發(fā)布時間：2018-03-09 00:01

  本文選題：弓形蟲　切入點：SAG1　出處：《山東大學》2008年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】： 剛地弓形蟲(Toxoplasma gondii)是一種專性細胞內(nèi)寄生的原蟲,可感染人類及各種脊椎動物,引起人獸共患弓形蟲病。弓形蟲呈世界性分布,人群普遍易感,多呈隱性感染,但在免疫抑制或免疫缺陷患者中(如器官移植、惡性腫瘤、AIDS、長期使用免疫抑制劑等)可引起嚴重的器官損害(多見于腦和眼),作為一種機會性致病因子是導(dǎo)致患者死亡的病原之一。婦女孕期首次感染弓形蟲可引起流產(chǎn),死胎或畸型。此外,由弓形蟲引起的禽畜類疾病給畜牧業(yè)造成了嚴重的經(jīng)濟損失。迄今尚無治療弓形蟲病的特效藥物,因此研制安全有效的疫苗對人類健康及畜牧業(yè)發(fā)展意義重大。 對弓形蟲疫苗的研究經(jīng)歷了死疫苗、減毒活疫苗、基因工程疫苗以及DNA疫苗,DNA疫苗又包括單基因疫苗和復(fù)合基因疫苗。由于弓形蟲生活史較復(fù)雜,抗原成分多,每種抗原在體內(nèi)誘導(dǎo)的免疫效應(yīng)有所不同,動物和人體實驗均表明,單價亞單位疫苗的免疫效果不太理想。因此,發(fā)展多種抗原組合、針對不同生活史發(fā)育階段的復(fù)合多價疫苗是研究弓形蟲疫苗過程中的一個發(fā)展方向與共識,這有助于克服單一抗原成分作為候選疫苗的不足。 SAG1抗原作為弓形蟲速殖子表面的主要抗原之一,是迄今應(yīng)用最多的弓形蟲疫苗候選抗原。SAG1蛋白分布于弓形蟲速殖子表膜、速殖子內(nèi)以及納蟲泡的管狀結(jié)構(gòu)中,約占弓形蟲體總蛋白的3-5%,卻可抑制患者血清中抗體活性的50%,說明SAG1含量雖微,卻是速殖子的主要抗原成份,是誘導(dǎo)宿主免疫應(yīng)答的主要靶抗原。能夠誘導(dǎo)機體產(chǎn)生IgG,IgM,IgE,IgA及sIgA,抗SAG1抗體在體外有殺蟲,在體內(nèi)有保護作用,并可誘導(dǎo)產(chǎn)生一些細胞因子,如γ-干擾素和細胞毒性淋巴因子,其抗原特異性的CD8+T細胞能直接殺傷細胞外弓形蟲,對弓形蟲感染的腹腔巨噬細胞亦具有細胞毒性。 ROP2(rhoptry protein)存在于弓形蟲速殖子、緩殖子及包囊期,分子量為54kDa,是棒狀體分泌的一種蛋白,它可誘導(dǎo)機體產(chǎn)生以IgA,IgM,IgG為主的體液免疫。此外,ROP2可以被人特異性T細胞克隆識別而產(chǎn)生高水平的IFN-γ,后者在控制弓形蟲急性及慢性感染中可發(fā)揮重要作用。 GRA2是弓形蟲納蟲泡內(nèi)的致密顆粒細胞器分泌的一種致密顆粒蛋白(GRA),分子量為28.5kDa,在編碼區(qū)有一個內(nèi)含子,內(nèi)部存在螺旋結(jié)構(gòu),為兩個不同性質(zhì)的a-螺旋,GRA2的抗原性很強,用純化的GRA2免疫小鼠,抗攻擊感染的小鼠存活率為75%。目前研究表明GRA2在急慢性弓形蟲感染血清中普遍存在,至少存在3個B細胞表位和一個T細胞表位,可誘發(fā)機體產(chǎn)生IgG,IgM,IgA多種抗體,激活GRA2特異性的CD4+T細胞,誘導(dǎo)機體的保護性免疫。因此,GRA2作為弓形蟲病的診斷抗原及可能的疫苗成分頗具有研究價值。 IL-12可強烈刺激NK細胞和T細胞分泌IFN-γ,繼之激活巨噬細胞提高其殺傷弓形蟲活力,也能促進CD4+T細胞向Th1細胞分化,并增強NK細胞和CD8+T細胞殺傷功能。同時,IL-12對促進IFN-γ的持續(xù)產(chǎn)生也起到重要作用。在弓形蟲感染的急慢性其均起到重要作用。弓形蟲蟲株不同其毒力也不同,感染弱毒株(typeⅡ)可刺激DC、中性粒細胞、巨噬細胞產(chǎn)生高水平的IL-12,能早期誘導(dǎo)IL-12的高表達對控制弓形蟲感染起到重要作用。相比之下感染強毒株(typrⅠ)所產(chǎn)生的IL-12的水平非常低。 該研究成功地把SAG1、ROP2、GRA2三個基因構(gòu)建在同一個表達載體pcDNA3.1上,以mIL-12作為基因佐劑,通過肌肉注射的方式免疫小鼠,觀察其免疫效果及佐劑增強作用。結(jié)果表明該復(fù)合基因疫苗的免疫效果明顯優(yōu)于其對照組的免疫效果,且IL-12對該復(fù)合基因疫苗起到很好的免疫增強作用。在弓形蟲研究領(lǐng)域,國內(nèi)外尚無此項研究報道。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：山東大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2008
【分類號】：R392

【引證文獻】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 劉秀華;李英豪;苑文英;藏愛民;田因詩;余瑞欣;周雅靜;;弓形蟲單基因和復(fù)合基因疫苗的研究進展[J];中國人獸共患病學報;2011年11期

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本文編號：1586097