發(fā)布時間：2018-05-30 00:13

  本文選題：丙型肝炎病毒 + HMGB1　； 參考：《湖南大學》2013年碩士論文

【摘要】：丙型肝炎病毒（HCV）為單股正鏈RNA病毒，感染了全世界約1.7億人，可導致慢性肝炎、肝硬化、肝癌等嚴重的肝臟疾病。聯(lián)合使用聚乙二醇干擾素和利巴韋林是經典的丙肝治療方法，但約50%的1型HCV病人對此耐藥，研發(fā)丙肝的新療法迫在眉睫，而對HCV生活周期的闡述則為抗病毒研究提供治療的靶標。高遷移率族蛋白1（HMGB1）是一種非組蛋白核蛋白，調節(jié)染色質的結構和功能。在病毒感染宿主細胞時，HMGB1既能抑制登革熱病毒和水泡性口炎病毒等病毒的復制，又能促進禽流感病毒的復制，本課題主要研究肝細胞中HMGB1對HCV生活周期的影響。 我們運用siRNA和shRNA等RNA干擾手段，對肝癌細胞系Huh7、Huh7.5以及HLCZ01中的HMGB1進行基因沉默。在HCV感染Huh7.5和HLCZ01，以及NDV感染Huh7的實驗中，沉默HMGB1導致細胞中的病毒含量降低，，過表達HMGB1則導致HCV在HLCZ01細胞中的含量升高，同時IFNβ的表達水平與細胞中病毒含量呈正相關性，這些結果預示著肝細胞中的HMGB1能夠促進病毒復制，并且不是通過影響細胞的先天免疫反應實現(xiàn)的。免疫熒光結果顯示，HCV的感染誘導了肝細胞中的HMGB1由胞核向胞質的轉移。通過免疫共沉淀和RNA結合蛋白免疫共沉淀實驗證實，HMGB1不與HCV的core、NS2、NS5A等病毒蛋白結合，而與HCV的負鏈RNA結合。這些實驗數(shù)據顯示，HCV感染肝細胞后，HMGB1從胞核轉移至胞質，通過結合HCV負鏈RNA促進HCV的復制。我們的研究對于HMGB1在病毒感染中的功能，以及HCV的生活周期有了新的闡述，為抗病毒研究提供了一種新的靶標、思路和方法。
[Abstract]:Hepatitis C virus (HCV) is a single strand of positive chain RNA virus, infected with about 170 million people worldwide, and can lead to chronic hepatitis, cirrhosis, liver cancer and other serious liver diseases. The combination of peginterferon and Leigh Bhave Lin is a classic hepatitis C treatment, but about 50% of type 1 HCV patients are resistant to this, and the new therapy for hepatitis C is imminent. The elaboration of the HCV life cycle provides a target for the treatment of antiviral research. High mobility group protein 1 (HMGB1) is a non histone nucleoprotein that regulates the structure and function of chromatin. When the virus infects the host cell, HMGB1 can inhibit the replication of dengue virus and vesicular stomatitis virus and promote the avian influenza virus. In this project, we mainly studied the effect of HMGB1 on the life cycle of HCV in hepatocytes.
We use RNA interference such as siRNA and shRNA to silencing the HMGB1 in the cell lines of Huh7, Huh7.5 and HLCZ01. In HCV infected Huh7.5 and HLCZ01, and NDV infection Huh7, the silence caused the decrease of the virus content in the cells. There is a positive correlation between the expression level and the virus content in the cells. These results indicate that HMGB1 in the hepatocytes can promote the replication of the virus and is not achieved by affecting the innate immune response of the cells. The immunofluorescence results show that the infection of HCV induces the transfer of HMGB1 from the nucleus to the cytoplasm in the liver cells. By immunoprecipitation and RN A binding protein immunoprecipitation assay demonstrated that HMGB1 does not bind to HCV's core, NS2, NS5A and other viral proteins, and is associated with negative chain RNA of HCV. These experimental data show that HMGB1 is transferred from the nucleus to the cytoplasm after HCV infection of the liver cells, and promotes replication by combining HCV negative strand RNA. The new life cycle of HCV has provided a new target, train of thought and method for antiviral research.
【學位授予單位】：湖南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R373.21

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 雷迎峰;RNAi研究進展[J];國外醫(yī)學.分子生物學分冊;2002年04期

2 李力兵,張立生,左連富;氟烷和七氟醚對兔肝細胞DNA及RNA的影響[J];中華麻醉學雜志;1994年02期

3 趙可佳,程浩;小干預RNA在某些病毒性疾病的研究現(xiàn)狀[J];國外醫(yī)學.皮膚性病學分冊;2004年01期

4 朱汝森;RNAi實現(xiàn)策略的新進展[J];國外醫(yī)學.臨床生物化學與檢驗學分冊;2004年03期

5 張建軍,陳楓,鐘森,唐坤華,史小玲,王明勇,彭建一;乙型肝炎病毒C區(qū)反義RNA靶向肝細胞抗病毒的研究[J];中華肝臟病雜志;2000年03期

6 黃海;RNA干擾技術的進展及應用[J];國外醫(yī)學.泌尿系統(tǒng)分冊;2003年S1期

7 郭麗新,郭新民,李亞娟,王桂云,張利群;動物組織中核酸提取與鑒定的試驗改進[J];牡丹江醫(yī)學院學報;1994年04期

8 趙西平，王寶菊，楊燕，楊東亮，郝連杰;慢性肝病患者肝組織中HGV抗原的表達及意義[J];中華肝臟病雜志;1998年02期

9 齊艷華,王康孫,洪杉;PRK術后角膜基質內Ⅰ型和Ⅲ型膠原的mRNA表達[J];眼科;2000年01期

10 毛寧,洪智勇,張巖芳,黃諺諺,吳松剛;利用啤酒酵母提取RNA的氨法工藝研究Ⅱ[J];藥物生物技術;2000年01期

相關會議論文 前10條

1 鞏志忠;;不依賴于小RNA介導的轉錄基因沉默[A];植物分子生物學與現(xiàn)代農業(yè)——全國植物生物學研討會論文摘要集[C];2010年

2 岳洋;朱化彬;郝海生;杜衛(wèi)華;趙學明;王棟;;牛精子總RNA制備及mRNA線性擴增的初步研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學會動物繁殖學分會第十五屆學術研討會論文集（上冊）[C];2010年

3 王海濤;金春順;;RNA干涉沉默CXCR4基因對喉癌Hep-2細胞株侵襲、轉移的影響[A];吉林省醫(yī)學會第九次耳鼻咽喉—頭頸外科學術會議論文匯編[C];2011年

4 李士澤;趙雅楠;李玉恒;楊煥民;;冷誘導RNA結合蛋白的結構與功能[A];全國動物生理生化第十一次學術交流會論文摘要匯編[C];2010年

5 王潔;劉金亮;陰筱;高瑞;李向東;劉煥庭;;HC-Pro三個參與抑制RNA沉默氨基酸位點的鑒定[A];植�？萍紕�(chuàng)新與病蟲防控專業(yè)化——中國植物保護學會2011年學術年會論文集[C];2011年

6 康磊;王榮福;閆平;;放射性標記對小干擾RNA在體內分布的無創(chuàng)性示蹤研究[A];中華醫(yī)學會第九次全國核醫(yī)學學術會議論文摘要匯編[C];2011年

7 王峰;張秋平;陳金湘;;棉花總RNA的快速提取方法[A];中國棉花學會2011年年會論文匯編[C];2011年

8 趙慶華;田紀偉;王雷;董雙海;王震;劉誠垎;;RNA干擾環(huán)氧化酶2對人腰椎退變終板軟骨細胞生長增殖及凋亡的影響[A];第十九屆中國康協(xié)肢殘康復學術年會論文選集[C];2010年

9 孫凱;汪謙;;液相芯片技術在小分子RNA檢測分析中的應用[A];肝臟病防治學術研討會及新進展學習班�？痆C];2005年

10 張暉;覃君慧;柳金雄;馮亞玫;陳秋生;;Sox2 RNA探針的制備及其mRNA在早期雞胚中的原位雜交檢測[A];中國畜牧獸醫(yī)學會動物解剖學及組織胚胎學分會第十六次學術研討會論文集[C];2010年

相關重要報紙文章 前10條

1 唐永煌;肝病治療宜趨利避害[N];健康時報;2005年

2 趙文;“古藺肝蘇”可改善肝細胞功能[N];中國醫(yī)藥報;2007年

3 上官婉兒;預防藥物傷肝[N];四川科技報;2006年

4 蔡fg東;酒精是肝炎病毒的“幫兇”[N];家庭醫(yī)生報;2005年

5 健康時報記者 鄭帆影;乙肝攜帶者多補維生素[N];健康時報;2007年

6 北京地壇醫(yī)院肝病專家 崔振宇邋口述 健康時報記者 戴志悅 整理;護肝別“大動肝火”[N];健康時報;2007年

7 蔡鐵勇（主任醫(yī)師）;要了解損害肝臟的因素[N];上海中醫(yī)藥報;2006年

8 呂萍;如何認識肝炎主要癥狀的出現(xiàn)[N];農村醫(yī)藥報（漢）;2008年

9 劉彬;乙肝需要復查的化驗項目有哪些[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報;2005年

10 祝閱武;茴三硫的抗氧化作用[N];健康報;2007年

相關博士學位論文 前10條

1 楊瑞梅;單鏈抗體介導狂犬病毒shRNA靶向制劑的研究[D];甘肅農業(yè)大學;2010年

2 鄂繼福;應用RNA干擾技術沉默Med-19基因及其對大腸癌細胞增殖影響研究[D];第二軍醫(yī)大學;2010年

3 馬進;水稻條紋病毒（RSV）RNA3、RNA4的克隆與抗RSV轉基因水稻的培育[D];山東農業(yè)大學;2011年

4 張t

本文編號：1953052