本文選題：姜辣素 + 水貂　； 參考：《青島大學(xué)》2010年博士論文

【摘要】： 目的： 嘔吐是胃內(nèi)容物返入食道,經(jīng)口吐出的一種反射動作。嘔吐可將進入胃內(nèi)的有害物質(zhì)吐出,是機體的一種防御性反射,有一定保護作用。但多數(shù)情況下,嘔吐是一種存在于多種疾病或條件下的難以忍受的癥狀。一般分為反射性、中樞性、前庭障礙性、神經(jīng)官能性四大類嘔吐,涉及幾十種疾病,尤其是癌癥放化療可誘發(fā)患者出現(xiàn)頻繁劇烈的嘔吐,引起脫水、電解質(zhì)平衡紊亂等并發(fā)癥,使病人的生活質(zhì)量明顯下降,影響了癌癥患者治療的依從性。因此,如何有效防治放、化療嘔吐成為多國科學(xué)家研究的重要課題。 現(xiàn)臨床止吐藥主要是化學(xué)類藥物,如組胺、膽堿、多巴胺、SP等受體拮抗劑,作用靶點單一,副作用大,亟需探索天然、低毒、廣譜、多靶點止吐藥。 中藥生姜被稱為“嘔家圣藥”,治療嘔吐療效確切歷史悠久,已有2000多年的歷史。姜辣素(gingerols)是生姜中主要活性成分,探討姜辣素止吐作用及其機制,可為揭開生姜止吐之謎和創(chuàng)制新型止吐藥物提供新思路。 本文運用新型水貂嘔吐模型和經(jīng)典大鼠異嗜模型,從中樞和外周兩個角度,器官和細胞兩個水平,從三個方面研究姜辣素作用機制：①姜辣素在水貂急性嘔吐模型的作用及對5-HT、DA及SP表達的影響；②姜辣素在水貂延遲性嘔吐模型的作用及對NK1受體表達的影響；③姜辣素在大鼠異嗜模型的作用及對c-fos、NK1受體及膽囊收縮素(CCK)、降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)、胃動素(MTL)的影響。 方法： 1.姜辣素在水貂急性嘔吐模型的作用及對5-HT、DA及SP表達的影響： 將水貂隨機分為6組(n=6)：①空白對照組、②模型對照組、③恩丹西酮陽性對照組、④姜辣素小劑量組、⑤姜辣素中劑量組、⑥姜辣素大劑量組。觀察順鉑注射后6h內(nèi)的嘔吐指標(biāo),包括嘔吐潛伏期,干嘔,嘔吐次數(shù)。并在6h觀察期結(jié)束后,取極后區(qū)腦組織及距幽門20cm處回腸組織,采用高效液相色譜法測定外周及中樞5-HT及DA表達,免疫組化方法測定外周及中樞SP表達。 2.姜辣素在水貂延遲性嘔吐模型的作用及對NK1受體表達的影響： 分組與給藥同前,觀察順鉑給藥后72h內(nèi)的嘔吐指標(biāo),記錄干嘔次數(shù)及嘔吐次數(shù)。72h觀察期結(jié)束后,取極后區(qū)腦組織及距幽門20cm處回腸組織,采用免疫組化方法及Western-blot方法測定姜辣素對水貂外周及中樞NKl受體表達水平的影響。 3.姜辣素在大鼠異嗜模型的作用及對c-fos、NK1受體、CCK、CGRP、MTL的影響： 將大鼠隨機分為8組(n=6)：①正常動物+生理鹽水組、②正常動物+姜辣素組、③模型對照組、④阿瑞吡坦對照組、⑤恩丹西酮對照組、⑥姜辣素小劑量組、⑦姜辣素中劑量組、⑧姜辣素大劑量組。觀察各組給藥后72h內(nèi)異嗜高嶺土行為,每6小時觀察和記錄大鼠進食高嶺土量。在72h觀察期結(jié)束后腹主動脈取血,并立即分別截取大鼠極后區(qū)腦組織和距幽門15cm處的回腸組織。分別采用免疫組化方法測定姜辣素對外周及中樞c-fos表達的影響；RT-PCR方法測定姜辣素對外周及中樞NK1受體表達的影響；放免法測定姜辣素對血漿CCK、CGRP、MTL表達的影響。 結(jié)果： 1.姜辣素在水貂急性嘔吐模型的作用及機制研究： 順鉑給藥(ip)后,模型組6只水貂6h內(nèi)均發(fā)生嘔吐,嘔吐潛伏期短,干嘔和嘔吐次數(shù)均增多；而姜辣素大、中、小三個劑量組干嘔及嘔吐次數(shù)均減少,嘔吐潛伏期增加,與模型對照組比較差異顯著(P0.01)；姜辣素大劑量組與止吐陽性藥恩丹西酮組相同。 免疫組化和高效液相結(jié)果表明：模型對照組水貂外周回腸組織及中樞極后區(qū)腦組織中5-HT、DA及SP水平均升高(P0.01)。而姜辣素大、中、小三個劑量組外周回腸組織及中樞極后區(qū)腦組織的5-HT、DA及SP水平均降低,與模型對照組比較有差異(P0.05)；而恩丹西酮對照組極后區(qū)腦組織中5-HT水平也降低(P0.01)；但是對回腸組織中升高的5-HT水平無降低作用(P0.05)；同時恩丹西酮對照組對回腸組織和極后區(qū)腦組織中升高的DA及SP表達無降低作用(P0.05)。 2.姜辣素在水貂延遲性嘔吐模型的作用及機制研究： 順鉑給藥(ip)后,模型對照組水貂在24h急性嘔吐期和24-72h延遲性嘔吐期均有干嘔和嘔吐反應(yīng)。姜辣素大、中、小三個劑量在24h急性嘔吐期和延遲性嘔吐期干嘔及嘔吐次數(shù)均減少(P0.01)。恩丹西酮對照組干嘔及嘔吐次數(shù)在24h急性嘔吐期均有減少(P0.05),在延遲期與模型對照組相比無差異(P0.05)。 免疫組化和Western-blot測定結(jié)果表明：水貂回腸組織與極后區(qū)腦組織中NKl受體表達增高(P0.01)；姜辣素大、中、小三個劑量組較模型組NK1受體表達水平均降低(P0.01),有劑量相關(guān)性(P0.05),與恩丹西酮對照組相比也有差異(P0.01)。恩丹西酮對照組NKl受體免疫組化及Western-blot表達與模型對照組相比無差異(P0.05)。 3.姜辣素在大鼠異嗜模型的作用及機制研究： 順鉑給藥(ip)后,模型對照組大鼠有明顯異嗜高嶺土行為,在急性嘔吐期和延遲性嘔吐期高嶺土攝食量均增多(P0.01)。而姜辣素大、中、小三個劑量組急性期和延遲期的嗜土量與模型對照組相比均減少(P0.01)。與陽性止吐藥恩丹西酮對照組相比,姜辣素大劑量組在24h急性嘔吐期嗜土量無差異(P0.05)；但在24-72h延遲性嘔吐期姜辣素大、中、小三個劑量組嗜土量均減少(P0.05)。與阿瑞吡坦對照組相比,姜辣素三個劑量組在24h急性期和24-72h延遲期嗜土量減少作用均弱于阿瑞吡坦對照組。恩丹西酮對照組大鼠在急性期內(nèi)異嗜高嶺土量減少(P0.01),但在延遲性嘔吐期嗜土量與模型組相比無差異(P0.05)；阿瑞吡坦對照組在急性期和延遲性嘔吐期大鼠嗜土量均減少(P0.05)。 免疫組化結(jié)果表明：模型對照組大鼠回腸組織和極后區(qū)腦組織c-fos表達增加(P0.05)；而姜辣素大、中、小三個劑量組外周及中樞組織中c-fos表達水平與模型對照組相比降低有差異(P0.05),有劑量相關(guān)性(P0.05)；而姜辣素大、中、小三個劑量組外周和中樞組織中c-fos表達水平均低于恩丹西酮對照組和阿瑞吡坦對照組(P0.05)。 RT-PCR結(jié)果表明：模型對照組大鼠回腸組織和極后區(qū)腦組織NK1受體mRNA表達均增加(P0.05)；姜辣素大、中、小三個劑量組外周及中樞組織中NK1受體表達水平與模型對照組相比均有降低(P0.05),有劑量相關(guān)性(P0.05)；與恩丹西酮對照組相比,姜辣素大、中、小三個劑量組外周及中樞組織中NK1受體表達水平均有降低(P0.05)；與阿瑞毗坦對照組相比無差異(P0.05)。 放射免疫結(jié)果表明：模型對照組大鼠血漿CCK、CGRP、MTL表達均有增加(P0.05)；而姜辣素大、中、小三個劑量組CCK、CGRP及MTL表達水平與模型對照組比較均降低(P0.05),有劑量相關(guān)性(P0.05)；與恩丹西酮對照組和阿瑞吡坦對照組相比,其CCK、CGRP、MTL的表達也均有減少(P0.05)。 結(jié)論： 1.用順鉑可制備水貂急性嘔吐模型,并可增加水貂急性嘔吐模型外周及中樞DA、5-HT及SP的表達；姜辣素可抑制順鉑誘導(dǎo)的水貂急性期嘔吐反應(yīng),并可抑制外周和中樞DA、5-HT及SP的異常表達。 2.用順鉑可制備水貂延遲性嘔吐模型,并可增加其外周和中樞NK1受體的表達；姜辣素可抑制順鉑誘導(dǎo)的水貂延遲性嘔吐反應(yīng),并抑制外周和中樞NK1受體的異常增高,有劑量相關(guān)性。 3.用順鉑可制備大鼠異嗜模型,并可增加外周和中樞NK1受體、c-fos及血漿CCK、CGRP、MTL的表達；姜辣素可抑制順鉑誘導(dǎo)的大鼠異嗜模型的嘔吐反應(yīng),并抑制外周和中樞NK1受體、c-fos及血漿CCK、CGRP、MTL的異常表達,有劑量相關(guān)性。
[Abstract]:Purpose :



The vomiting is a reflex action of the stomach contents returning to the esophagus and through the mouth . The vomiting is a defensive reflex of the body and has a certain protective effect . However , in most cases , the vomiting is a kind of intolerable symptom which exists in many diseases or conditions . Generally , it is divided into reflex , central , vestibular obstruction , and neuro - functional four kinds of vomiting .



At present , the clinical anti - vomiting drugs are mainly chemical drugs such as histamine , choline , dopamine , SP and the like receptor antagonists , the action target is single , the side effect is large , the natural , low - toxicity , broad - spectrum and multi - target antidodrugs are needed to be explored .



The traditional Chinese medicine " gingerols " is the main active ingredient in ginger , and the mechanism of curcumin is discussed .



In this paper , the effect of curcumin on the acute vomiting model of mink and its effect on the expression of 5 - HT , DA and SP were studied from three aspects : 1 ) the effect of curcumin on the acute vomiting model of mink and the expression of 5 - HT , DA and SP .
( 2 ) The effect of curcumin on delayed vomiting model of mink and its effect on NK1 receptor expression ;
( 3 ) The effects of curcumin on c - fos , NK1 receptors and kinin ( CCK ) , calcitonin gene - related peptide ( CGRP ) , and gastric motility in rats .



Method :



1 . Effects of curcumin on acute vomiting model in mink and its effects on 5 - HT , DA and SP expression :



Six groups ( n = 6 ) were randomly divided into six groups ( n = 6 ) : 鈶，

本文編號：1886371