本文選題：microRNA + miR-��； 參考：《現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展》2015年26期

【摘要】：目的:MicroRNA(miRNA)是一類對基因表達(dá)起著轉(zhuǎn)錄后調(diào)控的小分子RNA,在正常發(fā)育和疾病發(fā)生過程中都發(fā)揮著重要的功能。其中,miR-9是一個序列高度保守的成員,在神經(jīng)發(fā)育中調(diào)節(jié)神經(jīng)干細(xì)胞的多種行為,包括分化、遷移等。但是,目前研究發(fā)現(xiàn)的miR-9的功能還存在一些相互矛盾和不清楚的地方,因此,我們擬構(gòu)建miR-9的過表達(dá)載體,以便于對miR-9進(jìn)一步的仔細(xì)研究。方法:我們采用分子克隆的常用方法,以pcDNA6.2-GW/miR為基礎(chǔ),構(gòu)建出pcDNA6.2-GW/miR-9的表達(dá)質(zhì)粒,分別用PCR、酶切和測序的方法驗證質(zhì)粒構(gòu)建的正確性,并在Hela細(xì)胞和NIH3T3細(xì)胞中驗證該質(zhì)粒是否可以過表達(dá)miR-9小分子。結(jié)果:我們成功構(gòu)建出正確的pc DNA6.2-GW/miR-9表達(dá)質(zhì)粒,并且該質(zhì)粒無論在人源的Hela細(xì)胞還是在小鼠源性的NIH3T3細(xì)胞中都可以過表達(dá)miR-9小分子。結(jié)論:構(gòu)建了一個在不同種屬間通用的miR-9過載體,為我們進(jìn)一步研究miR-9的功能奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:Objective: microRNAs miRNAs are a class of small RNAs which play a role in normal development and disease development. MiR-9 is a highly conserved member that regulates neural stem cell behavior in neural development, including differentiation, migration, and so on. However, the functions of miR-9 found in the present study are still contradictory and unclear. Therefore, we intend to construct the over-expression vector of miR-9 for further careful study of miR-9. Methods: the expression plasmids of pcDNA6.2-GW / miR-9 were constructed based on pcDNA6.2-GW / miR-9 by molecular cloning methods, and the correctness of plasmid construction was verified by PCR, restriction endonuclease digestion and sequencing, respectively. The expression of miR-9 in Hela cells and NIH3T3 cells was examined. Results: we successfully constructed the correct expression plasmid of pc DNA6.2-GW / miR-9, which can overexpress miR-9 in both human Hela cells and mouse derived NIH3T3 cells. Conclusion: a general vector of miR-9 was constructed, which laid a foundation for further study on the function of miR-9.
【作者單位】： 西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬紅會醫(yī)院;
【基金】：西安市紅會醫(yī)院院級科研基金項目(YJ2013013)
【分類號】：R3416;Q78

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號：2014616