p22phox在高糖所致的內(nèi)皮細(xì)胞凋亡中的作用及機(jī)制
發(fā)布時(shí)間:2018-03-20 07:23
本文選題:動(dòng)脈粥樣硬化 切入點(diǎn):人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 出處:《南華大學(xué)》2009年碩士論文 論文類(lèi)型:學(xué)位論文
【摘要】:目的探討p22phox基因沉默在高濃度葡萄糖誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞活性氧生成和細(xì)胞凋亡中的作用及其機(jī)理。 方法用Ⅱ型膠原酶消化分離培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs),在倒置顯微鏡下觀察其形態(tài)。免疫組化法檢測(cè)HUVECs內(nèi)第Ⅷ因子相關(guān)抗原的表達(dá)。將原代培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞分為對(duì)照組、高糖組、高糖+siRNA轉(zhuǎn)染組和siRNA轉(zhuǎn)染組。采用Western-blot檢測(cè)p22phox和caspase-3蛋白的表達(dá),流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)活性氧水平及細(xì)胞凋亡率,Hochest33342染色觀察細(xì)胞的胞核形態(tài),分光光度計(jì)檢測(cè)caspase-3酶活性。 結(jié)果分離得到的HUVECs均表達(dá)第Ⅷ因子相關(guān)抗原;siRNA能有效抑制p22phox表達(dá);高葡萄糖能誘導(dǎo)p22phox表達(dá);與對(duì)照組相比,高糖組細(xì)胞p22phox蛋白水平、活性氧水平、細(xì)胞凋亡率、caspase-3活性和蛋白水平均明顯增高(P 0.05);高糖+siRNA轉(zhuǎn)染組的細(xì)胞p22phox蛋白水平、活性氧水平、細(xì)胞凋亡率、caspase-3活性和蛋白水平均明顯低于高糖組(P 0.05)。 結(jié)論1.轉(zhuǎn)染siRNA-p22phox能抑制內(nèi)皮細(xì)胞p22phox表達(dá); 2.抑制p22phox表達(dá)能降低高糖所致的內(nèi)皮細(xì)胞活性氧生成和細(xì)胞凋亡。
[Abstract]:Objective to investigate the role and mechanism of p22phox gene silencing in the production of reactive oxygen species (Ros) and apoptosis in endothelial cells induced by high glucose concentration. Methods Human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) were isolated and cultured by type 鈪,
本文編號(hào):1638055
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