本文選題：仙臺病毒Tianjin株　切入點(diǎn)：缺損干擾顆粒　出處：《天津醫(yī)科大學(xué)》2009年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的：鑒于仙臺病毒Tianjin株對成年人的低致病性,以及先前的實(shí)驗(yàn)表明仙臺病毒其它基因型對腫瘤有抑制作用。本課題擬通過仙臺病毒Tianjin株缺損干擾顆粒對腫瘤細(xì)胞的生物學(xué)影響,探索不必外源基因的表達(dá)載體和不必具有直接溶瘤能力的病毒,利用仙臺病毒Tianjin株缺損干擾顆粒輔助治療腫瘤的方法。并且初步研究其治療腫瘤的機(jī)理,以期為腫瘤治療提供新的思路。 方法：1.敏感細(xì)胞的篩選：向所選定的癌細(xì)胞株:A549、MEL526、Libr、C6、 HT2、SW480、A498接種活仙臺病毒Tianjin株,通過細(xì)胞CPE、細(xì)胞成活率、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞培養(yǎng)液TCID50、PCR等形態(tài)學(xué)、生物學(xué)和分子生物學(xué)方法確定對該病毒敏感的細(xì)胞系。2.仙臺病毒Tianjin株缺損干擾顆粒的制備：仙臺病毒Tianjin株通過雞胚培養(yǎng)法擴(kuò)增,超速離心純化仙臺病毒Tianjin株活病毒,超速離心蔗糖密度梯度分離缺損干擾顆粒,提純出的缺損干擾顆粒使用雞胚培養(yǎng)法驗(yàn)證是否能夠繼續(xù)增殖,如果不能增殖則為仙臺病毒Tianjin株缺損干擾顆粒。3.使用仙臺病毒Tianjin株缺損干擾顆粒按不同濃度接種DC細(xì)胞,檢測DC細(xì)胞產(chǎn)生IL-6、TNF-α、IFN-α等有抗腫瘤作用的細(xì)胞因子的量,驗(yàn)證仙臺病毒Tianjin株缺損干擾顆粒刺激DC細(xì)胞抗腫瘤的能力。4.使用確定出的敏感細(xì)胞系接種適宜的動物,制作荷瘤動物模型。腫瘤內(nèi)接種仙臺病毒Tianjin株缺損干擾顆粒,通過直接測量腫瘤大小、細(xì)胞因子檢測、PCR、免疫組化等方法評估仙臺病毒Tianjin株缺損干擾顆粒治療腫瘤的可行性,并初步確定治療的機(jī)理。 結(jié)果：大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞C6株對仙臺病毒Tianjin株最具高度敏感性,病毒TCID50達(dá)到11.24+0.08.其它被測試細(xì)胞株均未達(dá)到此值,一般在0-3之間。由此確定實(shí)驗(yàn)動物為大鼠,品種為Wistar大鼠。在促進(jìn)DC細(xì)胞體外增值實(shí)驗(yàn)中,與對照組比較,仙臺病毒Tianjin株缺損干擾顆�？梢源碳C細(xì)胞產(chǎn)生抗癌作用的細(xì)胞因子,IL-6、TNF-α、IFN-α有明顯升高(均為P0.001)。在大鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中,與對照組比較,仙臺病毒Tianjin株缺損干擾顆粒可以刺激正常大鼠高表達(dá)有抗癌作用的細(xì)胞因子,IL-6、TNF-α、IFN-α有明顯升高(均為P0.001)。大鼠腦瘤模型造模失敗。 結(jié)論：大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞C6株對仙臺病毒Tianjin株高度敏感。仙臺病毒Tianjin株接種C6細(xì)胞后可引起細(xì)胞明顯病變,促進(jìn)凋亡,并且作用持續(xù)。仙臺病毒Tianjin株缺損干擾顆粒可以促進(jìn)樹突細(xì)胞成熟,高表達(dá)抗癌物質(zhì),有助于消除腫瘤。仙臺病毒Tianjin株缺損干擾顆粒可以刺激正常大鼠高表達(dá)有抗癌作用的細(xì)胞因子,對大鼠腦膠質(zhì)瘤應(yīng)該有潛在的治療作用。但是大鼠荷瘤失敗,對活體腫瘤的直接作用效果未得到論證,有待進(jìn)一步研究。
[Abstract]:Objective: in view of the low pathogenicity of Sendai virus Tianjin strain to adults, Other genotypes of Sendai virus (Sendai virus) have inhibitory effect on tumor. This study aims to study the biological effects of Sendai virus Tianjin strain defect interference granules on tumor cells. To explore the method of adjuvant therapy of Sendai virus Tianjin strain defect interference granules without the expression vector of exogenous gene and virus without direct tumor lysis ability, and to preliminarily study the mechanism of tumor treatment. In order to provide new ideas for tumor treatment. Methods: 1. Screening of sensitive cells: inoculation of Sendai virus Tianjin strain with selected cancer cell lines: cell line: A549MEL526LibrC6, HT2OSW480A498. Morphology of Sendai virus Tianjin strain was obtained by cell CPE, cell survival rate, cell apoptosis, TCID50 PCR, and so on. Biological and molecular biological methods to determine the sensitive cell line of Sendai virus. 2. Preparation of defective interfering particles of Sendai virus Tianjin strain: Sendai virus Tianjin strain was amplified by chicken embryo culture and purified by ultracentrifugation, and the live virus of Sendai virus Tianjin strain was purified by ultracentrifugation. The defect interference granules were separated by ultracentrifugation sucrose density gradient. The purified defective interference granules were tested by chicken embryo culture method to see if they could continue to proliferate. If Sendai virus Tianjin strain is not proliferative, it is the defect interfering particle of Sendai virus Tianjin strain. DC cells are inoculated with different concentration of Sendai virus Tianjin strain defect interference granules to detect the amount of cytokines produced by DC cells such as IL-6 TNF- 偽 IFN- 偽, and so on, which have anti-tumor effect, such as IL-6, TNF- 偽, IFN- 偽, and so on. To test the ability of Sendai virus Tianjin strain to stimulate DC cells to resist tumor. 4. To establish a tumor-bearing animal model by inoculating the identified sensitive cell lines with appropriate animal models. The tumor was inoculated with Sendai virus Tianjin strain defect interference particles. The feasibility of Sendai virus (Sendai virus) Tianjin strain defect interference granules in the treatment of tumor was evaluated by direct measurement of tumor size, detection of cytokines and immunohistochemical method, and the mechanism of treatment was preliminarily determined. Results: the C6 strain of glioma cells was most sensitive to Sendai virus Tianjin strain, the virus TCID50 reached 11.240.08.The other tested cell lines did not reach this value, generally in the range of 0-3. The experimental animals were identified as rats. Sendai virus Tianjin strain defect interference granule can stimulate DC cells to produce anticancer effect, the cytokine, IL-6, TNF- 偽 and IFN- 偽 (all are P0.001), are significantly increased in the experiment of promoting DC cell proliferation in vitro, compared with the control group, in vivo, Sendai virus strain Tianjin strain can stimulate DC cells to produce anti-cancer effect. Compared with the control group, the Sendai virus Tianjin strain defect interference granule could stimulate the high expression of IL-6 TNF- 偽 and IFN- 偽 in normal rats (all P0.001). The rat brain tumor model failed. Conclusion: C6 strain of rat brain glioma cells is highly sensitive to Sendai virus Tianjin strain. Sendai virus Tianjin strain inoculated with C6 cells can cause obvious cytopathic changes and promote apoptosis. Sendai virus Tianjin strain defect interference granule can promote dendritic cell maturation and high expression of anticancer substances. Sendai virus Tianjin strain can stimulate high expression of anti-cancer cytokines in normal rats, which should have potential therapeutic effect on glioma in rats. The direct effect on tumor in vivo has not been demonstrated and further research is needed.
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號】：R373;R739.41

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 前田敏宏 ,張新創(chuàng);在小鼠和大鼠仙臺病毒監(jiān)測中免疫熒光技術(shù)的應(yīng)用[J];微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展;1987年S1期

2 后藤仁 ,清水黽平次 ,崔萱林;母體抗體對小鼠接觸感染仙臺病毒的作用[J];微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展;1987年S1期

3 孫靖;雷文緒;王秀清;季淑榮;吳惠英;鐘品仁;;小鼠肺炎仙臺病毒80-2株的特性[J];實(shí)驗(yàn)動物與比較醫(yī)學(xué);1983年02期

4 姚智慧;蛋白酶激活的流行性仙臺病毒突變株MVCES1作為一種安全有效的活疫苗[J];國外醫(yī)學(xué).預(yù)防.診斷.治療用生物制品分冊;1995年03期

5 楊宇;任魯風(fēng);張輝;侯云德;吳小兵;;仙臺病毒BB1株基因組cDNA序列測定及比較分析[J];病毒學(xué)報;2006年02期

6 齋藤學(xué);朱梅芬;;仙臺病毒感染能增強(qiáng)豚鼠肺炎鏈球茵的增殖和傳播[J];實(shí)驗(yàn)動物與比較醫(yī)學(xué);1988年04期

7 王宗耀;謝建云;邵偉娟;王勝昌;胡建華;高誠;;仙臺病毒RT-PCR檢測方法的建立與應(yīng)用[J];中國比較醫(yī)學(xué)雜志;2008年01期

8 杜淑娟;程樹軍;袁美鳳;;副流感病毒小鼠動物模型的建立及病理學(xué)研究[J];中國比較醫(yī)學(xué)雜志;2006年07期

9 孫望楚;;五株仙臺病毒血凝性狀的差異[J];微生物學(xué)報;1964年01期

10 胡建紅,齊兵,中西真人,齊義鵬;仙臺病毒血凝素神經(jīng)氨酸酶在哺乳動物細(xì)胞中的轉(zhuǎn)錄和翻譯[J];生物化學(xué)與生物物理學(xué)報;2000年03期

相關(guān)會議論文 前10條

1 付志浩;饒春明;李永紅;高凱;王軍志;;仙臺病毒載體的研究與應(yīng)用進(jìn)展[A];2011年中國藥學(xué)大會暨第11屆中國藥師周論文集[C];2011年

2 劉鳳勇;金孟玨;石建黨;李曉眠;;仙臺病毒感染前后普通狨猴的免疫狀態(tài)和流行性預(yù)測的研究[A];中國實(shí)驗(yàn)動物學(xué)會第六屆學(xué)術(shù)年會論文集[C];2004年

3 劉鳳勇;金孟玨;石建黨;李曉眠;劉民;費(fèi)偉華;;用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)鑒定狨猴仙臺病毒感染[A];2002年靈長類實(shí)驗(yàn)動物學(xué)術(shù)交流會論文摘要集[C];2002年

4 石建黨;李曉眠;劉鳳勇;金孟玨;張國際;劉民;李梅;;一株引起普通棉耳狨猴死亡病毒的分離與鑒定[A];中國實(shí)驗(yàn)動物學(xué)會第六屆學(xué)術(shù)年會論文集[C];2004年

5 朱毅;金淑賢;蔣雄斌;殷凱生;;改變抗原接觸順序?qū)Ψ尾縏h1／Th2平衡的不同影響[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國呼吸病學(xué)術(shù)會議暨學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2006年

6 許大明;劉懷然;曲連東;劉家森;;仙臺病毒分子生物學(xué)研究進(jìn)展[A];中國實(shí)驗(yàn)動物學(xué)會第七屆學(xué)術(shù)年會論文集[C];2006年

7 趙鋼;江頭健輔;魏盟;;經(jīng)導(dǎo)管纖維細(xì)胞生長因子(FGF2)對慢性心肌缺血模型的新生血管療效[A];中華醫(yī)學(xué)會心血管病學(xué)分會第八次全國心血管病學(xué)術(shù)會議匯編[C];2006年

8 李杰;宋國維;趙時敏;黃偉雄;甘小莊;孫麗萍;馬廣松;;肺表面活性物質(zhì)治療病毒性肺炎的實(shí)驗(yàn)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會急診醫(yī)學(xué)學(xué)會第六次全國急診醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];1996年

9 杜淑娟;袁美鳳;程樹軍;;黃虎解熱袋泡劑對感染仙臺病毒小鼠的保護(hù)作用研究[A];首屆中國中醫(yī)藥實(shí)驗(yàn)動物科技交流會論文匯編[C];2002年

10 唐智琴;;雞紅細(xì)胞融合的定量電鏡研究[A];第五次全國電子顯微學(xué)會議論文摘要集[C];1988年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 湖南斯奇醫(yī)藥研究所所長 朱勇;免疫調(diào)節(jié)藥物的研究進(jìn)展[N];科技日報;2000年

2 ;關(guān)木通對大鼠致癌性的實(shí)驗(yàn)研究[N];中國醫(yī)藥報;2003年

3 劉霞;誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞讓小鼠長出大鼠胰腺[N];科技日報;2011年

4 ;新抗病毒抗生素17997在大鼠體內(nèi)藥代動力學(xué)和組織分布研究[N];中國醫(yī)藥報;2003年

5 鄭健剛；杜元灝；石學(xué)敏;針刺能增加腦缺血大鼠腦血流量[N];中國醫(yī)藥報;2005年

6 ;刺五加皂甙對大鼠血管性癡呆有防治作用[N];中國中醫(yī)藥報;2005年

7 ;丹參能加快放創(chuàng)復(fù)合傷大鼠創(chuàng)面愈合[N];中國中醫(yī)藥報;2005年

8 ;中藥復(fù)方能逆轉(zhuǎn)腹主動脈縮窄大鼠心肌肥大[N];中國中醫(yī)藥報;2005年

9 記者 唐毅;艾滋病基因治療疫苗或4年內(nèi)面市[N];南方日報;2007年

10 孫忻;人類首次獲得克隆大鼠[N];科技日報;2003年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 李強(qiáng);三種黑色素瘤疫苗給藥載體的研究[D];沈陽藥科大學(xué);2004年

2 朱毅;STAT1抑制策略探討[D];南京醫(yī)科大學(xué);2005年

3 石建黨;普通棉耳狨猴死亡病毒病因及與人群關(guān)系的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2002年

4 石立瑩;副粘病毒Tianjin株全基因組測序及生物信息學(xué)分析[D];天津醫(yī)科大學(xué);2007年

5 李霞;副粘病毒Tianjin株在嬰幼兒下呼吸道感染情況調(diào)查及噬菌體抗體文庫的構(gòu)建篩選[D];天津醫(yī)科大學(xué);2009年

6 張國際;副粘病毒Tianjin株HN和F基因真核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建及其對幼鼠免疫效果的評價[D];天津醫(yī)科大學(xué);2007年

7 謝輝;用于大鼠腦膠質(zhì)瘤磁共振成像的乳鐵蛋白偶聯(lián)的超順磁性氧化鐵納米粒的研究[D];華中科技大學(xué);2011年

8 楊建新;腹部術(shù)后疲勞綜合征模型及抗術(shù)后疲勞方作用的研究[D];湖北中醫(yī)學(xué)院;2004年

9 楊丹榕;大鼠IgEFcCH2-3受體阻斷與IgEFcCH2-3-FasL誘導(dǎo)肥大細(xì)胞凋亡的研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2004年

10 李玉茹;神經(jīng)營養(yǎng)素及其受體在老年性大鼠耳蝸及下丘中表達(dá)規(guī)律的研究[D];吉林大學(xué);2005年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 李晶哲;仙臺病毒缺損干擾顆�？勾笫竽X膠質(zhì)瘤初步研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2009年

2 元清華;板藍(lán)根醇提液體外抑制單純皰疹病毒-1和仙臺病毒的研究[D];延邊大學(xué);2003年

3 翟國勤;仙臺病毒囊膜抗小鼠黑色素瘤的研究[D];揚(yáng)州大學(xué);2011年

4 李昕;仙臺病毒HN基因核酸疫苗免疫幼鼠的效果評價[D];天津醫(yī)科大學(xué);2006年

5 王宗耀;仙臺病毒F基因的表達(dá)與間接ELISA檢測方法的建立和應(yīng)用[D];揚(yáng)州大學(xué);2007年

6 王卿;副粘病毒Tianjin株NP基因的表達(dá)及在兒童下呼吸道感染檢測中的應(yīng)用[D];天津醫(yī)科大學(xué);2008年

7 林健;9L/Fischer344大鼠腦膠質(zhì)瘤模型的建立及與C6/Wistar模型的比較研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2004年

8 邱曉劍;慢性前列腺炎在IgA腎病發(fā)生、發(fā)展中的作用[D];福建醫(yī)科大學(xué);2006年

9 侯麗波;SV，Reo-3，，MHV，MAd，RCV病毒免疫血清制備及ELISA等檢測方法的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2009年

10 向芳;圍產(chǎn)期大鼠血脂組成與乳腺炎癥相關(guān)基因的表達(dá)變化研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

本文編號：1598342