金黃色葡萄球菌tst-1基因敲除菌株的構(gòu)建
本文選題:金黃色葡萄球菌 + tst-。 參考:《微生物學(xué)雜志》2015年06期
【摘要】:抽提金黃色葡萄球菌834菌株的基因組DNA,PCR克隆擴增tst-1及tst-1的上、下游基因,通過將tst-1上、下游基因分別重組到載體質(zhì)粒p AULA中,形成同源重組質(zhì)粒p AULA-Δtst-1,將p AULA-Δtst-1電轉(zhuǎn)入細菌內(nèi),進行同源重組,以PCR、Western blot鑒定tst-1基因敲除菌株無tst-1基因片段,且無TSST-1蛋白表達,表明已成功構(gòu)建金黃色葡萄球菌tst-1基因的敲除菌株。
[Abstract]:The upstream and downstream genes of tst-1 and tst-1 were cloned and amplified by genomic DNA-PCR extraction from Staphylococcus aureus 834 strain. The upstream and downstream genes of tst-1 were recombined into vector plasmid p AULA to form homologous recombinant plasmid pAULA- 螖 tst-1, and pAULA- 螖 tst-1 was electrotransferred into bacteria. After homologous recombination, tst-1 gene knockout strain without tst-1 gene fragment and TSST-1 protein expression was identified by Western blot, which indicated that the knockout strain of tst-1 gene of Staphylococcus aureus had been successfully constructed.
【作者單位】: 中國醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)教研室;中國醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院口腔修復(fù)學(xué)教研室;
【基金】:遼寧省博士科研啟動基金項目(20111109)
【分類號】:R378.11;Q78
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