本文選題：皮質(zhì)神經(jīng)元　切入點：大鼠　出處：《中國實驗動物學報》2015年04期

【摘要】：目的改良并比較機械分離法、胰蛋白酶消化法和木瓜蛋白酶消化法在大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元培養(yǎng)中的優(yōu)缺點,為科技工作者根據(jù)各自條件選擇合適的培養(yǎng)方法提供理論依據(jù)。方法采用胎齡為16~18 d的SD大鼠胚胎,分別用機械分離、胰酶消化以及木瓜蛋白酶消化三種方法對SD胎鼠皮層神經(jīng)元進行培養(yǎng),并對不同培養(yǎng)時間的神經(jīng)元進行形態(tài)學觀察和免疫熒光顯微鏡純度鑒定。結(jié)果三種方法均能成功培養(yǎng)出雜質(zhì)少且純度高的皮層神經(jīng)元,其在不同生長階段具有典型的形態(tài)學特征。經(jīng)NSE免疫熒光染色,神經(jīng)元純度分別在96.28%,95.63%及97.34%,三組間無統(tǒng)計學差異(P0.05)。結(jié)論三種方法均成功培養(yǎng)出雜質(zhì)量較少且純度高的皮層神經(jīng)元,均可作為神經(jīng)元體外培養(yǎng)的良好實驗?zāi)Ｐ?且三種培養(yǎng)方法都有其不同的特點。
[Abstract]:Objective to compare the advantages and disadvantages of mechanical separation, trypsin digestion and papain digestion in rat cortical neuron culture. To provide theoretical basis for scientific and technological workers to select suitable culture methods according to their respective conditions. Methods SD rat embryos with gestational age of 16 ~ 18 days were mechanically separated. The cortical neurons of SD fetal rats were cultured by trypsin digestion and papain digestion. Morphological observation and immunofluorescence microscopy were carried out on the neurons cultured for different time. Results the cortical neurons with low impurity and high purity could be successfully cultured by the three methods. NSE immunofluorescence staining showed that the purity of neurons was 95.63% and 97.34%, respectively, and there was no significant difference among the three groups (P 0.05). Conclusion the cortical neurons with low impurity and high purity were successfully cultured by the three methods. It can be used as a good experimental model of neuron culture in vitro, and all three methods have their own characteristics.
【作者單位】： 中南大學湘雅醫(yī)學院基礎(chǔ)醫(yī)學院法醫(yī)系;
【基金】：中南大學中央高�；究蒲袠I(yè)務(wù)費專項資金資助(項目代碼:502200372)
【分類號】：R329.2

【參考文獻】

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2 白瑜;趙德明;;大腦皮質(zhì)神經(jīng)元培養(yǎng)中胰蛋白酶消化分離技術(shù)的探討[J];中國畜牧獸醫(yī);2007年06期

3 譚少華;徐安定;苗海鋒;吳宜娟;;胰酶快速消化大鼠皮層神經(jīng)細胞原代培養(yǎng)方法分析[J];中國實用神經(jīng)疾病雜志;2013年08期

4 周暉;毛萌;羅小麗;孫小妹;李勝富;;腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子對缺氧神經(jīng)元的保護作用及其細胞內(nèi)信號傳遞[J];中國臨床康復(fù);2006年25期

5 高雪松;王自能;;純氧與空氣環(huán)境復(fù)蘇對低氧新生大鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)元凋亡的影響[J];中國實驗動物學報;2010年06期

6 裴娜娜;吳麗紅;高永新;毛瑩瑩;羅杰;黃威;劉聞;張屹;顧為望;李紅衛(wèi);;大鼠瘦素基因重組腺相關(guān)病毒的構(gòu)建及在原代神經(jīng)元細胞中的過表達[J];中國實驗動物學報;2013年05期

【共引文獻】

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3 譚志巍;王亞琴;官鵬;武娜;秦豪杰;張錄順;;原代培養(yǎng)大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元中-βTubulin的表達[J];四川解剖學雜志;2007年01期

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5 羅小麗;周暉;孫小妹;李勝富;母得志;毛萌;;腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子經(jīng)由環(huán)磷酸腺苷反應(yīng)元件結(jié)合蛋白磷酸化對缺氧大鼠胚腦皮質(zhì)神經(jīng)元細胞的保護作用[J];生物醫(yī)學工程學雜志;2008年06期

6 辛崗;蘇蕓;王革非;許燕璇;李康生;;新生BALB/c小鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)元細胞培養(yǎng)方法的建立[J];生物技術(shù)通訊;2011年01期

7 彭芳;陸永利;楊紅衛(wèi);;尾核神經(jīng)元的原代培養(yǎng)及離子通道特性的研究[J];中國醫(yī)科大學學報;2012年08期

8 金燦;張丹參;;應(yīng)用均勻設(shè)計-高通量篩選技術(shù)評價丹參有效單體成分抗氧化及海馬神經(jīng)細胞保護作用的最佳配伍[J];神經(jīng)藥理學報;2013年03期

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3 吳國華;氯胺酮對離體海馬神經(jīng)元凋亡及p38MAPK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路活性的影響[D];福建醫(yī)科大學;2013年

4 徐曉東;異丙酚對離體海馬神經(jīng)元存活及p38MAPK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路活性的影響[D];福建醫(yī)科大學;2013年

5 王景;槲皮素對高糖培養(yǎng)SD大鼠海馬神經(jīng)元凋亡及機制的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2012年

6 向勤;山藥多糖抗缺氧/復(fù)氧誘導(dǎo)的胚鼠大腦皮層原代神經(jīng)細胞凋亡研究[D];南昌大學醫(yī)學院;2013年

7 余小蒙;映山紅花總黃酮對大鼠海馬神經(jīng)元缺氧性損傷的保護作用及其對BK_(Ca)通道的影響[D];安徽醫(yī)科大學;2014年

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9 吳越;靜松靈對體外大鼠腦神經(jīng)細胞的麻醉影響研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學;2014年

【二級參考文獻】

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3 曾可斌,胡長林,陳陽美;大鼠海馬神經(jīng)元培養(yǎng)與鑒定[J];基礎(chǔ)醫(yī)學與臨床;2004年05期

4 孫仁宇;;缺氧、低氧和高氧[J];基礎(chǔ)醫(yī)學與臨床;2010年05期

5 王圓圓;張文斌;龔曉兵;郭國慶;陳靜;辛莉;沈偉哉;原林;;大鼠海馬神經(jīng)元neurobasal無血清的原代培養(yǎng)方法[J];暨南大學學報(醫(yī)學版);2008年06期

6 趙士福,蔡文琴,鄧曉林,姚忠祥,李紅麗;大鼠腦缺血過程中神經(jīng)細胞死亡的研究[J];解剖學報;1997年04期

7 李妙齡,楊艷,曾曉榮,劉智飛,裴杰,周文;新生大白鼠大腦皮層神經(jīng)元的培養(yǎng)及其基本電生理學特性研究[J];瀘州醫(yī)學院學報;2003年05期

8 姜曉燕;龔平生;張衛(wèi)民;王志成;李晶;趙剛;龔守良;;胞二磷膽堿對原代培養(yǎng)的中腦多巴胺能神經(jīng)元的保護作用及其機制[J];神經(jīng)解剖學雜志;2006年05期

9 李勝富,毛萌,周暉,李幼平,孫明菡;胚鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)元的最佳分離和培養(yǎng)方法的探討[J];生物醫(yī)學工程學雜志;2001年03期

10 毛萌 ,周暉 ,李勝富;腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子對缺氧胚腦皮質(zhì)神經(jīng)元的保護作用[J];實用兒科臨床雜志;2002年03期

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2 周竹娟;鄭健;徐炎;;胎鼠皮質(zhì)神經(jīng)元細胞核的制備和鑒定[J];卒中與神經(jīng)疾病;2008年02期

3 李娟;王麗;甘淋;劉曉燕;謝華福;何濤;;應(yīng)用蛋白質(zhì)組分析法初步探討膽囊收縮素在皮質(zhì)神經(jīng)元中的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑[J];瀘州醫(yī)學院學報;2006年05期

4 張景華;韓芳;石玉秀;;創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙大鼠內(nèi)側(cè)前額葉皮質(zhì)神經(jīng)元細胞色素C氧化酶表達變化的實驗研究[J];中國組織化學與細胞化學雜志;2009年04期

5 肖榮,閆秀珍,王瑞,喬中東,喬健天;Carbachol阻斷亞硒酸鈉對離體皮質(zhì)神經(jīng)元的致凋亡作用(英文)[J];中國神經(jīng)科學雜志;2001年02期

6 肖榮,竇巖,趙嘉惠,王瑞,閆秀珍,喬健天;c-fos反義寡聚核苷酸對亞硒酸鈉引起的皮質(zhì)神經(jīng)元凋亡的保護作用(英文)[J];神經(jīng)解剖學雜志;2002年02期

7 肖榮,閆秀珍,王瑞,喬健天;亞硒酸鈉對體外培養(yǎng)皮質(zhì)神經(jīng)元的致凋亡作用及相關(guān)基因表達的改變[J];營養(yǎng)學報;1999年02期

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1 王欣;齊巧珍;陳其才;;抑制性輸入對聽皮質(zhì)神經(jīng)元時相特性的影響[A];中國生理學會第23屆全國會員代表大會暨生理學學術(shù)大會論文摘要文集[C];2010年

2 周國鈺;陳曉紅;劉愛伶;蘇興文;邱鵬新;胡學強;;步長腦心通含藥血清抗缺氧誘導(dǎo)的皮質(zhì)神經(jīng)元凋亡的研究[A];第九次全國神經(jīng)病學學術(shù)大會論文匯編[C];2006年

3 苗廣宇;李洪春;呂光享;;腦心通方含藥血清對體外培養(yǎng)大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元缺氧凋亡的影響[A];中華中醫(yī)藥學會中醫(yī)、中西醫(yī)結(jié)合治療常見病研討會論文集[C];2007年

4 肖榮;喬健天;閆秀珍;王瑞;;亞硒酸鈉對體外培養(yǎng)皮質(zhì)神經(jīng)元的致凋亡及相關(guān)基因的調(diào)控作用[A];中國營養(yǎng)學會第四屆老年營養(yǎng)學術(shù)會議論文摘要匯編[C];1999年

5 李春莉;黃文淑;劉息芳;張景海;吳春福;;重組蝎毒活性多肽ANEPⅢ對大鼠海馬和皮質(zhì)神經(jīng)元損傷的保護作用及機制[A];中國藥理學會第十一次全國學術(shù)會議專刊[C];2011年

6 薛小燕;羅煥敏;;原兒茶酸通過A2a受體促進皮質(zhì)神經(jīng)元存活及突起生長[A];中國藥理學會第十一次全國學術(shù)會議�？痆C];2011年

7 黃志華;黎曉;李良東;薛進華;曾靖;;染料木素磺酸鈉對皮質(zhì)神經(jīng)元興奮性毒性損傷的保護作用[A];中國藥理學會第十一次全國學術(shù)會議專刊[C];2011年

8 潘欣蓉;趙慶杰;蘇志強;王德生;;亞低溫對興奮性損傷后的體外培養(yǎng)皮質(zhì)神經(jīng)元突觸生長素表達的影響[A];中華醫(yī)學會第七次全國神經(jīng)病學學術(shù)會議論文匯編[C];2004年

9 于洋;吳紅海;薛改;侯艷寧;秦亞彬;吳潔;;孕酮處理對Aβ_(25-35)誘導(dǎo)的大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元損傷時線粒體凋亡途徑相關(guān)蛋白表達的影響[A];2013年全國老年性癡呆與相關(guān)疾病學術(shù)會議論文匯編[C];2013年

10 趙博;夏中元;高文蔚;高鴻;吳長健;吳洋;;糖原合酶激酶-3β在缺血后處理對腦皮質(zhì)神經(jīng)元保護效應(yīng)中的作用及機制[A];第十五次長江流域麻醉學學術(shù)年會暨2010年中南六省麻醉學學術(shù)年會暨2010年湖北省麻醉學學術(shù)年會論文集[C];2010年

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2 王夢]};Exendin-4對大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元缺血再灌注損傷后內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)性細胞凋亡的影響[D];華中科技大學;2011年

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4 王素玲;LXR在肝臟和腦組織脂質(zhì)代謝中的作用[D];河北醫(yī)科大學;2008年

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1 萬輝;N-Shc、Egr-4和KCC2在局灶性皮質(zhì)發(fā)育不良Ⅱa型相關(guān)難治性癲癇灶未成熟神經(jīng)元中的表達及相關(guān)機制研究[D];福建醫(yī)科大學;2014年

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3 胡欣;黃芩苷對原代培養(yǎng)大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元缺氧缺糖損傷的作用[D];浙江大學;2006年

4 魏計超;孕酮對Aβ_(25-35)誘導(dǎo)的AD樣損傷神經(jīng)元氨基酸類遞質(zhì)系統(tǒng)的影響和機制初探[D];河北醫(yī)科大學;2012年

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本文編號：1668910