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堿性鞘磷脂酶基因剔除鼠的基因型和表型特征

發(fā)布時(shí)間:2018-05-01 08:27

  本文選題:堿性鞘磷脂酶 + 基因剔除小鼠。 參考:《中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào)》2015年05期


【摘要】:目的為研究alk-SMase在結(jié)腸癌發(fā)生發(fā)展中的作用提供動(dòng)物模型的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。方法將野生型(WT,+/+)、雜合子(+/-)、純合子(KO,-/-)alk-SMase基因剔除小鼠剪尾提取DNA,PCR法作基因型鑒定;取其肝腸組織進(jìn)行HE染色、激光共聚焦分析以及質(zhì)譜儀檢測(cè),觀察和分析不同基因型鼠的表型特征。結(jié)果與WT和雜合子比較,KO鼠顯示:外觀和體重?zé)o明顯區(qū)別;基因型鑒定出現(xiàn)一個(gè)條帶,其分子量為247 bp;小腸黏膜明顯增厚,但alk-SMase表達(dá)減弱;質(zhì)譜分析顯示在腸道和肝臟中的鞘磷脂含量增高,1-磷酸鞘氨醇含量增加,而神經(jīng)酰胺含量降低。結(jié)論 alk-SMase KO鼠有明顯特征,但其外觀和體重與其他基因型比較沒(méi)有明顯區(qū)別,為研究alk-SMase的生物功能提供了一個(gè)理想的動(dòng)物模型。
[Abstract]:Objective to provide experimental data for the study of the role of alk-SMase in the development of colon cancer. Methods Wild-type WT-T, / T, heterozygous (/) homozygotes were extracted from the tail of the homozygous mice to identify their genotypes by DNA polymerase chain reaction (DNA-PCR), and their liver and intestines were detected by HE staining, confocal laser analysis and mass spectrometer analysis, and the results were as follows: (1) the liver and intestine tissues were detected by HE staining, laser confocal analysis and mass spectrometer analysis. The phenotypic characteristics of different genotypes of mice were observed and analyzed. Results compared with WT and heterozygote, KO mice showed no significant difference in appearance and body weight, a band with a molecular weight of 247bp was found in genotypic identification, and the intestinal mucosa was thickened, but the expression of alk-SMase was decreased. Mass spectrometric analysis showed that the sphingomyelin content in the intestine and liver was increased, and the sphingosine 1-phosphate content was increased, while the ceramide content was decreased. Conclusion alk-SMase KO mice have obvious characteristics, but their appearance and body weight are not significantly different from those of other genotypes, which provides an ideal animal model for studying the biological function of alk-SMase.
【作者單位】: 南通大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院腫瘤研究所中心實(shí)驗(yàn)室;南通大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心;瑞典LUND大學(xué)胃腸營(yíng)養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:江蘇省創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)人才基金(項(xiàng)目號(hào):蘇人才2013-41)
【分類(lèi)號(hào)】:R735.35;R-332

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):1828542

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