Maxadilan對(duì)人脂肪干細(xì)胞的影響
本文選題:Maxadilan + 短波紫外線 ; 參考:《中國(guó)病理生理雜志》2015年03期
【摘要】:目的:探討垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽Ⅰ型受體(PAC1受體)特異激動(dòng)劑maxadilan對(duì)人脂肪干細(xì)胞(adipose-derived stem cells,ASCs)的增殖、凋亡和分化潛能的作用。方法:取人脂肪組織通過(guò)酶消化法分離培養(yǎng)ASCs。流式細(xì)胞術(shù)鑒定ASCs表面標(biāo)志物,并進(jìn)行ASCs向成骨成脂定向誘導(dǎo)。CCK-8法和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)maxadilan對(duì)ASCs活性的影響。采用波長(zhǎng)為254 nm的紫外線(ultraviolet C,UVC)照射ASCs,CCK-8法測(cè)定不同劑量的UVC誘導(dǎo)ASCs凋亡后的吸光度。選擇劑量為702 J/m2的UVC照射ASCs 24 h后,用流式細(xì)胞術(shù)和caspase 3和caspase 9試劑盒檢測(cè)maxadilan對(duì)ASCs凋亡的影響。結(jié)果:流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)表明細(xì)胞CD29、CD44、CD59和CD105表面抗原陽(yáng)性,證實(shí)所提取的細(xì)胞是ASCs。CCK-8法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)80 nmol/L濃度的maxadilan對(duì)ASCs促增殖作用最強(qiáng),流式細(xì)胞術(shù)分析也證實(shí)80 nmol/L maxadilan處理顯著促進(jìn)ASCs的增殖,與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與僅被702 J/m2UVC照射的ASCs比較,80 nmol/L maxadilan顯著抑制同等劑量UVC照射ASCs所誘導(dǎo)的、與caspase 3和caspase 9活性相關(guān)的細(xì)胞凋亡,2組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。同時(shí),2組細(xì)胞成骨和成脂的誘導(dǎo)分化均為陽(yáng)性。結(jié)論:Maxadilan促進(jìn)ASCs增殖,抑制ASCs凋亡,且不改變細(xì)胞向成骨和成脂誘導(dǎo)分化的潛能。Maxadilan有利于ASCs的體外生長(zhǎng)與擴(kuò)增。
[Abstract]:Aim: to investigate the effects of maxadilan, a specific agonist of pituitary adenylate cyclase activated peptide type I receptor (PAC1 receptor), on the proliferation, apoptosis and differentiation potential of adipose-derived stem cells (ASCs) from human adipose stem cells. Methods: human adipose tissue was isolated and cultured by enzyme digestion. The surface markers of ASCs were identified by flow cytometry, and the effects of maxadilan on the activity of ASCs were detected by lipogenic induction. CCK-8 and flow cytometry. The absorbance of ASCs induced by different doses of UVC was measured by using ultraviolet (UVC) irradiation at 254 nm. ASCs were irradiated with 702 J / m2 UVC for 24 h. The apoptosis of maxadilan was detected by flow cytometry and caspase 3 and caspase 9 kits. Results: flow cytometry showed that CD29, CD4, CD59 and CD105 surface antigens were positive. It was confirmed that the extracted cells were the most effective in promoting proliferation of ASCs with 80 nmol / L concentration of maxadilan by ASCs.CCK-8 assay. Flow cytometry analysis also confirmed that 80 nmol / L maxadilan treatment significantly promoted the proliferation of ASCs, compared with the control group, the difference was statistically significant (P 0.05). Compared with those exposed only to 702J / m2 UVC, 80nmol / L maxadilan significantly inhibited the apoptosis induced by the same dose of UVC, and there was a significant difference between the two groups in terms of apoptosis related to the activities of caspase 3 and caspase 9 (P 0.05). At the same time, osteogenesis and adipogenic differentiation were positive in both groups. Conclusion: Maxadilan can promote the proliferation of ASCs and inhibit the apoptosis of ASCs. Maxadilan does not change the potential of osteogenic and adipogenic differentiation of ASCs. Maxadilan is beneficial to the growth and expansion of ASCs in vitro.
【作者單位】: 暨南大學(xué)附屬第一醫(yī)院眼科;暨南大學(xué)再生醫(yī)學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;暨南大學(xué)醫(yī)學(xué)院眼科研究所;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81371689) 廣東省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.S2013010013391)
【分類號(hào)】:R329.2
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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本文編號(hào):2024179
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