發(fā)布時(shí)間：2018-06-24 03:37

  本文選題：胰腺再生 + 胰管標(biāo)記�。� 參考：《汕頭大學(xué)》2008年碩士論文

【摘要】：胰腺再生現(xiàn)象的研究有可能為糖尿病治療提供一條新的途徑,因而受到了廣泛的關(guān)注,但是胰腺再生的機(jī)理還不是很清楚。本課題中,我們研究了三種模型的小鼠胰腺再生情況,即部分胰腺切除(Partial pancreatectomy, Ppx)、鏈脲霉素(Streptozotocin,STZ)注射、和部分胰管結(jié)扎(Partial Duct Ligation, PDL)。結(jié)果發(fā)現(xiàn),在PDL模型的胰腺中出現(xiàn)了明顯的管狀復(fù)合體結(jié)構(gòu)(Tubular Complexes, TC),并且在TC結(jié)構(gòu)和正常的大胰管上都發(fā)現(xiàn)了胰島素(Insulin, Ins)陽(yáng)性的細(xì)胞。在90% Ppx模型中雖然也發(fā)現(xiàn)了TC結(jié)構(gòu)富集的新生小葉(New Lobe),但是因?yàn)閯?chuàng)傷過(guò)大,小鼠死亡率很高。在50% Ppx,70% Ppx以及STZ模型中則極少發(fā)現(xiàn)TC結(jié)構(gòu),并且在胰島的數(shù)量以及胰島素原、PDX-1、Ngn3、Ki67等基因的轉(zhuǎn)錄水平也沒(méi)有體現(xiàn)出明顯的增加。因此,PDL較Ppx和STZ是一個(gè)更為理想的胰腺再生模型。為研究胰腺再生的機(jī)理,我們建立了膽總管逆向注射腺病毒(adenovirus,Ad)技術(shù),胰管細(xì)胞可被病毒攜帶的增強(qiáng)型綠色熒光蛋白(Enhanced Green Fluorescence Protein, EGFP)標(biāo)記。研究結(jié)果表明,在12天齡幼鼠及兩個(gè)月齡成年鼠中,膽總管注射1.5天后,約有15%的胰管細(xì)胞和腺泡細(xì)胞被EGFP標(biāo)記。然而,胰島內(nèi)部有EGFP陽(yáng)性細(xì)胞的現(xiàn)象只在12天齡幼鼠出現(xiàn)。并且,EGFP標(biāo)記的胰島數(shù)量在術(shù)后第7天比術(shù)后第3天有明顯的增加。同時(shí),5-溴脫氧尿嘧啶核苷(5-bromo-2-deoxyuridine,BrdU)標(biāo)記實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),EGFP陽(yáng)性胰島內(nèi)BrdU陽(yáng)性細(xì)胞的比例較EGFP陰性的胰島高,暗示了這些胰島可能是從胰管新長(zhǎng)出來(lái)的,因而具有更強(qiáng)的分裂能力。這一推論得到了如下實(shí)驗(yàn)的支持,EGFP陽(yáng)性胰島比EGFP陰性胰島有更強(qiáng)的Ki67表達(dá)和更長(zhǎng)的端粒。將胰管標(biāo)記運(yùn)用于90% Ppx模型,初步的實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示,再生模型中沒(méi)有從胰管新生的胰島,說(shuō)明其再生機(jī)理和胚胎中胰島的發(fā)育不一樣。我們推測(cè)胰管上胰島素陽(yáng)性的細(xì)胞最終可能都會(huì)凋亡,再生的胰島可能來(lái)自于胰島內(nèi)祖細(xì)胞的分裂。
[Abstract]:The study of pancreatic regeneration may provide a new way for the treatment of diabetes, so it has received extensive attention, but the mechanism of pancreatic regeneration is not clear. In this study, we studied three models of pancreatic regeneration in mice: partial pancreatic excision (PPX), streptozotocin (STZ) injection, and partial ductal ligation (PDL). The results showed that there were obvious tubular complexes (TC) in the pancreas of PDL model, and Insulin (ins) positive cells were found in both TC structure and normal large pancreatic duct. In 90% Ppx model, the new lobule with rich TC structure was also found, but the death rate of mice was very high because of the high trauma. TC structures were rarely found in 50% PpxX 70% Ppx and STZ models, and no significant increase was found in the number of islets and the transcription level of proinsulin PDX-1Ngn3PX Ki67 genes. Therefore PDL is a more ideal pancreatic regeneration model than PpX and STZ. In order to study the mechanism of pancreatic regeneration, we developed a technique for retrograde injection of adenovirusAd (Ad) into the common bile duct. Pancreatic duct cells can be labeled with enhanced Green fluorescence protein (EGFP) carried by the virus. The results showed that about 15% of pancreatic duct cells and acinar cells were labeled by EGFP in 12 day old young rats and 2 months old adult rats 1.5 days after choledochus injection. However, the presence of EGFP-positive cells in the islet was found only in 12-day-old young rats. The number of islets labeled with EGFP was significantly increased on the 7th day after operation than on the third day after operation. At the same time, 5-bromo-2-deoxyuridineuridine (BrdU) labeling assay showed that the proportion of BrdU positive cells in EGFP positive islets was higher than that in EGFP negative islets, suggesting that these islets may be newly grown from the pancreatic duct and thus have stronger cleavage ability. The following results suggest that the EGFP positive islets have stronger Ki67 expression and longer telomere than EGFP negative islets. The pancreatic duct marker was applied to 90% PPX model. The preliminary experimental results showed that no islets were regenerated from the pancreatic duct in the regenerative model, which indicated that the regeneration mechanism was different from the development of pancreatic islets in embryos. We speculate that the insulin-positive cells in the pancreatic duct may eventually apoptosis, and the regenerated islets may come from the division of the progenitor cells in the islets.
【學(xué)位授予單位】：汕頭大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號(hào)】：R-332;R657.51

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 史文超;;胰腺β細(xì)胞的發(fā)育和再生研究現(xiàn)狀[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2011年19期

2 農(nóng)卡特;袁晟光;;硬化肝臟再生研究進(jìn)展[J];重慶醫(yī)學(xué);2010年05期

3 湯朝暉;周露婷;謝志芳;胡以平;楊甲梅;章衛(wèi)平;吳孟超;;利用分葉順次肝切除術(shù)建立小鼠肝臟大部切除后再生模型[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2009年05期

4 ;Effects of human umbilical cord serum on proliferation and insulin content of human fetal islet-like cell clusters[J];Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International;2004年01期

5 劉志剛;錢葉本;;缺血再灌注與肝再生[J];國(guó)際外科學(xué)雜志;2006年03期

6 馮凱歌;榮成;張曉;李可洲;;轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β與肝再生關(guān)系研究近況[J];西南軍醫(yī);2010年01期

7 彭進(jìn);趙剛;;大鼠肝部分切除術(shù)的方法及應(yīng)用研究進(jìn)展[J];東南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2011年04期

8 劉俊;鄢業(yè)鴻;;肝再生的研究進(jìn)展[J];江西醫(yī)藥;2014年01期

9 彭慶慧;榮成;張曉;李可洲;;轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-α與肝再生的關(guān)系[J];四川生理科學(xué)雜志;2010年02期

10 張麗新;鞠曉芳;王法;郭智偉;樸善花;滕春波;;利用假型反轉(zhuǎn)錄病毒對(duì)大部分胰腺切除后再生細(xì)胞的世系追蹤[J];生物工程學(xué)報(bào);2008年04期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 袁斌;MiR-23b在大鼠肝再生終止階段的表達(dá)及作用機(jī)制研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2011年

2 陳曉光;大鼠肝再生中基因組范圍內(nèi)的竇內(nèi)皮細(xì)胞轉(zhuǎn)錄譜動(dòng)態(tài)分析[D];新疆大學(xué);2011年

3 任彥順;大鼠脾切除并不同體積肝切除后肝臟再生調(diào)控機(jī)制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2011年

4 安家澤;大鼠β細(xì)胞素在胰腺干細(xì)胞轉(zhuǎn)分化中的作用[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2005年

5 張慧茹;仔豬胰腺干細(xì)胞的分離鑒定[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2005年

6 徐旭雯;粒細(xì)胞集落刺激因子治療急性肝衰竭的實(shí)驗(yàn)研究[D];中南大學(xué);2006年

7 楊開明;胰島發(fā)生、發(fā)育和再生及相關(guān)基因的研究[D];四川大學(xué);2006年

8 楊明;胰腺大部分切除誘導(dǎo)大鼠胰腺增生早期的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];華中科技大學(xué);2006年

9 姜宏衛(wèi);TIMP-1轉(zhuǎn)基因小鼠拮抗多次小劑量鏈脲佐菌素誘導(dǎo)糖尿病及其機(jī)制研究[D];中南大學(xué);2006年

10 周立新;肝素結(jié)合表皮生長(zhǎng)因子對(duì)大鼠部分肝移植后肝再生影響及機(jī)理的實(shí)驗(yàn)研究[D];四川大學(xué);2007年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 王云;胰島新生相關(guān)蛋蛋蛋白白對(duì)胰島功能及胰島新生影響的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2010年

2 朱秋實(shí);性別決定基因家族成員-2基因sox_2對(duì)大鼠肝再生的作用研究[D];河南師范大學(xué);2010年

3 農(nóng)卡特;IL-6/STAT3信號(hào)通路與肝硬變大鼠肝部分切除后肝再生的實(shí)驗(yàn)研究[D];桂林醫(yī)學(xué)院;2010年

4 蔣嬋;STZ處理樹，

本文編號(hào)：2059837