發(fā)布時(shí)間：2018-04-05 09:36

  本文選題：日本血吸蟲(chóng)　切入點(diǎn)：東方田鼠　出處：《中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院》2010年博士論文

【摘要】： 血吸蟲(chóng)病是一種分布廣泛、危害嚴(yán)重的人畜共患寄生蟲(chóng)病。已報(bào)道在我國(guó)流行的日本血吸蟲(chóng)中國(guó)大陸株可感染40余種哺乳動(dòng)物,日本血吸蟲(chóng)對(duì)不同宿主有著不同的感受性,如在小鼠等易感宿主體內(nèi)血吸蟲(chóng)的發(fā)育率達(dá)60-70%,在大鼠等非易感宿主體內(nèi)的發(fā)育率為10-20%,而血吸蟲(chóng)感染東方田鼠后,大部分蟲(chóng)體在感染后2周死亡,不能發(fā)育成熟。東方田鼠是至今發(fā)現(xiàn)的唯一一種感染血吸蟲(chóng)后不致病的哺乳動(dòng)物,查明其抗血吸蟲(chóng)病機(jī)理具有重要的理論和實(shí)際意義。此前該領(lǐng)域相關(guān)研究多限于形態(tài)觀察、感染、致病和免疫現(xiàn)象等,研究亟待深入發(fā)展。為此,本研究以實(shí)驗(yàn)室感染的來(lái)源于易感宿主BALB/c小鼠,非易感宿主Wistar大鼠及不致病宿主東方田鼠的日本血吸蟲(chóng)10d童蟲(chóng)為研究對(duì)象,應(yīng)用日本血吸蟲(chóng)寡核苷酸芯片技術(shù)比較、分析三種不同宿主來(lái)源的日本血吸蟲(chóng)基因表達(dá)方面的差異。并對(duì)東方田鼠來(lái)源蟲(chóng)體呈低表達(dá)的凋亡抑制基因Sj IAP和呈高表達(dá)的凋亡相關(guān)基因caspase3和caspase 7;在小鼠來(lái)源蟲(chóng)體呈高表達(dá)的生長(zhǎng)發(fā)育、信號(hào)傳導(dǎo)相關(guān)基因Sj MAP 2、Sj mago nashi、Sj Cyclophilin A、Cyclophilin B和Cyclophilin C等進(jìn)行克隆、表達(dá),及生物學(xué)功能初步分析,旨在揭示在不同宿主環(huán)境中,日本血吸蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育差異的分子基礎(chǔ)。研究結(jié)果對(duì)闡明血吸蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育機(jī)制、與宿主相互作用機(jī)理,發(fā)現(xiàn)血吸蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育相關(guān)的重要分子,也可為研制血吸蟲(chóng)病疫苗、新治療藥物和對(duì)血吸蟲(chóng)病防治提供新思路和新途徑。 1、不同宿主來(lái)源日本血吸蟲(chóng)10d童蟲(chóng)形態(tài)觀察及體細(xì)胞凋亡分析 實(shí)驗(yàn)室中以日本血吸蟲(chóng)尾蚴感染小鼠、大鼠和東方田鼠,10d后收集蟲(chóng)體。光鏡下觀察到不同來(lái)源日本血吸蟲(chóng)形態(tài)大小有很大差異,東方田鼠來(lái)源童蟲(chóng)長(zhǎng)402.2±102.2μm,寬159.1±47.3μm,大鼠來(lái)源童蟲(chóng)長(zhǎng)828.3±127.4μm,寬103.4±22.8μm,小鼠來(lái)源童蟲(chóng)長(zhǎng)878.5±137.4μm,寬88.3±20.0μm。掃描電鏡下觀察,東方田鼠來(lái)源童蟲(chóng)蟲(chóng)體萎縮,口吸盤形成空泡,表面結(jié)構(gòu)消失,腹吸盤表面結(jié)構(gòu)改變,體表正常棘消失,萎縮,形成空泡;小鼠和大鼠來(lái)源蟲(chóng)體體表棘等結(jié)構(gòu)無(wú)異常變化。透射電鏡觀察發(fā)現(xiàn),東方田鼠來(lái)源童蟲(chóng)蟲(chóng)體細(xì)胞結(jié)構(gòu)受到破壞,細(xì)胞崩解,細(xì)胞核仁消失,染色質(zhì)凝集,有細(xì)胞凋亡的表現(xiàn)。小鼠和大鼠來(lái)源蟲(chóng)體細(xì)胞形態(tài)正常,細(xì)胞核和線粒體無(wú)明顯變化。利用Annexin V-FITC/propidium iodide (PI)分析不同宿主來(lái)源蟲(chóng)體細(xì)胞凋亡狀況表明,小鼠來(lái)源蟲(chóng)體的凋亡細(xì)胞比例為0.40%;大鼠來(lái)源蟲(chóng)體的凋亡細(xì)胞比例為5.22%;東方田鼠來(lái)源蟲(chóng)體的凋亡細(xì)胞比例為62.91%,表明東方田鼠來(lái)源蟲(chóng)體的細(xì)胞發(fā)生了明顯凋亡。本研究首次利用掃描電鏡和透射電鏡技術(shù),進(jìn)行東方田鼠、大鼠和小鼠來(lái)源日本血吸蟲(chóng)童蟲(chóng)顯微和超微結(jié)構(gòu)的觀察和比較,利用流式細(xì)胞儀檢測(cè)發(fā)現(xiàn)日本血吸蟲(chóng)在不同宿主體內(nèi)的生長(zhǎng)發(fā)育狀況與體細(xì)胞凋亡相關(guān)。 2、不同宿主來(lái)源日本血吸蟲(chóng)童蟲(chóng)基因表達(dá)的芯片分析 應(yīng)用寡核苷酸芯片技術(shù),比較分析小鼠、大鼠和東方田鼠來(lái)源的日本血吸蟲(chóng)10d童蟲(chóng)的基因表達(dá)差異。結(jié)果表明,與小鼠來(lái)源童蟲(chóng)相比,東方田鼠來(lái)源童蟲(chóng)有3293個(gè)基因呈下調(diào)表達(dá)(fold0.5),71個(gè)基因呈上調(diào)表達(dá)(fold2);大鼠來(lái)源童蟲(chóng)有3335個(gè)基因呈下調(diào)表達(dá)(fold0.5),133個(gè)基因呈上調(diào)表達(dá)(fold2)。其中,東方田鼠來(lái)源童蟲(chóng)顯著性下調(diào)表達(dá)基因81個(gè)(fold0.2),顯著性上調(diào)表達(dá)基因18個(gè)(fold5);大鼠來(lái)源童蟲(chóng)顯著性下調(diào)表達(dá)基因210個(gè)(fold0.2),顯著性上調(diào)表達(dá)基因54個(gè)(fold5)。東方田鼠和大鼠來(lái)源童蟲(chóng)具有相似表達(dá)趨勢(shì)的顯著性下調(diào)表達(dá)基因有27個(gè)(fold0.2),顯著性上調(diào)表達(dá)基因有7個(gè)(fold5)。 對(duì)顯著性差異表達(dá)基因進(jìn)行GO分類和KEGG通路等生物信息分析,結(jié)果顯示,東方田鼠來(lái)源童蟲(chóng)顯著性上調(diào)表達(dá)基因主要與細(xì)胞(cell)、細(xì)胞凋亡(apoptosis)、細(xì)胞外組成部分(extracellular region part)、細(xì)胞組成(cell part)、酶調(diào)節(jié)活性(enzyme regulator activity)和轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)活性(translation regulator activity)等相關(guān)。東方田鼠來(lái)源童蟲(chóng)顯著性下調(diào)表達(dá)基因主要與代謝過(guò)程(metabolic process)、催化活性(catalytic activity)、發(fā)育過(guò)程(developmental process)、轉(zhuǎn)運(yùn)活性(transporter activity)、細(xì)胞進(jìn)程(cellular process)、定位(localization)和結(jié)合(binding)等相關(guān)。東方田鼠和大鼠來(lái)源童蟲(chóng)均顯著下調(diào)表達(dá)基因與代謝過(guò)程(metabolic process)、定位(localization)、結(jié)構(gòu)形成自動(dòng)修飾(anatomical structure formation)和催化活性(catalytic activity)等相關(guān)。對(duì)東方田鼠和大鼠來(lái)源童蟲(chóng)均顯著下調(diào)表達(dá)的基因進(jìn)行KEGG pathway通路分析,發(fā)現(xiàn)這些蛋白主要為甘氨酸/蘇氨酸/絲氨酸代謝分子(Glycine,serine and threonine metabolism)、DNA復(fù)制關(guān)鍵分子(DNA replication)、MAPK信號(hào)通路分子(MAPK signaling pathway)、蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)(Protein export)、氨酰基tRNA生物合成(Aminoacyl-tRNA biosythesis)等分子。本研究發(fā)現(xiàn)一批基因在三種宿主來(lái)源10d童蟲(chóng)中呈現(xiàn)差異表達(dá),它們可能是不同宿主來(lái)源童蟲(chóng)發(fā)育差異的關(guān)鍵分子,影響血吸蟲(chóng)在不同宿主中的發(fā)育。如東方田鼠來(lái)源童蟲(chóng)顯著上調(diào)表達(dá),小鼠來(lái)源蟲(chóng)體顯著下調(diào)的基因有與細(xì)胞增殖密切相關(guān)的顆粒蛋白(Granulin)基因,細(xì)胞凋亡通路中發(fā)揮凋亡效應(yīng)的關(guān)鍵分子如Cell death protein 3,Caspase 7,caspase 3;在小鼠來(lái)源童蟲(chóng)顯著上調(diào)表達(dá),東方田鼠來(lái)源童蟲(chóng)顯著下調(diào)表達(dá)的基因中與生長(zhǎng)發(fā)育相關(guān)的甲硫氨酰氨肽酶2 (MAP 2)和Sj magonashi基因,與胰島素代謝相關(guān)的胰島素分子(Insulin-2)和胰島素受體蛋白激酶(insulin receptor protein kinase)基因,與脂肪酸代謝相關(guān)的脂肪酸去飽和酶(Fatty acid desaturase)、長(zhǎng)鏈脂肪酸延伸相關(guān)蛋白(Elongation of very long chain fatty acids protein)、脂肪酸脫氫酶(Fatty-acid amide hydrolase)、脂肪酸結(jié)合蛋白(fatty acid-binding protein)基因,與細(xì)胞凋亡通路中發(fā)揮抑制凋亡效應(yīng)的關(guān)鍵分子相關(guān)Sj IAP(Baculoviral IAP repeat-containing protein)、cytokine-induced apoptosis inhibitor,與信號(hào)傳導(dǎo)相關(guān)的Cyclophilin家族基因、TGF通路分子如Eukaryotic translation initiation factor 3,Transforming growth factor beta-1、Wnt通路分子Wnt inhibitory factor 1等。這些重要功能分子的發(fā)現(xiàn),將為闡明血吸蟲(chóng)在不同宿主生存環(huán)境中的生長(zhǎng)發(fā)育機(jī)制,探討血吸蟲(chóng)與宿主相互作用關(guān)系、發(fā)現(xiàn)新的血吸蟲(chóng)候選疫苗分子和新藥物靶標(biāo)提供重要基礎(chǔ)。 本研究分析獲得了一批小鼠、大鼠和東方田鼠來(lái)源的10d童蟲(chóng)的差異表達(dá)基因信息,初步揭示了在不同宿主體內(nèi)日本血吸蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育的分子基礎(chǔ),發(fā)現(xiàn)了一批在不同宿主環(huán)境中可能影響血吸蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育的關(guān)鍵功能分子,為這些重要差異表達(dá)基因的確定及進(jìn)行生物學(xué)功能研究提供了良好的基礎(chǔ)。 3、日本血吸蟲(chóng)細(xì)胞凋亡因子和凋亡抑制因子(Sj IAP)的研究 基因組水平的研究表明血吸蟲(chóng)與其他多細(xì)胞生物一樣具有凋亡這一生物學(xué)現(xiàn)象。上文透射電鏡研究表明,東方田鼠來(lái)源10d童蟲(chóng)細(xì)胞有細(xì)胞凋亡的現(xiàn)象,同時(shí)芯片分析結(jié)果表明,日本血吸蟲(chóng)凋亡相關(guān)基因caspase3和7在東方田鼠來(lái)源蟲(chóng)體中呈高表達(dá),而在小鼠來(lái)源蟲(chóng)體中呈較低表達(dá);日本血吸蟲(chóng)凋亡抑制因子基因在小鼠來(lái)源蟲(chóng)體中高表達(dá),東方田鼠來(lái)源蟲(chóng)體中低表達(dá),表明日本血吸蟲(chóng)凋亡相關(guān)基因和凋亡抑制因子可能在血吸蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育和寄生蟲(chóng)與宿主相互作用關(guān)系中發(fā)揮重要的生物學(xué)功能,在東方田鼠抗血吸蟲(chóng)機(jī)制中發(fā)揮一定的作用。 本研究進(jìn)行了不同宿主來(lái)源日本血吸蟲(chóng)童蟲(chóng)caspase3/7的活性和基因表達(dá)差異研究;利用RT-PCR技術(shù)獲得了Sj IAP編碼基因的全長(zhǎng)cDNA,PCR擴(kuò)增其mRNA對(duì)應(yīng)基因組DNA序列;熒光實(shí)時(shí)定量PCR和western blot分析表明,該基因?yàn)槌上x(chóng)期雄蟲(chóng)期高表達(dá)基因;免疫組化研究分析表明,蟲(chóng)體IAP蛋白廣泛分布于成蟲(chóng)體被膜;細(xì)胞水平實(shí)驗(yàn)證實(shí)該基因真核重組表達(dá)質(zhì)粒在細(xì)胞水平可以有效抑制誘導(dǎo)劑引起的細(xì)胞凋亡,同時(shí)研究發(fā)現(xiàn)Sj IAP重組蛋白也可以在血吸蟲(chóng)的蟲(chóng)體水平抑制凋亡;Real Time RT-PCR和western blot研究了日本血吸蟲(chóng)凋亡抑制因子基因(IAP)在不同宿主的差異表達(dá)情況。 研究結(jié)果表明細(xì)胞凋亡相關(guān)基因很可能是不同宿主環(huán)境中影響血吸蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育的重要功能分子,在血吸蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育調(diào)控和東方田鼠抗血吸蟲(chóng)病中可能發(fā)揮重要的生物學(xué)功能。 4、日本血吸蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育重要功能分子甲硫氨酰氨肽酶2基因(MAP 2)和mago nashi基因的研究 MAP 2是一種雙功能酶,其催化結(jié)構(gòu)域位于C端,負(fù)責(zé)切除蛋白質(zhì)合成過(guò)程中新生肽鏈N端的起始蛋氨酸,對(duì)蛋白質(zhì)的成熟以及在細(xì)胞中的轉(zhuǎn)運(yùn)和定位、功能調(diào)節(jié)極其重要,其N端結(jié)構(gòu)域含有酸性氨基酸和堿性氨基酸富集的區(qū)域,可以抑制真核起始因子eIF2-2α的磷酸化,促進(jìn)蛋白質(zhì)合成的起始。在哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi),MAP 2與細(xì)胞增值與分化密切相關(guān),MAP 2在秀麗線蟲(chóng)生殖和發(fā)育中發(fā)揮重要的生物學(xué)功能。mago nashi基因在真核生物中廣泛存在,且極為保守。在生物體翻譯轉(zhuǎn)錄中參與mRNA定位和剪切,在生物體生殖與發(fā)育中,mago nashi基因在胚胎早期發(fā)育和生殖細(xì)胞性別決定中發(fā)揮重要的生物學(xué)功能。芯片分析結(jié)果表明,日本血吸蟲(chóng)MAP 2和mago nashi基因在東方田鼠來(lái)源蟲(chóng)體中低表達(dá),大鼠和小鼠來(lái)源蟲(chóng)體中高表達(dá)。 本研究利用RT-PCR技術(shù)分別獲得了Sj MAP 2(日本血吸蟲(chóng)甲硫氨酰氨肽酶2)和Sj mago nashi編碼基因的全長(zhǎng)cDNA(基因登錄號(hào)為:GQ403663和GQ403668)。熒光實(shí)時(shí)定量PCR和western blot分析Sj MAP 2和Sj mago nashi基因在不同期別階段蟲(chóng)體表達(dá)差異,發(fā)現(xiàn)這兩個(gè)基因均為童蟲(chóng)期表達(dá)基因,且在雄蟲(chóng)的表達(dá)量均高于其在雌蟲(chóng)。Real Time RT-PCR和western blot分析Sj MAP 2和Sj mago nashi在不同宿主來(lái)源日本血吸蟲(chóng)童蟲(chóng)的表達(dá)情況,發(fā)現(xiàn)二者均在小鼠來(lái)源童蟲(chóng)中表達(dá)最高,大鼠次之,東方田鼠最低。應(yīng)用吡喹酮處理雌蟲(chóng)和雄蟲(chóng)后,Sj M AP 2表達(dá)均有顯著降低,其中雄蟲(chóng)和雌蟲(chóng)中分別下降92.17%和49.01%。構(gòu)建了這2個(gè)基因的重組表達(dá)質(zhì)粒,并分別在大腸桿菌中成功表達(dá)。Western blotting分析表明重組蛋白rSj MAP 2和rSj mago nashi具有良好的抗原性,應(yīng)用這兩種重組抗原免疫小鼠,與空白對(duì)照組比較,免疫組小鼠獲得的減蟲(chóng)率分別為17.8%和22.43%,肝臟蟲(chóng)卵減少率分別為36.24%和29.11%。 以上研究表明,日本血吸蟲(chóng)Sj MAP 2和Sj mago nashi基因的表達(dá)可能對(duì)血吸蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育有影響,這兩個(gè)基因可能在血吸蟲(chóng)生殖、生長(zhǎng)發(fā)育及細(xì)胞分化中具有重要的生物學(xué)功能。 5、日本血吸蟲(chóng)Cyclophilin家族CyPA、CyPB和CyPC基因的研究 Cyclophilin(CyP)廣泛存在于生物體內(nèi),為一種分布廣泛的細(xì)胞內(nèi)蛋白,在植物、細(xì)菌和哺乳動(dòng)物中均存在,具有高度保守性。CyP具有肽酰脯氨酰順?lè)串悩?gòu)酶(PPIase)活性,在體內(nèi)外能結(jié)合蛋白質(zhì)并催化加速它們的折疊、裝配和轉(zhuǎn)運(yùn);特別是富含脯氨酸的蛋白質(zhì)折疊,起著分子伴侶的作用,同時(shí)在信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中起著重要調(diào)節(jié)作用。信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與蛋白翻譯后修飾在日本血吸蟲(chóng)中發(fā)揮重要的生物學(xué)功能。 本研究利用RT-PCR技術(shù)分別獲得了Sj CyP A、Sj CyPB和Sj CyPC編碼基因的全長(zhǎng)cDNA(基因登錄號(hào)為:GQ403666、GQ403664和GQ403665)。熒光實(shí)時(shí)定量PCR分析這三個(gè)基因在不同期別階段蟲(chóng)體表達(dá)量,發(fā)現(xiàn)這三個(gè)基因均為童蟲(chóng)期高表達(dá)基因。Real Time RT-PCR分別分析Sj CyP A、Sj CyPB和Sj CyPC在不同宿主來(lái)源日本血吸蟲(chóng)童蟲(chóng)的差異表達(dá)情況,發(fā)現(xiàn)三者均在小鼠來(lái)源童蟲(chóng)中表達(dá)最高,大鼠次之,東方田鼠最低。構(gòu)建了這3個(gè)基因的重組表達(dá)質(zhì)粒,并分別在大腸桿菌中成功表達(dá)Western blotting驗(yàn)證表明重組蛋白rSj CyP A、rSj CyPB和rSj CyP C均具有良好的抗原性,在小鼠免疫試驗(yàn)中,與空白對(duì)照組比較,三種蛋白免疫小鼠獲得的減蟲(chóng)率分別為14.2%、26.98%和13.79%;肝臟蟲(chóng)卵減少率分別為43.38%、39.73%和51.32%。 研究表明,日本血吸蟲(chóng)Sj CyP A、Sj CyPB和Sj CyPC基因的表達(dá)可能對(duì)血吸蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育有影響,這三個(gè)基因可能在血吸蟲(chóng)的分子伴侶、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等方面發(fā)揮重要的生物學(xué)功能。 本文以日本血吸蟲(chóng)易感宿主BALB/c小鼠、非易感宿主Wistar大鼠和不致病宿主東方田鼠來(lái)源的10d童蟲(chóng)作為研究對(duì)象,應(yīng)用電鏡觀察表明三種不同宿主來(lái)源的10d童蟲(chóng)在形態(tài)結(jié)構(gòu)上存在較大差異。首次發(fā)現(xiàn)東方田鼠來(lái)源童蟲(chóng)蟲(chóng)體細(xì)胞的凋亡現(xiàn)象顯著大于大鼠和小鼠來(lái)源蟲(chóng)體。首次應(yīng)用寡核苷酸芯片技術(shù)對(duì)三種宿主來(lái)源童蟲(chóng)的差異表達(dá)基因進(jìn)行了比較分析,發(fā)現(xiàn)一些重要的血吸蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育、細(xì)胞凋亡、信號(hào)傳導(dǎo)分子在三種不同宿主來(lái)源蟲(chóng)體呈差異表達(dá),獲得一批具有深入研究?jī)r(jià)值的差異表達(dá)基因信息。首次克隆、鑒定和表達(dá)了Sj MAP2, Sj magonashi, Sj CyPA, Sj CyPB和Sj CyPC五個(gè)血吸蟲(chóng)新基因,登錄號(hào)分別為GQ403663、GQ403668 GQ403666、GQ403664和GQ403665。應(yīng)用以上五種基因重組抗原進(jìn)行了小鼠免疫試驗(yàn),這5個(gè)基因的重組蛋白都誘導(dǎo)了部分免疫保護(hù)作用。首次對(duì)日本血吸蟲(chóng)凋亡抑制基因Sj IAP的生物學(xué)功能進(jìn)行了探索,在細(xì)胞水平驗(yàn)證了該凋亡抑制因子可有效地抑制凋亡誘導(dǎo)劑誘發(fā)的凋亡。本文結(jié)果對(duì)深入探討日本血吸蟲(chóng)的生長(zhǎng)發(fā)育機(jī)制,發(fā)現(xiàn)血吸蟲(chóng)與宿主相互作用關(guān)鍵分子,進(jìn)而為發(fā)現(xiàn)抗血吸蟲(chóng)病新的疫苗候選分子和新的治療藥物靶標(biāo)提供了新思路。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號(hào)】：R346

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 吳榮同;;血吸蟲(chóng)感染32年蟲(chóng)卵成活一例報(bào)告[J];浙江中西醫(yī)結(jié)合雜志;1992年04期

2 施光峰;吡喹酮治療對(duì)血吸蟲(chóng)感染小鼠免疫病理變化的影響[J];上海醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);1998年03期

3 胡廣漢,張紹基,林丹丹,杭春琴,康增華,呂尚標(biāo),張晶,張矩,邱凌,施喬發(fā);健康教育控制湖區(qū)小學(xué)生血吸蟲(chóng)感染的遠(yuǎn)期效果[J];中國(guó)寄生蟲(chóng)學(xué)與寄生蟲(chóng)病雜志;1999年02期

4 戈一峰,王詠梅,方蓉,楊國(guó)斌,夏合金,管曉虹;抗洪搶險(xiǎn)后部隊(duì)血吸蟲(chóng)感染的快速檢測(cè)與預(yù)防[J];東南國(guó)防醫(yī)藥;1999年S1期

5 沈蕾,張兆松;CD4~+T細(xì)胞與血吸蟲(chóng)感染的保護(hù)性免疫[J];中國(guó)寄生蟲(chóng)學(xué)與寄生蟲(chóng)病雜志;2001年04期

6 劉永春,何家昶;蕪湖長(zhǎng)江大橋維護(hù)人員血吸蟲(chóng)感染情況調(diào)查[J];鐵道勞動(dòng)安全衛(wèi)生與環(huán)保;2003年04期

7 李東;朱珠;張e，

本文編號(hào)：1714202