發(fā)布時(shí)間：2018-03-28 01:29

  本文選題：丙型肝炎病毒　切入點(diǎn)：多價(jià)疫苗　出處：《實(shí)用檢驗(yàn)醫(yī)師雜志》2015年04期

【摘要】：目的針對(duì)我國(guó)丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)主要基因型篩選出能有效誘導(dǎo)體液免疫和細(xì)胞免疫的抗原多肽。方法利用生物信息學(xué)方法預(yù)測(cè)評(píng)估我國(guó)HCV主要基因型1b、2a、6a型的優(yōu)勢(shì)B、CTL和Th抗原表位。以HCV-CTL、HCV-B+HCV-Th、HCV-CTL+HCV-B+HCV-Th組合肽作為免疫原免疫BALB/C小鼠,經(jīng)乳酸脫氫酶釋放法檢測(cè)CTL殺傷活性、ELISPOT法檢測(cè)分泌IFN-γ能力、ELISA法檢測(cè)抗體滴度,對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果 SP2/0對(duì)照細(xì)胞未產(chǎn)生特異性免疫應(yīng)答,而SP2/0-NS3實(shí)驗(yàn)細(xì)胞HCV-CTL+HCV-B+HCV-Th和HCV-CTL均誘導(dǎo)了特異性的CTL應(yīng)答,且當(dāng)效靶比為25∶1和50∶1時(shí),三組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=2045,F=6338,P均0.05),且HCVCTL+HCV-B+HCV-Th聯(lián)合免疫激活的CTL活性高于HCV-CTL單獨(dú)免疫,HCV-CTL單獨(dú)免疫高于PBS空白對(duì)照,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.05)。細(xì)胞體液聯(lián)合免疫、單獨(dú)體液免疫、單獨(dú)細(xì)胞免疫刺激的分泌IFN-γ的細(xì)胞數(shù)量差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=5308,P0.05)。單獨(dú)體液免疫、單獨(dú)細(xì)胞免疫刺激的分泌IFN-γ的細(xì)胞數(shù)量均低于細(xì)胞、體液聯(lián)合免疫,單獨(dú)體液免疫刺激的分泌IFN-γ的細(xì)胞數(shù)量高于單獨(dú)細(xì)胞免疫,且差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.05)。不同時(shí)間點(diǎn)不同免疫原所誘導(dǎo)的特異性的Ig G抗體滴度差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.01)。不同時(shí)間點(diǎn)用HCV-CTL+HCV-B+HCV-Th聯(lián)合免疫和HCV-B+HCV-Th免疫所誘導(dǎo)的特異性Ig G抗體滴度均顯著高于PBS空白對(duì)照,且差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.05),而細(xì)胞體液聯(lián)合免疫與單獨(dú)體液免疫之間特異性Ig G抗體滴度經(jīng)比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論 HCV-CTL+HCV-B+HCV-Th聯(lián)合免疫誘導(dǎo)了高效的體液免疫和細(xì)胞免疫應(yīng)答,有望進(jìn)一步開(kāi)發(fā)為有效的重組HCV疫苗。
[Abstract]:Objective to screen out the antigenic polypeptides of hepatitis C virus hepatitis C virus (HCV) genotype which can effectively induce humoral and cellular immunity in China. Methods the bioinformatics method was used to predict and evaluate the superiority of the main genotype of HCV 1bm2ah6a in China. HCV-CTL and Th epitopes were immunized with HCV-CTL hHCV-B HCV-Th-HCV-CTL HCV-B HCV-Th combined peptide as immunogen to immunize BALB/C mice. The cytotoxic activity of CTL was detected by lactate dehydrogenase release assay and Elisa was used to detect the titer of antibody secreting IFN- 緯. The results were statistically analyzed. Results the SP2/0 control cells did not produce a specific immune response. Both HCV-CTL HCV-B HCV-Th and HCV-CTL induced specific CTL responses, and the specific CTL responses were observed at 25:1 and 50:1, respectively. The difference among the three groups was statistically significant (P < 0.05), and the activity of CTL activated by HCVCTL HCV-B HCV-Th was higher than that by HCV-CTL alone, and the difference was statistically significant (P < 0.05). The number of IFN- 緯 secreted by single cellular immunostimulation was significantly different. The number of IFN- 緯 secreting cells stimulated by single humoral immunity was lower than that of cells, and the number of IFN- 緯 secreted by single humoral immunity was lower than that by humoral combined immunization. The number of IFN- 緯 secreting cells stimulated by humoral immunity alone was higher than that of single cellular immunity. The titers of specific IgG antibody induced by different immunogen at different time points were significantly different (P < 0.01). HCV-CTL HCV-B HCV-Th combined immunization and HCV-B HCV-Th immunization at different time points were used to induce Ig G antibody titers. The titers of specific IgG antibody were significantly higher than those of PBS control. The difference was statistically significant (P < 0.05), and the titers of specific IgG antibody between cellular humoral combined immunity and humoral immunity alone were compared. Conclusion combined immunization with HCV-CTL HCV-B HCV-Th can induce highly effective humoral and cellular immune responses, which is expected to be an effective recombinant HCV vaccine.
【作者單位】： 江西省腫瘤醫(yī)院檢驗(yàn)科;江西省兒童醫(yī)院檢驗(yàn)科;
【基金】：江西省科技廳項(xiàng)目(20122BAB215033)
【分類(lèi)號(hào)】：R373.21

【共引文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1674164