本文關鍵詞： 角膜內皮細胞 MSCs 增生 細胞周期 P21 PCNA RT-PCR　出處：《暨南大學》2010年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】： 目的：觀察兔角膜內皮細胞(CECs)與骨髓間充質干細胞(BMSCs)共培養(yǎng)后角膜內皮細胞增殖力及細胞周期的變化,采用實時熒光定量PCR對共培養(yǎng)后的角膜內皮細胞的p21基因和PCNA基因表達進行檢測,探討其影響機制。 方法：體外培養(yǎng)的兔角膜內皮細胞與骨髓間充質干細胞在Transwell體系共培養(yǎng)后,倒置相差顯微鏡,HE染色觀察內皮細胞生長及形態(tài)變化；通過流式細胞術檢測角膜內皮細胞細胞周期的變化；通過熒光定量PCR檢測共培養(yǎng)后角膜內皮細胞p21和PCNA基因表達情況,與對照組比較,統(tǒng)計學分析后探討其增殖機制。 結果：實驗組(CECs與BMSCs共培養(yǎng))較對照組(CECs獨立培養(yǎng))兔角膜內皮細胞G1期細胞較對照組比例下降、S期細胞比例增加,平均增加5%,增殖力顯著提高。各組共培養(yǎng)后的角膜內皮細胞HE染色觀察見實驗組細胞數(shù)目較對照組明顯增多,細胞密度增高,細胞形態(tài)規(guī)則,核仁及染色質豐富,核漿比例正常。實驗組角膜內皮細胞形態(tài)基本規(guī)則,實時熒光定量PCR檢測顯示：實驗組與對照組的經(jīng)實時熒光定量PCR檢測角膜內皮細胞p21基因和PCNA基因表達存在組間差別,經(jīng)獨立樣本分析兩樣本均數(shù)的比較有統(tǒng)計學意義。 結論：(1)體外共培養(yǎng)兔骨髓間充質干細胞與角膜內皮細胞能在一定程度上促進兔角膜內皮細胞的增生,細胞形態(tài)、生物學行為無明顯異常改變。(2)共培養(yǎng)后對增殖影響的可能機制與p21基因的表達下調和PCNA基因的表達上調有關。
[Abstract]:Aim: to observe the changes of corneal endothelial cell proliferation and cell cycle after co-culture of rabbit corneal endothelial cells (CECs) and bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs). The expression of p21 gene and PCNA gene in co-cultured corneal endothelial cells was detected by real-time fluorescence quantitative PCR. Methods: cultured rabbit corneal endothelial cells and bone marrow mesenchymal stem cells were co-cultured in Transwell system. Flow cytometry was used to detect the changes of corneal endothelial cell cycle, and the expression of p21 and PCNA genes in co-cultured corneal endothelial cells was detected by fluorescence quantitative PCR. Compared with the control group, the proliferative mechanism of p21 and PCNA was studied statistically. Results: compared with the control group, the ratio of G _ 1 phase cells of rabbit corneal endothelial cells in G _ 1 phase was significantly lower than that of control group. The number of corneal endothelial cells in the experimental group was significantly higher than that in the control group, cell density was increased, cell morphology was regular, nucleolus and chromatin were abundant, and the number of cells in the experimental group was higher than that in the control group. The morphology of corneal endothelial cells in the experimental group was normal and the expression of p21 gene and PCNA gene in the corneal endothelial cells were detected by real-time fluorescence quantitative PCR. The comparison of the mean number of two samples by independent sample analysis has statistical significance. Conclusion in vitro co-culture of rabbit bone marrow mesenchymal stem cells and corneal endothelial cells can promote the proliferation and morphology of rabbit corneal endothelial cells. The possible mechanism of the effect of co-culture on proliferation was related to the down-regulation of p21 gene expression and the up-regulation of PCNA gene expression.
【學位授予單位】：暨南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2010
【分類號】：R329

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 田蕾;孫洞簫;;p21和PCNA在大鼠腎缺血再灌注損傷中的表達及氟伐他汀對其表達的調節(jié)[J];中國老年學雜志;2011年13期

2 戴嵩,黃維國,甘曉凡,孫風和,王奇;p21和PCNA在喉原發(fā)性鱗癌中的表達[J];實用癌癥雜志;1998年02期

3 何杰,汪萬英,姚敏;肺癌C-erbB-2、p21和PCNA的表達及意義[J];浙江腫瘤;1998年01期

4 李道芬,許樺林,王一鳴,柯昌庶,王偉,李德忠,肖同浩,武曉華;胃粘膜隆起性糜爛的臨床病理學及其病因學的研究[J];中國內鏡雜志;1997年01期

5 梁青春,許淑媛,周金平,張利群;乳腺癌ER、c-erbB2、p21、PCNA表達及其意義[J];腫瘤學雜志;2004年03期

6 于東紅,王萍,姚敏;鼻咽癌細菌L型感染與PCNA、p21、p53表達的關系[J];腫瘤學雜志;1997年03期

7 張嵐,張國俊,高冬玲,張云漢,張蕾,陳奎生;肺鱗癌組織中hMLH1、PCNA、P53及P21的表達及其與微衛(wèi)星不穩(wěn)定性的相關性[J];鄭州大學學報(醫(yī)學版);2004年02期

8 楊海鷹!570311�？�,王巖!570311海口,董玉英!570311�？�,符慶萱!570311海口;胃粘膜結腸型化生和小腸型化生對p21、p53、EGFR、PCNA及CEA的聯(lián)合表達[J];腫瘤防治研究;2000年01期

9 張紅旭,張明昌;細胞周期依賴性激酶抑制劑P27、P21在人角膜上皮的表達研究[J];臨床眼科雜志;2004年03期

10 向明亮,吳韻芳,王紓宜;喉非典型增生和鱗癌的PCNA、p21表達及其意義[J];中國耳鼻咽喉顱底外科雜志;1998年03期

相關會議論文 前10條

1 張大鵬;崔志剛;孔棣;;PCNA與大腸癌的相關性研究[A];第七屆全國中西醫(yī)結合普通外科臨床及基礎研究學術會議論文匯編[C];2001年

2 晏子友;王瓊;皮持衡;;腎衰瀉濁湯對腺嘌呤大鼠α_1—MG及PCNA的作用[A];第四次全國中西醫(yī)結合中青年學術研討會論文集[C];2002年

3 劉劍侖;葛蓮英;張貴年;;大腸癌端粒酶催化亞基(hTERT)與PCNA的相關性[A];第七屆廣西腫瘤學術年會論文匯編[C];2003年

4 葉超平;黃種心;吳瑞蘭;鄭興中;;胃癌c-erbB-2癌基因與PCNA CEA的相關表達及意義[A];西部大開發(fā) 科教先行與可持續(xù)發(fā)展——中國科協(xié)2000年學術年會文集[C];2000年

5 王軼慧;王貴玉;王錫山;;直腸癌組織中TIDC、PCNA及細胞凋亡表達的臨床意義[A];第九屆全國腫瘤轉移學術大會暨2011年黑龍江省醫(yī)學會腫瘤學年會摘要集[C];2011年

6 譚燕泉;張振國;江浩;秦成坤;;C-erbB-2、PCNA在結腸良惡性病變中的表達及生物學行為研究[A];中國病理生理學會中專教育委員會第七次學術交流會論文匯編[C];1999年

7 潘林潔;高福祿;王春艷;龐曉靜;;PCNA在高血壓大鼠腎上腺的表達[A];解剖學雜志——中國解剖學會2002年年會文摘匯編[C];2002年

8 張建軍;戴丹;;抗肝衰復方對急性肝衰竭大鼠HMGB1和PCNA表達的影響[A];全國第3屆中西醫(yī)結合傳染病學術會議暨中國中西醫(yī)結合學會傳染病專業(yè)委員會第2屆委員會議論文匯編[C];2010年

9 王豐;李曉陵;溫穎;姚家琪;曹丹娜;曲冰;;胸腺瘤多層螺旋CT征象與PCNA、MMP-2表達的相關性[A];中華醫(yī)學會第十八次全國放射學學術會議論文匯編[C];2011年

10 劉文麗;周炳榮;駱丹;;外用黃芩苷對反復UVB輻射后小鼠表皮細胞Ki-67及PCNA表達的影響[A];2011全國中西醫(yī)結合皮膚性病學術會議論文匯編[C];2011年

相關重要報紙文章 前10條

1 張晨；凌昌全；李柏;蜂毒素可抑制肝癌細胞增殖[N];中國醫(yī)藥報;2005年

2 蘇曼;磷鐵價格開始反彈[N];中國礦業(yè)報;2002年

3 趙琰；李宇航；王慶國;半夏瀉心湯配伍實驗 證實中藥作用原理[N];中國醫(yī)藥報;2004年

4 時仲省 郭凱民 劉春陽;河南卵巢腫瘤癌變相關研究獲進展[N];中國醫(yī)藥報;2001年

5 種道溪;磷鐵價格反彈 釩鐵價格堅挺[N];世界金屬導報;2002年

6 陳漢橋;全方位“圍剿”膀胱癌[N];中國醫(yī)藥報;2003年

7 時仲省;高思敏;溫廷勇;預測口腔粘膜白斑癌變有新依據(jù)[N];中國醫(yī)藥報;2002年

8 趙強；楊聲瑞;抑癌基因P73可能是致癌基因[N];中國醫(yī)藥報;2004年

9 蔡宇;益氣解毒方藥具有抗癌作用[N];中國醫(yī)藥報;2005年

10 ;苦參堿可誘發(fā)瘢痕疙瘩成纖維細胞凋亡[N];中國中醫(yī)藥報;2005年

相關博士學位論文 前10條

1 趙云峰;四唑紫羅蘭對大鼠膠質瘤C6細胞和小鼠乳腺癌C127細胞的細胞周期停滯和凋亡誘導的研究[D];山東大學;2005年

2 張昌毅;冰島硫化葉菌中一種新的基因敲除體系的建立及pcna基因的遺傳學分析[D];華中農業(yè)大學;2010年

3 韓金棟;腺病毒介導p21抑制視網(wǎng)膜新生血管生成的實驗研究[D];天津醫(yī)科大學;2012年

4 徐維果;化療藥物在p53缺陷型腫瘤細胞中對p21啟動子激活機制的研究[D];上海交通大學;2013年

5 陸儉;Th17、CD40、PCNA在骶骨脊索瘤中作用和意義的臨床及實驗研究[D];蘇州大學;2011年

6 邱榮元;P21亞細胞定位改變對HepG2細胞增殖和凋亡的影響[D];華中科技大學;2010年

7 游江;金雀異黃素抑制增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變的研究[D];中南大學;2006年

8 陳狀;顱咽管瘤p21、hnRNP A2/B1表達及β-連接素基因突變的研究[D];第一軍醫(yī)大學;2007年

9 何閃英;中肋骨條藻增殖細胞核抗原基因表達量與生長關系的研究[D];中國海洋大學;2007年

10 譚曉虹;P21~（WAF1/CIP1）對肝癌細胞SMMC-7721生物學行為的影響及其與POLD1基因關系初探[D];廣西醫(yī)科大學;2010年

相關碩士學位論文 前10條

1 王琦;p21、cyclinD1與PCNA在膽管癌中的表達與意義[D];中南大學;2007年

2 王新法;兔骨髓間充質干細胞對角膜內皮細胞增殖及p21和PCNA表達的影響[D];暨南大學;2010年

3 趙t，

本文編號：1522370