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骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞膜片層的體外構(gòu)建及成骨分化實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2018-03-17 07:28

  本文選題:絲素蛋白 切入點(diǎn):殼聚糖 出處:《遵義醫(yī)學(xué)院》2014年碩士論文 論文類(lèi)型:學(xué)位論文


【摘要】:目的:對(duì)用骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)細(xì)胞片層包裹成絲素蛋白(Silk fibroin,SF)/殼聚糖(chitosan,CS)/誘導(dǎo)后BMSCs的三維支架形成的復(fù)合體進(jìn)行觀察和檢測(cè),并討論該復(fù)合體的成骨效果。 方法:密度梯度離心法分離培養(yǎng)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,向成骨細(xì)胞方向誘導(dǎo)分化后,接種至溫度反應(yīng)性培養(yǎng)皿中,37℃、5%飽和濕度培養(yǎng),然后降溫至20℃制備細(xì)胞片層。將制備好的BMSCs細(xì)胞片層與SF-CS/誘導(dǎo)后BMSCs生物支架構(gòu)建成復(fù)合體。將實(shí)驗(yàn)分為A、B組,A組為BMSCs細(xì)胞片層/SF-CS/誘導(dǎo)后BMSCs生物支架構(gòu)建成的復(fù)合體,B組為SF-CS/誘導(dǎo)后BMSCs生物支架,將2組放置于培養(yǎng)皿中,于37℃、5%飽和濕度體外培養(yǎng),于3、8、14天取材,進(jìn)行堿性磷酸酶活性定量、掃描電鏡等檢測(cè)。 結(jié)果:成功構(gòu)建了BMSCs細(xì)胞片層,BMSCs細(xì)胞片層/SF-CS/誘導(dǎo)后BMSCs生物支架復(fù)合體。堿性磷酸酶定量A組高于B組,ELLSA測(cè)定骨鈣素A組高于B組,,兩組有顯著差異性(P㩳0.05),掃描電鏡檢查見(jiàn)基質(zhì)中礦化結(jié)節(jié)A組多于B組。 結(jié)論:BMSCs細(xì)胞片層與SF-CS/誘導(dǎo)后BMSCs生物支架的復(fù)合體成骨效果優(yōu)于SF-CS/誘導(dǎo)后BMSCs生物支架,此類(lèi)復(fù)合體有望成為更好的組織工程骨。
[Abstract]:Aim: to observe and detect the three dimensional scaffold formation of silk fibroin fibroin (SFN) / chitosanum (BMSCs) induced by bone marrow mesenchymal stem cell (BMSCs) cells, and to discuss the osteogenic effect of the complex. Methods: rabbit bone marrow mesenchymal stem cells were isolated and cultured by density gradient centrifugation. After differentiation into osteoblasts, the mesenchymal stem cells were cultured at 37 鈩

本文編號(hào):1623763

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