本文選題：臍帶 + 間充質(zhì)干細(xì)胞　； 參考：《汕頭大學(xué)》2010年碩士論文

【摘要】：目的:研究人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(Human Umbilical Cord Wharton’s Jelly-derived Mesenchymal Stem Cells ,huMSCs)及其誘導(dǎo)分化為生殖樣細(xì)胞后的免疫學(xué)特性,為進(jìn)一步研究huMSCs移植特性提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法:分離培養(yǎng)huMSCs,在生殖細(xì)胞培養(yǎng)條件下定向誘導(dǎo)其分化,倒置相差顯微鏡下觀察誘導(dǎo)后細(xì)胞形態(tài)。采用FACScan流式細(xì)胞儀檢測(cè)誘導(dǎo)前后huMSCs表面抗原CD40、CD40L、CD80、CD86。半定量RT-PCR檢測(cè)誘導(dǎo)前后huMSCs的HLA-I、HLA-DR基因表達(dá)水平的變化。用CCK-8法檢測(cè)誘導(dǎo)前后的不同數(shù)量級(jí)huMSCs對(duì)混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)體系中經(jīng)植物血凝素(PHA)激活的同種異體外周血淋巴細(xì)胞(PBMC)增殖的影響。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)誘導(dǎo)前后huMSCs對(duì)經(jīng)PHA活化的T細(xì)胞分泌IFN-γ的影響。 結(jié)果: huMSCs在生殖細(xì)胞培養(yǎng)條件下能分化為生殖樣細(xì)胞,誘導(dǎo)前后的huMSCs均表達(dá)HLA-I,不表達(dá)CD40、CD40L、CD80、CD86和HLA-DR。huMSCs能抑制經(jīng)PHA激活的T淋巴細(xì)胞增殖,并抑制T淋巴細(xì)胞IFN-γ的分泌,但huMSCs源生殖樣細(xì)胞并不能抑制經(jīng)PHA激活的T淋巴細(xì)胞增殖及IFN-γ的分泌。 結(jié)論: huMSCs在體外生殖細(xì)胞培養(yǎng)條件定向誘導(dǎo)下,可分化為生殖樣細(xì)胞,這種細(xì)胞與huMSCs一樣具有低免疫原性,同時(shí)huMSCs在體外具有免疫抑制性,但誘導(dǎo)獲得的huMSCs源生殖樣細(xì)胞不能抑制T細(xì)胞的增殖。
[Abstract]:Aim: to study the immunological characteristics of human Umbilical Cord Wharton's Jelly-derived Mesenchymal Stem Cells cells (HMSCs) and its differentiation into reproductive like cells, and to provide experimental evidence for further study on the characteristics of huMSCs transplantation. Methods: huMSCs were isolated and cultured, and the differentiation was induced under germ cell culture condition. The morphology of induced cells was observed under inverted phase contrast microscope. FACScan flow cytometry was used to detect huMSCs surface antigen CD40, CD40, CD40, and CD80, CD86, before and after induction. Semi-quantitative RT-PCR was used to detect the changes of HLA-DR gene expression in huMSCs before and after induction. The effects of different orders of huMSCs before and after induction on the proliferation of PBMCs activated by phytohemagglutinin (PHA) in peripheral blood lymphocytes (PBMCs) were detected by CCK-8 method. Enzyme linked immunosorbent assay (Elisa) was used to detect the effect of huMSCs on the secretion of IFN- 緯 by PHA activated T cells before and after induction. Results: huMSCs could differentiate into reproductive like cells under the condition of germ cell culture. HLA-I was expressed in huMSCs before and after induction. CD40 CD40L, CD80, CD86 and HLA-DR.huMSCs could inhibit the proliferation of T lymphocytes activated by PHA, and inhibit the secretion of IFN- 緯 of T lymphocytes. However, huMSCs derived reproductive cells could not inhibit the proliferation of T lymphocytes activated by PHA and the secretion of IFN- 緯. Conclusion: huMSCs can differentiate into reproductive like cells under the condition of germ cell culture in vitro. This kind of cells has the same low immunogenicity as huMSCs, and huMSCs has immunosuppressive effect in vitro. But the huMSCs derived reproductive cells could not inhibit the proliferation of T cells.
【學(xué)位授予單位】：汕頭大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號(hào)】：R392.1

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本文編號(hào)：1778935