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硬皮病伴發(fā)肺間質病變小鼠模型的建立及發(fā)病機制研究

發(fā)布時間:2018-04-16 11:24

  本文選題:硬皮病 + 肺間質病變 ; 參考:《復旦學報(醫(yī)學版)》2015年04期


【摘要】:目的建立硬皮病伴發(fā)肺間質病變(systemic scleroderma associated with interstitial lung disease,SscILD)的小鼠動物模型,并初步探討其發(fā)病機制。方法造模組以0.4 mg/mL濃度博來霉素(bleomycin,BLM)背部中央?yún)^(qū)域局部皮下注射0.1 mL/天,連續(xù)28天;對照組以PBS緩沖液(pH=7.4)相同方法處理;連續(xù)觀察2組小鼠大體形態(tài)變化,以HE和Masson染色明確模型的可靠性,通過檢測羥脯氨酸了解纖維化程度,并通過免疫組化檢測TGF-β1、α-SMA、collagen-1、MMP-9、CD8+T細胞、CD68+巨噬細胞、IL-23的表述。結果造模組小鼠皮膚顯著硬化,鏡下真皮層顯著增厚,膠原纖維束增多,排列緊密,膠原含量升高,符合硬皮病表現(xiàn);并且肺組織出現(xiàn)明顯炎癥和纖維化,膠原含量顯著升高,免疫組化檢測發(fā)現(xiàn)TGF-β1、collagen-1、MMP-9、α-SMA、CD8+T細胞、CD68+巨噬細胞、IL-23的表達均顯著性增高(P均0.05)。結論 C3H/He小鼠連續(xù)28天皮下注射0.4 mg/mL的BLM能誘導Ssc-ILD動物模型,出現(xiàn)符合Ssc標準的皮膚改變,肺部出現(xiàn)明顯的炎癥和纖維化,與TGF-β1升高密切相關,并伴隨α-SMA、collagen-1、MMP-9、CD8+T細胞、CD68+巨噬細胞、IL-23增多。
[Abstract]:Objective to establish a murine model of systemic scleroderma associated with interstitial lung disease (SSCILD) of scleroderma with pulmonary interstitial disease, and to explore the pathogenesis of Scleroderma.Methods the model group was treated with 0.4 mg/mL bleomycin bleomycin (BLM) for 28 days subcutaneously, and the control group was treated with PBS buffer solution (pH = 7.4). The gross morphologic changes of the two groups were observed continuously.According to the reliability of HE and Masson staining, the degree of fibrosis was determined by detecting hydroxyproline, and the expression of IL-23 on CD68 macrophages was detected by immunohistochemical staining of TGF- 尾 _ 1, 偽 -SMA-collagen-1MMP-9 / CD8 T cells.Results the skin of the model group was significantly sclerotic, the dermis of the model group was significantly thickened under microscope, the collagenous bundles were increased, the collagenous fibers were arranged closely, the collagen content was increased, which was consistent with the manifestation of scleroderma, and there was obvious inflammation and fibrosis in the lung tissue, and the collagen content increased significantly.The expression of IL-23 in CD68 macrophages of TGF- 尾 1 collagen-1 and 偽 -SMA-CD8 T cells were all significantly increased by immunohistochemistry (P < 0.05).Conclusion the model of Ssc-ILD could be induced by subcutaneously injection of 0.4 mg/mL BLM for 28 days in C3H/He mice, and the skin changes in accordance with the Ssc standard, the obvious inflammation and fibrosis in the lungs, were closely related to the increase of TGF- 尾 _ 1.In addition, the number of IL-23 in CD68 macrophages was increased with 偽 -SMA-collagen-1 MMP-9 and CD8 T cells.
【作者單位】: 復旦大學附屬中山醫(yī)院皮膚科;復旦大學附屬中山醫(yī)院實驗研究中心;復旦大學附屬中山醫(yī)院病理科;
【分類號】:R593.25;R-332

【共引文獻】

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