發(fā)布時(shí)間：2018-03-21 11:57

  本文選題：MRSA　切入點(diǎn)：克隆進(jìn)化　出處：《中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)》2010年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】： 目的研究MRSA進(jìn)化的基本規(guī)律,勾勒出MRSA進(jìn)化的概略圖。通過病例對照研究獲得我國hVISA感染的相關(guān)臨床信息并對危險(xiǎn)因素和病死率相關(guān)性進(jìn)行分析。初步研究hVISA耐藥機(jī)制相關(guān)基因。 方法收集北京協(xié)和醫(yī)院1994-2008年466株非重復(fù)金黃色葡萄球菌(包括302株MRSA和164株MSSA),進(jìn)行SCCmec、spa、脈沖場凝膠電泳(PFGE)和多位點(diǎn)序列分析(MLST)分型。采用BHIT5(含替考拉寧5μg/ml的腦心浸液瓊脂平皿)、BHIV6(含萬古霉素6μg/ml的腦心浸液瓊脂平皿)和MET法篩選MRSA中的hVISA并使用改良PAP-AUC(菌群譜型分析)法進(jìn)行確認(rèn)。通過病例調(diào)查表(CRF)的形式收集hVISA組和對照組的臨床相關(guān)信息,使用student t檢驗(yàn)、Mann-Whitney檢驗(yàn)、χ2檢驗(yàn)以及fisher精確檢驗(yàn)等統(tǒng)計(jì)方法對病例資料進(jìn)行回顧性分析。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR研究hVISA耐藥相關(guān)基因agr的轉(zhuǎn)錄水平。 結(jié)果302株MRSA共發(fā)現(xiàn)12個(gè)spa型和9個(gè)STs型。在1994-2000年之間,MRSA最流行的克隆是ST239-MRSA-Ⅲ-spa t037;自從2000年開始,ST239-MRSA-Ⅲ-spa t030很快取代以前的優(yōu)勢克隆t037,并且成為最流行的克隆。在2002年,另一個(gè)MRSA克隆ST5-MRSA-Ⅱ-spa t002出現(xiàn),并且一直維持一個(gè)很低的流行水平。164株MSSA共發(fā)現(xiàn)62個(gè)spa型和40個(gè)STs型。在MSSA中,ST398是最常見的STs型,其他依次為ST59、ST7、ST15和ST1。一些MSSA基因型(包括ST398、ST1、ST121和ST59與一些流行的CA-MRSA基因型相同。MLST eBURST分析顯示ST5. ST59和ST965克隆共同存在于MRSA和MSSA中,這提示MRSA可能通過MSSA獲得SCCmec進(jìn)化而來。依照臨床病例資料,2株pvl陽性菌株ST59-MRSA-Ⅳ為CA-MRSA。hVISA組與VSSA組在萬古霉素MIC水平上存在顯著差異(80%versus 24.9%,P0.001),hVISA組萬古霉素MIC值高于VSSA組�；仡櫺圆±龑φ昭芯堪l(fā)現(xiàn),hVISA組和VSSA組在臨床治療、結(jié)局及感染相關(guān)病死率方面無差異。盡管如此,hVISA組與VSSA組住院天數(shù)存在差異(P=0.025),hVISA感染的患者住院時(shí)間延長。與相應(yīng)的VSSA相比,10株hVISA中有9株RNAⅢ的轉(zhuǎn)錄水平下調(diào),其中下調(diào)最大的達(dá)1000倍。 結(jié)論新出現(xiàn)的MRSA克隆ST239-MRSA-Ⅲ-spa t030很快取代了以前的舊克隆ST239-MRSA-Ⅲ-spa t037,這說明這15年間北京協(xié)和醫(yī)院MRSA流行克隆發(fā)生了一個(gè)快速的變遷。hVISA組萬古霉素MIC水平顯著高于VSSA組,但多種新型抗菌藥物對其具有良好活性。hVISA感染與萬古霉素治療失敗無相關(guān)性,hVISA感染的患者住院時(shí)間延長,對hVISA臨床意義的研究可能需要進(jìn)行大樣本的前瞻性隊(duì)列研究。agr轉(zhuǎn)錄水平的下調(diào)與萬古霉素的敏感性下降相關(guān),但是關(guān)于hVISA具體的耐藥機(jī)制還需要更進(jìn)一步深入的研究。
[Abstract]:Objective to study the basic law of MRSA evolution, A general picture of the evolution of MRSA was outlined. The clinical information of hVISA infection in China was obtained by case-control study and the correlation between risk factors and mortality was analyzed. The genes related to the mechanism of hVISA drug resistance were preliminarily studied. Methods from 1994 to 2008, 466 strains of non-repetitive Staphylococcus aureus (including 302 strains of MRSA and 164 strains of MSSA) were collected for SCCmecspax, pulsed field gel electrophoresis (PFGE) and multilocus sequence analysis (MLST) typing. BHIT5 (including teicoplanin 5 渭 g / ml) was used to classify the brain and heart. BHIV6 (brain heart extract containing vancomycin 6 渭 g / ml) and MET method were used to screen hVISA in MRSA and to confirm it by modified PAP-AUC method. HVISA group and control group were collected in the form of case questionnaire. Clinical information, Student t test, Mann-Whitney test, 蠂 2 test and fisher accurate test were used to analyze the case data retrospectively. Real-time fluorescence quantitative PCR was used to study the transcription level of hVISA drug-resistance-related gene agr. Results A total of 12 spa types and 9 STs types were found in 302strains of MRSA. The most popular clone of ST239-MRSA- 鈪，

本文編號：1643753