本文選題：線粒體自噬受體Bnip + 載體構(gòu)建　； 參考：《生物技術(shù)》2015年04期

【摘要】：[目的]獲得可用于蛋白晶體篩選的高純度Bnip3蛋白。[方法]將Bnip3截斷基因構(gòu)建到原核表達載體上并轉(zhuǎn)化大腸桿菌。IPTG誘導表達后通過GST柱純化目標蛋白。TEV酶切除GST標簽后采用凝膠過濾層析純化Bnip3蛋白。[結(jié)果]Bnip3截斷基因重組體成功構(gòu)建并誘導表達目標蛋白。通過GST親和層析得到可溶性的攜帶GST標簽的Bnip3(1~111)和Bnip3(1~152)蛋白。切除GST標簽的Bnip3(1~152)通過凝膠過濾層析得到構(gòu)象均一的二聚體蛋白。[結(jié)論]采用原核表達、親和層析和凝膠過濾層析可獲得構(gòu)象均一的高純度二聚體Bnip3蛋白。
[Abstract]:[objective] to obtain high purity Bnip3 protein for protein crystal screening. [methods] the Bnip3 truncated gene was constructed into the prokaryotic expression vector and transformed into E. coli. IPTG induced expression. The target protein was purified by GST column and the GST label was removed. The Bnip3 protein was purified by gel filtration chromatography. [results] the recombinant Bnip3 truncated gene was successfully constructed and induced to express the target protein. GST affinity chromatography was used to obtain soluble GST labeled Bnip3G (1 / 111) and Bnip3n (1 / 152) proteins. The conformational dimer protein was obtained by gel filtration chromatography. [conclusion] High purity Bnip3 protein with homogeneous conformation can be obtained by prokaryotic expression, affinity chromatography and gel filtration chromatography.
【作者單位】： 廣東醫(yī)學院附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科;廣東醫(yī)學院附屬醫(yī)院兒科;
【基金】：廣東省自然科學基金項目(No.S2013040012902) 國家自然科學青年基金項目(No.31300602)資助~~
【分類號】：R363;Q786

【參考文獻】

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【共引文獻】

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本文編號：1892463