磷酸鞘胺醇對小鼠單核巨噬細(xì)胞吞噬功能的調(diào)控及機(jī)制研究
本文選題:吞噬 + 單核巨噬細(xì)胞。 參考:《中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào)》2015年09期
【摘要】:采用Western blot、免疫熒光和PCR檢測小鼠單核巨噬細(xì)胞系RAW264.7中S1P受體1-3(S1PR1-3)的表達(dá),然后應(yīng)用吞噬實(shí)驗(yàn)和免疫熒光的方法檢測磷酸鞘胺醇(sphingosine 1-phosphate,S1P)對其吞噬功能的調(diào)節(jié)。分別應(yīng)用藥理學(xué)工具和小干擾RNA的方法研究S1P調(diào)節(jié)其吞噬活性的作用機(jī)制。結(jié)果顯示,小鼠單核巨噬細(xì)胞系RAW264.7表達(dá)S1PR1-3;S1P劑量依賴地增強(qiáng)小鼠單核巨噬細(xì)胞系RAW264.7的吞噬功能,應(yīng)用S1PR2或S1PR3的拮抗劑和si RNAs可抑制S1P增強(qiáng)的小鼠單核巨噬細(xì)胞系RAW264.7的吞噬活性;而應(yīng)用S1PR1的拮抗劑和si S1PR1并不影響S1P增強(qiáng)的RAW264.7的吞噬作用;且S1P可以顯著上調(diào)RAW264.7中S1PR2和S1PR3的表達(dá),但是不改變S1PR1的表達(dá),提示S1P通過正反饋機(jī)制增強(qiáng)其介導(dǎo)的小鼠單核巨噬細(xì)胞系RAW264.7的吞噬功能。結(jié)果表明,S1P/S1PR2/3信號通路增強(qiáng)小鼠單核巨噬細(xì)胞吞噬活性,為單核巨噬細(xì)胞吞噬作用的分子機(jī)制調(diào)控研究提供了新線索。
[Abstract]:Western blot, immunofluorescence and PCR were used to detect the expression of S1P receptor 1-3P1PR1-3 in mouse monocyte macrophage cell line RAW264.7. The phagocytic function of sphingosine 1-phosphateS1P was detected by phagocytosis test and immunofluorescence. Pharmacological tools and small interfering RNA were used to study the mechanism of S1P regulating phagocytic activity. The results showed that the phagocytic activity of mouse mononuclear macrophage RAW264.7 was enhanced in a dose-dependent manner by using S1PR2 or S1PR3 antagonists and siRNAs. The phagocytic activity of murine mononuclear macrophage RAW264.7 was inhibited by using S1PR2 or S1PR3 antagonists. The antagonists of S1PR1 and si S1PR1 did not affect the phagocytosis of RAW264.7 enhanced by S1P, and S1P significantly up-regulated the expression of S1PR2 and S1PR3 in RAW264.7, but did not change the expression of S1PR1. The results suggested that S1P enhanced the phagocytic function of mouse macrophage RAW264.7 mediated by S1P through positive feedback mechanism. The results showed that S1P / S1PR2 / 3 signaling pathway enhanced the phagocytic activity of murine mononuclear macrophages and provided a new clue for the study of the molecular mechanism of mononuclear macrophage phagocytosis.
【作者單位】: 首都醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(批準(zhǔn)號:81430013) 北京市屬高等學(xué)校創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)建設(shè)與教師職業(yè)發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(批準(zhǔn)號:IDHT20150502)資助的課題~~
【分類號】:R392.12
【共引文獻(xiàn)】
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本文編號:2022496
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