質(zhì)細(xì)胞激活的作用。 2.MTX有抑制神經(jīng)發(fā)生的作用,但對小膠質(zhì)細(xì)胞影響不大。 3.本實(shí)驗(yàn)從正反兩方面證明了神經(jīng)發(fā)生對學(xué)習(xí)記憶起著重要的作用。 【總結(jié)】 1.香煙煙霧暴露損害了幼年小鼠的空間學(xué)習(xí)能力。 2.香煙煙霧暴露抑制了幼年小鼠DG內(nèi)的神經(jīng)發(fā)生并使小膠質(zhì)細(xì)胞尤其是激活的小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量減少。 3.香煙煙霧暴露對神經(jīng)發(fā)生的抑制作用,可能是香煙煙霧暴露損害空間學(xué)習(xí)能力的作用機(jī)理。 4.神經(jīng)發(fā)生在學(xué)習(xí)記憶過程中起著重要的作用。 5.小膠質(zhì)細(xì)胞與神經(jīng)發(fā)生和學(xué)習(xí)記憶之間可能存在著某種相互作用。 6.aFGF有促神經(jīng)發(fā)生的作用,MTX有抑制神經(jīng)發(fā)生的作用。
[Abstract]:In order to study the influence of cigarette smoke exposure ( Ck , i.e . , passive smoking ) on the nervous system in development , this paper studied the effects of cigarette smoke exposure on learning ability , neurogenesis and microglial cells . It was found that the neurogenesis plays a key role in learning and memory . The effect of cigarette smoke exposure on learning ability was demonstrated . The effect of cigarette smoke exposure on learning ability was demonstrated .


Part I : Effect of cigarette smoke exposure on learning ability , neurogenesis and microglial cells in young mice


Purpose of the project


To study the effects of cigarette smoke exposure on learning ability , neurogenesis and microglial cells in young mice .


Materials and methods therefor


SPF Kunming mice were randomly divided into two groups : control group , low - intensity group and high - strength group , and the control group was placed in the same environment without cigarette smoke for 8 days , 3 times / day , 30 minutes / time ( high - intensity group ) .


The result is not valid .


More time could be spent in the control group than in the control group to find the platform , and the number of cells in DG - B4 - B4 cells decreased significantly , and the number of dendritic cells ( representing the activated microglial cells ) decreased in parallel .


Conclusion


1 . The ability to learn space in young mice was impaired .


2 . Inhibition of neurogenesis in DG and reduced number of microglial cells , in particular activated microglial cells .


3 . There is a positive correlation between the spatial learning ability and the number of neurogenesis and microglial cells in DG , suggesting that there may be some kind of interaction between them .


Part Two : Effects of Neurogenesis on Learning and Memory


Purpose of the project


To study the effect of neurogenesis on learning and memory , and to explore the mechanism of cigarette smoke exposure damage to learning and memory of young mice


Materials and methods therefor


Cytokinin - acidic fibroblast growth factor ( aFGF ) and cell division inhibitor - methotrexate ( MTX ) were injected into the lateral ventricle using intracerebroventricular microinjection technique , followed by neurobehavioral , immunohistochemical techniques and immunohistochemistry techniques to detect the spatial learning and memory capacity , neurogenesis , and the number of activated microglial cells .


The result is not valid .


There was no significant change in BSI - B4 ~ + cells than in control group and aFGF group , but BSI - B4 ~ + cells did not change significantly compared with control group .


Conclusion


1 . aFGF has the effect of promoting neurogenesis and promoting the activation of microglial cells .


2 . MTX inhibited the neurogenesis , but had little effect on microglial cells .


3 . This experiment proves that the neurogenesis plays an important role in learning and memory .


Summary of summarization


1 . cigarette smoke exposure damages the spatial learning ability of young mice .


2 . Cigarette smoke exposure inhibited the neurogenesis in the young mouse DG and reduced the number of microglial cells , in particular activated microglial cells .


3 . The inhibitory effect of cigarette smoke exposure on neurogenesis may be the mechanism of cigarette smoke exposure damage spatial learning ability .


4 . Neurogenesis plays an important role in learning and memory .


5 . There may be some interaction between microglial cells and neurogenesis and learning and memory .


6 . aFGF has the effect of promoting neurogenesis , and MTX has the effect of inhibiting neurogenesis .
【學(xué)位授予單位】:廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2008
【分類號】:R363

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