發(fā)布時間：2018-06-26 05:10

  本文選題：創(chuàng)傷 + 心肌損傷�。� 參考：《中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院》2008年碩士論文

【摘要】： 背景與目的:應(yīng)激是機體對有害刺激(應(yīng)激原)所做出的適應(yīng)性綜合反應(yīng)。機體在受到外界刺激如燒傷、缺血再灌注以及手術(shù)等創(chuàng)傷應(yīng)激后,可以引起一系列神經(jīng)內(nèi)分泌的激活、氧化應(yīng)激以及細胞內(nèi)的Ca~(2+)超載,誘導(dǎo)體內(nèi)產(chǎn)生大量的血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)、醛固酮(Ald)、內(nèi)皮素(ET-1)以及各種細胞因子和活性氧自由基,從而引起應(yīng)激性高血壓、應(yīng)激性心律失常、應(yīng)激性心肌缺血、心功能障礙等。肢體創(chuàng)傷也是一種應(yīng)激狀態(tài),心血管系統(tǒng)是多種應(yīng)激因素作用的重要靶器官。 本實驗用手術(shù)的方法建立大鼠的左后肢截肢創(chuàng)傷應(yīng)激模型,動態(tài)檢測血漿H_2S、NO、髓過氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)、丙二醛(MDA)、血管緊張素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)、醛固酮(aldosterone,ALD)的變化,檢測心肌CSE、MPO活性及MDA、ALD含量,并用RT-PCR的方法檢測心肌CaN mRNA的表達,觀察心肌組織CaN Aβ基因表達的變化,同時光鏡下觀察心肌的病理損傷,電鏡觀察心肌線粒體形態(tài)和結(jié)構(gòu)的變化。并應(yīng)用H_2S供體NaHS、CSE抑制劑PPG、CaN抑制劑FK506及醛固酮拮抗劑螺內(nèi)酯進行干預(yù),觀察上述指標及線粒體呼吸功能、膜電位及線粒體總ATP酶的變化,進一步研究H_2S、CaN及醛固酮在肢體創(chuàng)傷應(yīng)激后心肌損傷中的信號傳導(dǎo)機制及各信號通路之間的相互作用,同時研究H_2S、CaN抑制劑FK506及醛固酮受體拮抗劑螺內(nèi)酯對心血管系統(tǒng)的保護作用。 本研究分為三部分:一、截肢創(chuàng)傷應(yīng)激后心肌H_2S/CSE體系和CaN的動態(tài)變化及干預(yù)措施:二、截肢創(chuàng)傷應(yīng)激后心肌損傷相關(guān)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機制的研究;三、截肢創(chuàng)傷應(yīng)激后心肌損傷的線粒體機制。 方法:本實驗用手術(shù)的方法建立大鼠的左后肢截肢創(chuàng)傷應(yīng)激模型。第一部分實驗分組:雄性Wistar大鼠63只,隨機分為9組,每組7只:正常對照組;截肢后1h組;2h組;4h組;6h組;12h組;24h組;48h組;72h組。第二部分實驗分組:雄性Wistar大鼠42只,分為6組,每組7只:正常對照組;創(chuàng)傷對照組;NaHS組:截肢后立即給予腹腔注射NaHS(28μmol/kg);PPG組:截肢后立即給予腹腔注射PPG(50mg/kg);FK506組:截肢后立即給予腹腔注射FK506(0.1mg/kg);螺內(nèi)酯組:正常大鼠螺內(nèi)酯每天灌胃(20mg/kg),6天后截肢。觀察各組大鼠心肌病理、血漿H_2S、NO、MPO、MDA、AngⅡ、ALD的變化,同時檢測各組大鼠心肌CSE活性、MPO、MDA、ALD的含量;并用RT-PCR的方法檢測心肌CaN mRNA的表達,電鏡觀察心肌線粒體形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化。第三部分實驗動物為48只雄性SD大鼠,隨機分為6組,每組8只:分組及處理同第二部分。觀察心肌線粒體呼吸功能和膜電位的變化,測定線粒體總ATP酶。 結(jié)果:第一部分結(jié)果:與正常對照組比較,血漿MPO、MDA在截肢后1h即有明顯升高,至截肢后6h達高峰,其后雖有所下降,但仍維持在較高水平。心肌MPO及MDA較血漿變化稍晚,于截肢創(chuàng)傷應(yīng)激后2h開始升高,心肌MPO于12h最高,MDA于截肢后6h最高。血漿H_2S及NO均于創(chuàng)傷應(yīng)激后4h開始明顯下降,6h最低,至創(chuàng)傷后24h逐漸恢復(fù)。而心肌CSE酶活性的變化稍晚于血漿H_2S,于創(chuàng)傷后12h最低,72h后才逐漸恢復(fù)。第二部分結(jié)果:與創(chuàng)傷對照組比,NaHS組及FK506組血漿及心肌MDA、ALD、H_2S、NO含量增加,PPG組血漿MDA、ALD、H_2S、NO及心肌CSE酶活性均下降,螺內(nèi)酯組血漿H_2S、NO含量增加而心肌CSE酶活性變化不明顯。第三部分結(jié)果:與正常對照組比,創(chuàng)傷組線粒體呼吸功能下降,RCR及P/O明顯降低,ATP酶含量及膜電位下降。與創(chuàng)傷組比較,NaHS組及FK506組心肌線粒體呼吸功能明顯改善,RCR、P/O及ATP酶含量增加,膜電位升高,而PPG組RCR、P/O及ATP酶含量減少。與創(chuàng)傷對照組比,螺內(nèi)酯組線粒體RCR、ATP及膜電位增加。 結(jié)論:截肢創(chuàng)傷應(yīng)激后可以造成遠隔心肌及線粒體損傷,截肢創(chuàng)傷應(yīng)激后4～6小時,心肌損傷最重。炎細胞及炎性細胞因子的活化、過度的氧化應(yīng)激、CaN信號通路及內(nèi)源性血漿H_2S/心肌CSE體系均參與了截肢創(chuàng)傷應(yīng)激后心肌損傷。外源性H_2S補充及CaN抑制劑FK506可以通過降低炎細胞浸潤及炎性細胞因子激活、直接清除氧自由基、增加心肌線粒體呼吸功能、提高膜電位及線粒體ATP酶產(chǎn)量,對心肌損傷發(fā)揮保護作用。CaN信號通路及氣體信號通路相互作用共同調(diào)節(jié)截肢創(chuàng)傷應(yīng)激后的心肌及線粒體損傷。
[Abstract]:BACKGROUND & OBJECTIVE : Stress is an adaptive response to harmful stimuli ( stress gen ) . After trauma stress such as burn , ischemia - reperfusion and surgery , the organism can induce a series of neuroendocrine activation , oxidative stress and intracellular Ca ~ ( 2 + ) overload , induce a large amount of angiotensin II ( Ang 鈪，

本文編號：2069249