小鼠3個(gè)不同部位巨噬細(xì)胞的分離培養(yǎng)與鑒定
本文選題:小鼠 + 巨噬細(xì)胞。 參考:《預(yù)防醫(yī)學(xué)情報(bào)雜志》2015年11期
【摘要】:目的建立小鼠3種不同部位巨噬細(xì)胞體外分離培養(yǎng)的方法,并對(duì)其進(jìn)行鑒定。方法分別從小鼠腹腔、脾臟、骨髓中分離獲取巨噬細(xì)胞,經(jīng)臺(tái)盼藍(lán)染色計(jì)數(shù)后于含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液、1%小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)基中培養(yǎng);通過活細(xì)胞形態(tài)觀察;HE染色光鏡觀察;吞噬雞紅細(xì)胞功能檢測(cè);酸性磷酸酶及非特異性酯酶染色測(cè)定細(xì)胞內(nèi)酶的表達(dá)等生物學(xué)技術(shù)鑒定培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞性質(zhì)。結(jié)果獲得高純度的巨噬細(xì)胞,具有巨噬細(xì)胞的形態(tài)特征,具備良好的吞噬功能,雞紅細(xì)胞吞噬率分別為腹腔94.68%,脾臟92.47%,骨髓93.11%;酸性磷酸酶染色陽性率為腹腔89.43%,脾臟85.21%,骨髓88.55%;α-醋酸奈酚酯酶染色陽性率為腹腔85.32%,脾臟81.81%,骨髓85.76%。。結(jié)論小鼠3個(gè)不同部位均可簡(jiǎn)便實(shí)用的分離出巨噬細(xì)胞,可以滿足不同的研究目的。
[Abstract]:Objective to establish a method of isolation and culture of macrophages from 3 different parts of mice in vitro, and to identify it. Methods the macrophages were isolated from the abdominal cavity, spleen and bone marrow of mice. After trypan blue staining, the DMEM culture medium containing 10% fetal bovine serum and 1% calf serum were cultured in RPMI-1640 medium. Inspection; HE staining light microscopy, phagocytosis of chicken red cell function detection, acid phosphatase and nonspecific esterase staining to determine the properties of the adherent cells cultured by biological techniques. The results obtained high purity macrophages, phagocytic characteristics, good phagocytosis and phagocytosis rate of chicken red cells. 94.68% of the abdominal cavity, 92.47% of spleen and 93.11% bone marrow, the positive rate of acid phosphatase staining was 89.43% in the abdominal cavity, 85.21% in the spleen and 88.55% in the bone marrow, and the positive rate of alpha acetate esterase acetate esterase was 85.32% in the abdominal cavity and 81.81% in the spleen, and the bone marrow 85.76%.. Conclusion that 3 different parts of the mice can be easily and practically separated from the macrophages, which can meet the different research. Objective.
【作者單位】: 咸陽市疾病預(yù)防控制中心;陜西師范大學(xué)附屬中學(xué)分校;
【分類號(hào)】:R392
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本文編號(hào):2042186
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