LPS激活巨噬細胞NLRP3炎性小體的作用研究
本文選題:脂多糖 + 巨噬細胞。 參考:《熱帶醫(yī)學雜志》2015年04期
【摘要】:目的探討脂多糖(LPS)激活巨噬細胞NLRP3炎性小體的作用。方法用佛波酯誘導人單核細胞(THP-1)分化為巨噬細胞。實驗分為對照組、LPS組、LPS+NLRP3 si RNA組、LPS+Scrambled si RNA組。采用免疫熒光染色檢測核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體家族pyrin結(jié)構(gòu)域蛋白3(NLRP3)和凋亡相關(guān)斑點樣蛋白ASC的共定位、Western blotting檢測NLRP3蛋白的表達、ELISA檢測細胞培養(yǎng)上清白介素1β(IL-1β)的濃度。結(jié)果與對照組相比,NLRP3和ASC蛋白的共定位明顯增多,LPS組NLRP3蛋白的表達增強。LPS還能使細胞培養(yǎng)上清IL-1β的濃度顯著升高,NLRP3 si RNA干擾后細胞培養(yǎng)上清IL-1β的濃度顯著降低。結(jié)論LPS可以促進炎性小體成分NLRP3、ASC的表達,激活NLRP3炎性小體,刺激巨噬細胞分泌炎癥因子IL-1β。
[Abstract]:Objective to investigate the role of lipopolysaccharide (LPS) in activating inflammatory corpuscles of macrophage NLRP3. Methods Human monocytes were induced to differentiate into macrophages by phorbol ester. The experiment was divided into two groups: control group, LPS NLRP3 si RNA group and LPS scrambled si RNA group. The expression of NLRP3 protein in the supernatant of nucleotide binding oligodeoxyribonucleotide receptor family (pyrin domain protein 3nLRP3) and apoptosis-related dot-like protein (ASC) was detected by immunofluorescence staining. The expression of NLRP3 protein was detected by Elisa and the concentration of IL-1 尾 in the supernatant of cell culture was detected by Elisa. Results compared with the control group, the co-localization of NLRP3 and ASC protein was significantly increased. The expression of NLRP3 protein in LPS group was enhanced. LPS could also significantly increase the concentration of IL-1 尾 in the supernatant of cell culture and decrease the concentration of IL-1 尾 in cell culture supernatant after the interference of NLRP3 si RNA. Conclusion LPS can promote the expression of NLRP3ASC, activate the inflammatory corpuscles of NLRP3, and stimulate macrophages to secrete the inflammatory factor IL-1 尾.
【作者單位】: 中山大學中山醫(yī)學院病理生理教研室;
【基金】:國家自然科學基金(81370371)
【分類號】:R392
【參考文獻】
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【共引文獻】
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,本文編號:1993368
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