發(fā)布時間：2018-05-27 23:15

  本文選題：尼古丁 + 小鼠胚胎干細胞��； 參考：《浙江大學》2010年碩士論文

【摘要】：煙堿(Nicotine),俗名尼古丁,是一種存在于茄科植物中的生物堿,也是煙草的重要成分。當尼古丁進入人體后,會產(chǎn)生很多作用：如四肢末梢血管收縮、呼吸變快、心跳加快、血壓上升、精神狀況發(fā)生改變(例如變得情緒穩(wěn)定或精神興奮),并促進血小板凝集,是造成心臟血管堵塞、高血壓、中風等心臟血管性疾病的主要幫兇。尼古丁會使人上癮或者產(chǎn)生依賴性,重復使用尼古丁會增加心臟搏動速率、升高血壓并降低食欲。另外,有研究表明,尼古丁可直接影響精子生成,阻礙精子的發(fā)生和成熟。 胚胎干細胞(embryonic stem cells, ESCs)是從哺乳動物囊胚時期的內(nèi)細胞團(InnerCellMass)的分離出來的,能夠在體外保持未分化狀態(tài),并且能夠進行高度增殖的多潛能細胞,它具有體外培養(yǎng)無限增殖、自我更新和多向分化等特性。無論在體外還是體內(nèi),胚胎干細胞都能被誘導分化為幾乎所有的細胞類型,它可以發(fā)展為胚體后的生物系統(tǒng),用于模擬體內(nèi)細胞與組織間復雜的相互作用,在藥物研究領域具有廣泛的用途。胚胎干細胞最重要的應用是分化為各種類型的細胞,用于細胞療法,為細胞移植提供無免疫原性的材料,任何涉及喪失正常細胞的疾病,都可以通過移植由胚胎干細胞分化而來的特異性組織細胞進行治療。例如用胰島細胞治療糖尿病,用神經(jīng)細胞治療神經(jīng)退行性疾病(帕金森病、亨氏舞蹈癥等),用心肌細胞修復壞死的心肌等。 本文通過經(jīng)典的心肌細胞誘導方法,首先用小鼠胚胎干細胞制備得到擬胚體(embryoid bodies, EB s),再通過誘導分化獲得心肌細胞。設立常規(guī)培養(yǎng)的陰性對照,正常心肌誘導的陽性對照以及加入不同濃度尼古丁的實驗組,經(jīng)過15天的誘導后,RT-PCR結(jié)果顯示,與陽性對照組相比,尼古丁促進了mES干性基因Oct-4,Rex-1的表達,抑制了心肌分化標志基因α-actin, desmin, cTnI表達,提示尼古丁促進mES細胞增殖的同時對心肌分化有一定的抑制作用。臨床研究表明,女性在懷孕期間吸煙,會導致嬰兒心室間隔缺損和右側(cè)阻塞性缺陷；接受過心臟移植的病人即使少量吸煙,都會增加其發(fā)病率和死亡率的危險性。本實驗為臨床治療方案的確定以及使用尼古丁戒煙產(chǎn)品存在的潛在風險闡明了理論基礎
[Abstract]:Nicotine, commonly known as nicotine, is an alkaloid found in plants of the family Solanaceae, and is also an important component of tobacco. When nicotine enters the body, it has a number of effects: contracting blood vessels at the extremities, breathing faster, beating faster, rising blood pressure, changing mental conditions (e.g. becoming emotionally stable or psychologically excited, and promoting platelet agglutination). It is a major accomplice in cardiovascular diseases such as heart blockage, high blood pressure, stroke and so on. Nicotine can be addictive or dependent. Repeated use of nicotine increases heart rate, raises blood pressure and reduces appetite. In addition, studies have shown that nicotine directly affects spermatogenesis and hinders spermatogenesis and maturation. Embryonic stem cells, ESCs) is isolated from the inner cell mass of mammalian blastocyst. It can maintain undifferentiated and highly proliferative multipotential cells in vitro, and it has unlimited proliferation in vitro. Self-renewal and multi-differentiation. In vitro and in vivo, embryonic stem cells can be induced to differentiate into almost all cell types, which can be developed into post-embryonic biological systems that mimic complex interactions between cells and tissues in vivo. It has a wide range of applications in the field of drug research. The most important application of embryonic stem cells is to differentiate into various types of cells, to be used in cell therapy, to provide non-immunogenic materials for cell transplantation, any disease involving the loss of normal cells. Can be treated by transplanting specific histocytes derived from embryonic stem cells. For example, islet cells are used to treat diabetes, nerve cells to treat neurodegenerative diseases (Parkinson's disease, Henderson's chorea, etc.), cardiomyocytes to repair necrotic myocardium, and so on. In this paper, embryoid bodieses, EB sr. were prepared from mouse embryonic stem cells by classical cardiomyocyte induction method, and then cardiomyocytes were obtained by inducing differentiation. After 15 days of induction, the negative control group, the positive control group induced by normal myocardium and the experimental group with different concentrations of nicotine were established. The results of RT-PCR showed that compared with the positive control group, Nicotine promoted the expression of Oct-4N Rex-1, inhibited the expression of 偽 -actinin, desmin and cTnI, suggesting that nicotine could inhibit the proliferation of mES cells and inhibit myocardial differentiation. Clinical studies have shown that smoking during pregnancy can lead to ventricular septal defect and right obstructive defect in infants, and that even a small amount of smoking in patients undergoing heart transplantation increases the risk of morbidity and mortality. This experiment clarifies the theoretical basis for the determination of clinical treatment plan and the potential risk of nicotine smoking cessation products.
【學位授予單位】：浙江大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2010
【分類號】：R329

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本文編號：1944201