本文選題：骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 + 神經(jīng)元　； 參考：《中國病理生理雜志》2010年07期

【摘要】：目的:探討caveolin-1在骨髓間質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)分化為神經(jīng)細(xì)胞中的作用。方法:實(shí)驗(yàn)分為未轉(zhuǎn)染組、轉(zhuǎn)染組(轉(zhuǎn)染Rn-caveolin-1-siRNA)、陽性對照組(轉(zhuǎn)染Rn-MAPK-1control siRNA)及陰性對照組(轉(zhuǎn)染negative control siRNA)4組。采用β-巰基乙醇誘導(dǎo)大鼠MSCs分化為神經(jīng)細(xì)胞。倒置熒光顯微鏡下觀察MSCs轉(zhuǎn)染后熒光表達(dá)情況;RT-PCR檢測caveolin-1和促分裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)mRNA的表達(dá)變化;免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測caveolin-1、神經(jīng)元烯醇化酶(NSE)、神經(jīng)微絲亞單位(NF-M)和膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)的表達(dá)變化;MTT方法檢測細(xì)胞存活率。結(jié)果:(1)siRNA轉(zhuǎn)染72h,MSCs熒光表達(dá)最強(qiáng),轉(zhuǎn)染率可達(dá)(81.5±2.8)%;而且轉(zhuǎn)染組MSCs的caveolin-1mRNA轉(zhuǎn)錄下降(P0.05);MTT提示轉(zhuǎn)染組細(xì)胞存活率無顯著變化(P0.05)。(2)β-巰基乙醇可以誘導(dǎo)MSCs向神經(jīng)細(xì)胞分化,其中以轉(zhuǎn)染組誘導(dǎo)效果最佳,NSE、NF-M的表達(dá)率顯著高于其它各組(P0.01)。(3)隨誘導(dǎo)時間延長,各組caveolin-1表達(dá)持續(xù)增加,誘導(dǎo)6d達(dá)到峰值,與誘導(dǎo)前、誘導(dǎo)6h相比有顯著差異(P0.05)。此外,轉(zhuǎn)染組與其它各組同時點(diǎn)的caveolin-1表達(dá)均顯著降低(P0.01)。結(jié)論:以caveolin-1為標(biāo)記蛋白的脂筏在MSCs誘導(dǎo)分化為神經(jīng)細(xì)胞中可能起到重要的調(diào)控作用。
[Abstract]:Objective: to investigate the role of caveolin-1 in differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells into neural cells. Methods: the experiment was divided into non-transfection group, transfected Rn-caveolin-1-siRNA-transfected group, positive control group (Rn-MAPK-1control siRNA-transfected group) and negative control group (transfected negative control siRNA)4 group). Rat MSCs was induced to differentiate into nerve cells by 尾-mercaptoethanol. Reverse fluorescent microscope was used to observe the expression of MSCs after transfection. RT-PCR was used to detect the expression of caveolin-1 and mitogen-activated protein kinase (1(MAPK1)mRNA). The expression of caveolin-1, neuronal enolase NSE, neurofilament subunit (NF-M) and glial fibrillary acidic protein (GFAP) were detected by immunocytochemistry. Results the fluorescence expression of MSCs was the strongest in 72hs transfected with MSCs, the transfection rate was 81.5 鹵2.8, and the caveolin-1mRNA transcription of MSCs in transfection group was decreased (P0.05). The results showed that there was no significant change in cell survival rate in transfected group. 尾 -mercaptoethanol could induce the differentiation of MSCs into neural cells. The expression rate of NSE-NF-M in the transfection group was significantly higher than that in the other groups (P 0.01). The expression of caveolin-1 in each group continued to increase and reached its peak value on the 6th day after induction. There was a significant difference between the two groups at 6 h after induction (P 0.05). In addition, the expression of caveolin-1 was significantly decreased in the transfection group and other groups at the same time. Conclusion: lipid rafts with caveolin-1 as a marker may play an important role in the differentiation of nerve cells induced by MSCs.
【作者單位】： 鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.30770758) 河南省教育廳自然科學(xué)研究計劃資助項(xiàng)目(No.2008A320032)
【分類號】：R329.21

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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4 賈延R，

本文編號：1974122