本文選題：Rho激酶 + 突起生長　； 參考：《暨南大學(xué)》2008年碩士論文

【摘要】： 目的:探討Rho激酶對大鼠海馬神經(jīng)元突起生長和細(xì)胞骨架的調(diào)節(jié)。 材料和方法:以原代大鼠海馬神經(jīng)元為觀察對象,用Rho激酶激動劑LPA和抑制劑Y-27632改變細(xì)胞內(nèi)Rho激酶的活性,分別用時差顯微成像技術(shù)觀察神經(jīng)元突起生長的動態(tài)變化,激光共聚焦顯微鏡觀察細(xì)胞骨架分布的變化。 結(jié)果:(1)時差顯微成像結(jié)果:對照組神經(jīng)元一級、二級突起不斷形成,向外延伸,在末端形成三級突起;LPA組神經(jīng)元大部分突起進(jìn)行性塌陷,突起數(shù)量減少,且較細(xì)小;Y-27632組神經(jīng)元胞體上多個一級突起形成,延伸較遠(yuǎn),再分支現(xiàn)象明顯,在遠(yuǎn)側(cè)二級、三級突起生長迅速;Y-27632+LPA組神經(jīng)元一些細(xì)小的一級突起退縮消失,其余突起不斷分支、延伸,一級、二級、三級突起數(shù)量和長度較LPA組增加;LPA+Y-27632組神經(jīng)元一級突起逐漸停止塌陷,然后向外延伸,二級突起生長迅速,在其遠(yuǎn)側(cè)可見三級突起和細(xì)小的四級突起形成。(2)激光共聚焦顯微鏡結(jié)果:神經(jīng)元胞體、突起均有清晰的微管和微絲分布,在細(xì)小突起、突起末梢及絲狀足內(nèi)微絲分布較多;LPA組神經(jīng)元與對照組相比,各級突起尤其是次級突起縮短,數(shù)量減少,微管、微絲在突起內(nèi)分布減少明顯,絲狀足很少;Y-27632組神經(jīng)元突起分支長且多,微管、微絲沿胞體和突起分布,突起遠(yuǎn)端及小分支上微絲的分布較多,有多個細(xì)長的絲狀足在突起上形成;在LPA+Y-27632和Y-27632+LPA組神經(jīng)元各級突起均較豐富,與LPA組相比微管和微絲表達(dá)有明顯改善,在突起遠(yuǎn)端有較豐富的絲狀足。 結(jié)論:(1)抑制Rho激酶可促使神經(jīng)元突起各級分支數(shù)目增加和突起生長。(2)激活Rho激酶可誘導(dǎo)神經(jīng)元突起坍塌,表現(xiàn)為各級突起數(shù)目的減少和長度的縮短。(3)激活Rho激酶后再抑制或抑制Rho激酶后再激活,Rho激酶誘導(dǎo)神經(jīng)元突起回縮的作用均下調(diào),神經(jīng)元突起繼續(xù)生長,各級分支數(shù)目增加。(4)Rho激酶可以通過調(diào)節(jié)細(xì)胞骨架的分布參與突起的生長、延伸及分支形成。
[Abstract]:Objective: To investigate the regulation of Rho kinase on the growth and cytoskeleton of hippocampal neurons in rats.
Materials and methods: in cultured rat hippocampal neurons were observed, with Rho kinase inhibitor Y-27632 agonist LPA and the change of intracellular Rho kinase activity, respectively with the dynamic changes of neuronal growth observed time difference micro imaging technology, to observe the distribution of cytoskeleton in laser scanning confocal microscope.
Results: (1) the time difference imaging results: in the control group, neuron level, two level projections formed continuously extends outward to form three level projections at the end; LPA group of neurons most neurites collapsed, reducing the number of projections, and relatively small; forming a plurality of first level neurites in group Y-27632 neurons, extended a well, then the branch phenomenon is obvious in the far side of the two level, three level neurites grew rapidly; Y-27632+LPA group of neurons small first level neurites retraction disappeared, other neurites continued to branch, extension, level, level two, level three. The number and length were higher than that in LPA group; LPA+Y-27632 group of neurons level processes gradually stop collapse, and then extended outward, two level neurites grew rapidly and formed three small visible protrusions and the four protrusions on its far side. (2) by laser confocal microscopy: neurons, projections are microtubule and microfilament distribution in clear, fine process Since more microfilaments neurite endings and filopodia; neurons in the LPA group compared with the control group, especially secondary ecphyma neurites shortened, reduce the number of microtubules, microfilaments in neurites decreased significantly, filopodia rarely; group Y-27632 neurite branch length and number, microtubule, microfilament distribution along the cell bodies and processes. The distal projections and small branches of microfilament distribution and a plurality of elongated filopodia formation in neurites; in LPA+Y-27632 and Y-27632+LPA groups of neurons neurites were rich, compared with the LPA group the expression of microfilaments and microtubules had improved significantly, there is abundant in the distal neurite filopodia.
Conclusion: (1) inhibition of Rho kinase could promote neurite neurite growth and increase the number of branches. (2) activation of Rho kinase could induce neurite collapse, showed a reduction in the number of neurites and the length decrease. (3) after the activation of Rho kinase inhibition or inhibition of Rho kinase and Rho kinase activation. Induced neurites retraction effects were reduced, the neurites continued to grow, increasing the number of branches. (4) Rho kinase can regulate the cytoskeletal distribution involved in neurite outgrowth, extension and branching.

【學(xué)位授予單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號】：R329

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號：1767680