發(fā)布時間：2018-05-06 05:23

  本文選題：牽張成骨 + 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞　； 參考：《中國口腔頜面外科雜志》2015年03期

【摘要】：目的:探討整合素信號通路在牽張成骨(distraction osteogenesis,DO)中的作用及轉(zhuǎn)導(dǎo)機制。方法:通過構(gòu)建粘著斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)特異性si RNA慢病毒表達載體,感染牽張前骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow derived mesenchymal stem cells,BMSCs),應(yīng)用自行研制的多單元細(xì)胞拉伸與壓縮裝置,對感染后的BMSCs施加適當(dāng)?shù)臋C械張應(yīng)力。在牽張結(jié)束后,收取時間點0、6、12和24 h后的RNA及蛋白,采用RT-PCR與Western免疫印跡法,檢測重要信號分子FAK、整合素β1(integrinβ1)和整合素連接激酶(integrin-linked kinase,ILK)的表達,同時檢測BMSCs細(xì)胞增殖及骨向分化轉(zhuǎn)錄因子Runx2、成骨因子堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的表達變化情況。采用SPSS 20.0軟件包對數(shù)據(jù)進行單因素方差分析。結(jié)果:FAK基因沉默后,與對照組相比,FAK特異性si RNA慢病毒組骨向分化因子Runx 2、ALP表達減弱,整合素重要信號分子integrinβ1和ILK表達也顯著減弱。結(jié)論:FAK基因被抑制后,對BMSCs的骨向分化有一定影響。整合素信號通路參與細(xì)胞力學(xué)信號向生物化學(xué)信號的轉(zhuǎn)化。
[Abstract]:Objective: To investigate the role and transduction mechanism of integrin signaling pathway in distraction osteogenesis (DO). Methods: by constructing focal adhesion kinase (FAK) specific Si RNA Lentivirus Expression Vector and infection of pre distraction bone marrow mesenchymal stem cells (bone marrow derived). An appropriate mechanical tensile stress was applied to the infected BMSCs with a self developed multi cell stretching and compression device. After the end of the stretch, the RNA and protein were collected after the time point 0,6,12 and 24 h. The RT-PCR and Western immunoblotting methods were used to detect the important signal molecules FAK, integrin beta 1 (integrin beta 1) and integrin kinase (integrin-li). The expression of nked kinase, ILK) and the expression of BMSCs cell proliferation and bone differentiation transcription factor Runx2, the expression of osteogenic factor alkaline phosphatase (alkaline phosphatase, ALP). The data were analyzed by single factor variance analysis using SPSS 20 software package. Results: FAK base was silent, FAK specificity Si slow virus group compared with the control group. The expression of bone differentiation factor Runx 2, ALP decreased, and the expression of integrin beta 1 and ILK of integrin important signal molecules also decreased significantly. Conclusion: after the inhibition of FAK gene, the osteogenic differentiation of BMSCs has a certain effect. The integrin signaling pathway participates in the transformation of the cell mechanical signal to the biochemical signal.

【作者單位】： 四川大學(xué)華西口腔醫(yī)院正頜與關(guān)節(jié)外科 口腔疾病研究國家重點實驗室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81100779)~~
【分類號】：R329.2

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本文編號：1850975