本文選題：PeroxiredoxinⅠ + PeroxiredoxinⅡ�。� 參考：《福建醫(yī)科大學(xué)》2008年碩士論文

【摘要】： 目的: 觀察抗氧化酶PeroxiredoxinⅠ和Ⅱ( PrxⅠ和Ⅱ)在昆明小鼠輸卵管和子宮的分布及其周期性變化。觀察PrxⅡ?qū)ッ餍∈笾踩肭芭甙l(fā)育和克服2-細(xì)胞阻滯的作用。 方法: 1.免疫組織化學(xué)方法觀察PrxⅠ和Ⅱ在昆明小鼠輸卵管和子宮的分布。 2.蛋白免疫印跡技術(shù)檢測PrxⅠ和Ⅱ在小鼠動(dòng)情期和動(dòng)情間期的表達(dá)變化。 3.收集昆明小鼠1-細(xì)胞胚,采用微滴培養(yǎng)法連續(xù)培養(yǎng),觀察在M16培養(yǎng)液中添加PrxⅡ蛋白對植入前胚發(fā)育的影響,觀察其是否能克服2-細(xì)胞阻滯。 4.收集昆明小鼠(阻滯品系小鼠)和B6C3F1小鼠(非阻滯品系小鼠)1-細(xì)胞胚,采用微滴培養(yǎng)法連續(xù)培養(yǎng),觀察在M16培養(yǎng)液(37℃、5%CO2和飽和濕度培養(yǎng)條件下)各自的發(fā)育情況。 5.應(yīng)用激光共聚焦掃描顯微鏡技術(shù)結(jié)合特異性熒光探針2’, 7’二氯熒光黃雙乙酸酯,檢測昆明小鼠體外培養(yǎng)與體內(nèi)發(fā)育2-細(xì)胞胚以及昆明小鼠與B6C3F1小鼠體外培養(yǎng)2-細(xì)胞胚內(nèi)活性氧自由基(ROS)水平差異。 結(jié)果: 1.在輸卵管中,PrxⅠ和Ⅱ免疫陽性反應(yīng)見于輸卵管上皮;而子宮內(nèi),PrxⅠ免疫陽性反應(yīng)分布于內(nèi)膜上皮、腺體上皮和內(nèi)膜基質(zhì)內(nèi)細(xì)胞,而PrxⅡ主要見于內(nèi)膜基質(zhì)內(nèi)細(xì)胞。 2.蛋白免疫印跡技術(shù)也顯示這兩型蛋白在輸卵管和子宮均表達(dá),動(dòng)情期和動(dòng)情間期這兩型蛋白在輸卵管和子宮中的表達(dá)水平無顯著性差異。 3.昆明小鼠1-細(xì)胞胚在添加PrxⅡ蛋白的M16培養(yǎng)液中培養(yǎng),其4-細(xì)胞胚發(fā)育率與對照組無顯著性差異。 4.昆明小鼠1-細(xì)胞胚在M16中培養(yǎng)多數(shù)停滯于2-細(xì)胞期,基本無法發(fā)育至囊胚;而B6C3F1小鼠1-細(xì)胞胚發(fā)育良好,絕大多數(shù)可越過2-細(xì)胞期且大多數(shù)可發(fā)育至囊胚,兩者的4-細(xì)胞胚和囊胚發(fā)育率均有顯著性差異。 5.昆明小鼠體外培養(yǎng)2-細(xì)胞胚內(nèi)ROS水平顯著低于體內(nèi)發(fā)育2-細(xì)胞胚,差別有顯著性意義;亦低于B6C3F1小鼠體外培養(yǎng)2-細(xì)胞胚內(nèi)ROS水平,但差別無顯著性意義。 結(jié)論: 抗氧化酶PrxⅠ與Ⅱ在輸卵管和子宮中表達(dá)穩(wěn)定,可能為受精和胚胎發(fā)育提供抗氧化的良好微環(huán)境。但是PrxⅡ?qū)ッ餍∈笾踩肭芭甙l(fā)育無明顯作用,不能克服2-細(xì)胞阻滯,這可能是體外培養(yǎng)2-細(xì)胞胚內(nèi)ROS并不高的緣故,提示正常培養(yǎng)條件下,胚內(nèi)ROS水平升高或許并不是引起昆明小鼠2-細(xì)胞阻滯的主要原因。
[Abstract]:Objective: The distribution and periodic changes of antioxidant enzymes Peroxiredoxin 鈪，

本文編號：1876275