本文關(guān)鍵詞： 去甲腎上腺素 NK92-MI 遷移 CCR5 CX3CR1　出處：《中國(guó)醫(yī)科大學(xué)》2010年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】： 前言 應(yīng)激這一概念最初由內(nèi)分泌學(xué)家H. Selye在20世紀(jì)30年代提出,是指機(jī)體在受到各種內(nèi)外環(huán)境因素刺激時(shí)所出現(xiàn)的非特異性全身反應(yīng),可以由不同的生理、心理及綜合因素引起。應(yīng)激可誘導(dǎo)機(jī)體心血管系統(tǒng)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)等的變化,嚴(yán)重時(shí)可發(fā)生疾病甚至引起死亡。近年來(lái),隨著社會(huì)發(fā)展、環(huán)境變化、生活節(jié)奏加快,應(yīng)激已成為威脅人類健康的不可忽視的因素。 以往一直認(rèn)為,應(yīng)激損害機(jī)體的免疫功能,但現(xiàn)有研究表明,慢性應(yīng)激具有免疫抑制作用,而短期急性應(yīng)激可以促進(jìn)免疫功能和健康,并且這種保護(hù)作用部分歸因于應(yīng)激激素對(duì)免疫細(xì)胞遷移的影響。急性應(yīng)激時(shí)人外周血中NK細(xì)胞的數(shù)量迅速增加,源自于機(jī)體各種NK細(xì)胞池中NK細(xì)胞的釋放,但有關(guān)應(yīng)激是通過(guò)何種途徑影響NK細(xì)胞此種再分布的報(bào)道較少。為此,我們檢測(cè)了去甲腎上腺素(norepinephrine,NE)對(duì)NK92-MI細(xì)胞遷移及趨化因子受體表達(dá)的影響,以研究應(yīng)激引起NK細(xì)胞再分布的可能機(jī)制。 材料和方法 1、Transwell法檢測(cè)不同濃度NE (5×10-12M、5×10-10M、5×10-9M、5×10-8M、5×10-6M)對(duì)NK92-MI細(xì)胞遷移的影響。 2、不同濃度NE (5×10-12M、5×10-10M、5×10-9M、5×10-8M)處理NK92-MI細(xì)胞20分鐘、40分鐘、1小時(shí)、2小時(shí)、4小時(shí)。Real-Time PCR檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組趨化因子受體CCR5、CCR7、CXCR3、CXCR4、CX3CR1 mRNA的表達(dá)水平,并檢測(cè)加入β-腎上腺素能受體阻滯劑普萘洛爾后趨化因子受體mRNA的表達(dá)水平。 3、不同濃度NE (5×10-10M、5×10-9M、5×10-8M、)處理NK92-MI細(xì)胞1小時(shí)。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組NK92-MI細(xì)胞表面趨化因子受體CCR5的表達(dá)情況。 4、MTT法測(cè)定不同濃度NE處理1小時(shí)對(duì)NK92-MI細(xì)胞殺傷活性的影響。 結(jié)果 1、高濃度的NE (5×10-6M、5×10-8M、5×10-9M)對(duì)NK92-MI細(xì)胞的遷移有明顯的促進(jìn)作用(P0.05),隨著NE濃度的降低,這種促進(jìn)作用逐漸減弱甚至消失。 2、Real-Time PCR法檢測(cè)到五種趨化因子受體中CCR5和CX3CR1 mRNA的變化明顯且變化趨勢(shì)較一致。各處理組中以5×10-9M濃度作用最為明顯,當(dāng)該濃度NE處理NK92-MI細(xì)胞1小時(shí)后,CCR5和CX3CR1 mRNA表達(dá)最高。5×10-7M普萘洛爾能阻斷5×10-9M NE的促表達(dá)作用。 3、流式檢測(cè)結(jié)果表明,NK92-MI細(xì)胞表面無(wú)CCR5的表達(dá)。 4、效靶比為4：1時(shí),高濃度的NE (5×10-5M、5×10-6M)對(duì)NK92-MI細(xì)胞的殺傷活性具有明顯的抑制作用(P0.05),其余濃度的NE (5×10-7M、5×10-8M、5×10-9M、5×10-10M、5×10-11M、5×10-12M)雖然能降低NK92-MI細(xì)胞的殺傷活性,但與對(duì)照組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論 應(yīng)激濃度的NE可以直接促進(jìn)NK92-MI細(xì)胞遷移,并且對(duì)其殺傷活性無(wú)明顯的抑制作用。應(yīng)激濃度的NE作用1小時(shí)可以顯著增加趨化因子受體CCR5和CX3CR1 mRNA表達(dá),而這種促表達(dá)作用可被非選擇性β-腎上腺素能受體阻滯劑普萘洛爾阻斷。在NK92-MI細(xì)胞表面沒(méi)有檢測(cè)到趨化因子受體CCR5的表達(dá)。
[Abstract]:Foreword The concept of stress, originally proposed by endocrinologist H. Selye in 1930s, refers to the nonspecific systemic response of the body when stimulated by various internal and external environmental factors. Stress can induce changes in the cardiovascular system, central nervous system, immune system, etc. In recent years, severe diseases and even death may occur. With the development of society, the change of environment and the quickening of life rhythm, stress has become a factor that can not be ignored as a threat to human health. It has always been thought that stress impairs the immune function of the body, but the existing research shows that chronic stress has immunosuppressive effect, while short-term acute stress can promote immune function and health. This protective effect is partly due to the effect of stress hormones on the migration of immune cells. The number of NK cells in peripheral blood increases rapidly during acute stress. Although NK cells are released from various NK cell pools, there are few reports about how stress affects the redistribution of NK cells. We examined the effects of norepinephrineine (NE) on migration and chemokine receptor expression in NK92-MI cells. To study the possible mechanism of NK cell redistribution induced by stress. Materials and methods 1Transwell method was used to detect 5 脳 10 ~ (-12) M ~ (5 脳 10 ~ (-10)) M ~ (-1) and 5 脳 10 ~ (-9) M ~ (5 脳 10 ~ (-9)) M ~ (-1). The effect of 5 脳 10 ~ (-6) M) on the migration of NK92-MI cells. (2) NK92-MI cells were treated with 5 脳 10 -12M (5 脳 10 -10M) and 5 脳 10 -9M (5 脳 10 -8M) for 20 minutes, 40 minutes and 1 hour. The chemokine receptor CCR5, CCR7, CXCR3 and CXCR4 were detected by Real-Time PCR. The expression level of CX3CR1 mRNA and the expression of chemokine receptor mRNA were detected after 尾 -adrenoceptor blocker was added to propranolol. 3, 5 脳 10 ~ (-10) M ~ (5 脳 10 ~ (-9)) M ~ (5 脳 10 ~ (-9) M) ~ 5 脳 10 ~ (-8) M. NK92-MI cells were treated for 1 hour. The expression of chemokine receptor (CCR5) on the surface of NK92-MI cells was detected by flow cytometry. 4 MTT assay was used to determine the effect of different concentrations of NE on the cytotoxicity of NK92-MI cells for 1 hour. Results 1. The high concentration of NE 5 脳 10 -6 M (5 脳 10 -8 MN 5 脳 10 -9 M) significantly promoted the migration of NK92-MI cells (P 0.05). With the decrease of NE concentration, the promoting effect gradually weakened or even disappeared. 2. Detection of CCR5 and CX3CR1 in five chemokine receptors by Real-Time PCR. The change of mRNA was obvious and the change trend was the same. The effect of 5 脳 10 ~ (-9) M concentration was the most obvious in each treatment group. NK92-MI cells were treated with NE for 1 hour. The expression of CCR5 and CX3CR1 mRNA was up to 5 脳 10 ~ (-7) M propranolol which blocked the expression of 5 脳 10 ~ (-9) M NE. 3. Flow cytometry showed that there was no expression of CCR5 on the surface of NK92-MI cells. (4) when the effective / target ratio was 4: 1, the high concentration of NE 5 脳 10 -5 M (5 脳 10 -6 M) inhibited the cytotoxicity of NK92-MI cells significantly (P 0.05). Other concentrations of NE 5 脳 10 -7 M ~ (5 脳 10 ~ (-8)) M ~ (5 脳 10 ~ (-9)) M ~ (5) 脳 10 ~ (-9) MN ~ (5) 脳 10 ~ (-10) M ~ (-1). Although 5 脳 10 ~ (-12) M) could reduce the killing activity of NK92-MI cells, there was no significant difference between the control group and the control group (P 0.05). Conclusion The stress concentration of NE can directly promote the migration of NK92-MI cells. No significant inhibitory effect was found on the cytotoxic activity. The expression of chemokine receptor CCR5 and CX3CR1 mRNA was significantly increased by the stress concentration of NE for 1 hour. The expression was blocked by propranolol, a non-selective 尾 -adrenergic receptor blocker. No chemokine receptor CCR5 expression was detected on the surface of NK92-MI cells.
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號(hào)】：R392.6

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 雷著斌,荊清;趨化因子及其受體與動(dòng)脈粥樣硬化[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).心血管疾病分冊(cè);2000年04期

2 徐岷,周國(guó)雄;趨化因子與胰腺炎關(guān)系的研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).消化系疾病分冊(cè);2005年04期

3 程鐵偉;歐周羅;邵志敏;;趨化因子的性激素調(diào)節(jié)及其臨床意義[J];國(guó)際病理科學(xué)與臨床雜志;2006年05期

4 楊勇;劉佩芝;;趨化因子CXCL16及其受體CXCR6在肝臟疾病中的研究進(jìn)展[J];臨床肝膽病雜志;2007年06期

5 張新海;趨化因子研究進(jìn)展──趨化因子受體及其與疾病的關(guān)系（二）[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).免疫學(xué)分冊(cè);1995年04期

6 馬新鋒,張先恩,胡勤學(xué);以CCR5為作用靶點(diǎn)的抗艾滋病藥物的研究進(jìn)展[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2002年06期

7 李亞;張莉;;變色曲霉素和變色曲霉醇對(duì)人趨化因子受體CCR5的抑制作用以及從曲霉科真菌中分離的4個(gè)新的變色曲霉素類似物[J];國(guó)外醫(yī)藥.植物藥分冊(cè);2005年06期

8 熊亞星;楊忠霞;鄧永東;陳紅;;CXCL16與肝臟疾病的研究進(jìn)展[J];臨床肝膽病雜志;2007年02期

9 王峰;孫晗笑;;趨化因子及其受體與艾滋病的研究進(jìn)展[J];中國(guó)新藥雜志;2007年16期

10 馮蘭云;歐周羅;邵志敏;;一種新的趨化因子誘餌受體CCX-CKR[J];生命的化學(xué);2008年03期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 歐周羅;;趨化因子、趨化因子受體與腎炎[A];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)第八屆會(huì)員代表大會(huì)暨全國(guó)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要集[C];2001年

2 樊華萍;;天花粉蛋白及其肽段與趨化因子受體相互作用的分子機(jī)制[A];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)第八屆會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要集[C];2003年

3 蔡劍;;趨化因子受體CXCR4在膀胱移行細(xì)胞癌中的表達(dá)及其臨床意義[A];第十五屆全國(guó)泌尿外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2008年

4 郭滿盈;陳揚(yáng);王棟;羅媛燁;;乳腺癌患者外周血中趨化因子及其受體的研究[A];全國(guó)臨床免疫檢驗(yàn)研討會(huì)暨第六屆全國(guó)臨床免疫學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

5 譚錦泉;;趨化因子受體與皮膚病免疫及其他[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二次全國(guó)皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2006年

6 胡衛(wèi)東;周雯慧;徐聞博;;趨化因子受體CXCR4在人前列腺癌轉(zhuǎn)移中的作用[A];湖北省抗癌協(xié)會(huì)青年委員會(huì)成立大會(huì)暨第一屆青年學(xué)術(shù)論壇資料匯編[C];2009年

7 張超;唐慧;李琳;嚴(yán)新民;郭強(qiáng);;趨化因子受體CXCR4在Barrett's食管、食管腺癌和食管鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及其臨床意義[A];第十屆國(guó)際治療內(nèi)鏡及消化病學(xué)術(shù)會(huì)議專題報(bào)告及論文匯編[C];2010年

8 陳萍;;急性病毒性心肌炎中樹(shù)突狀細(xì)胞的體內(nèi)遷移過(guò)程及其機(jī)制[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)心血管病學(xué)分會(huì)第十次全國(guó)心血管病學(xué)術(shù)會(huì)議匯編[C];2008年

9 古潔若;黃烽;Jatinderpal Kalsi;余得恩;;趨化因子受體CXCR4及其配體SDF-1與強(qiáng)直性脊柱炎發(fā)病的相關(guān)性研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)全國(guó)風(fēng)濕病學(xué)年會(huì)論文匯編[C];2003年

10 張欣;郭澍;金石峰;王晨超;;Th 1型趨化因子受體3(CXCR-3)在病理性瘢痕中的表達(dá)[A];美麗人生 和諧世界——中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)醫(yī)學(xué)美學(xué)與美容學(xué)術(shù)年會(huì)、中華醫(yī)學(xué)會(huì)醫(yī)學(xué)美學(xué)與美容學(xué)分會(huì)20周年慶典暨第三屆兩岸四地美容醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)論壇論文匯編[C];2010年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 胡德榮;DARC對(duì)乳腺癌具有負(fù)性調(diào)控作用[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2006年

2 胡德榮;抑制乳腺癌生長(zhǎng)轉(zhuǎn)移受體被發(fā)現(xiàn)[N];健康報(bào);2006年

3 馮麗玲；曾慶平;科學(xué)家獲得轉(zhuǎn)基因青蒿植株[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2005年

4 天津市腫瘤醫(yī)院病理學(xué)教授 孫保存邋李運(yùn)紅 趙迎 整理;找出大腸癌肝轉(zhuǎn)移的幫兇[N];健康報(bào);2007年

5 記者　夏靜、通訊員　蔣明;武大醫(yī)學(xué)院發(fā)現(xiàn)白血病的一個(gè)重要致病因素[N];光明日?qǐng)?bào);2003年

6 通訊員 蔣明;白血病重要致病因素被發(fā)現(xiàn) 新治療方法高效無(wú)毒[N];科技日?qǐng)?bào);2003年

7 王文;我國(guó)揭示環(huán)孢菌素A藥理作用新機(jī)制[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2006年

8 張建新邋薛飛;天津病理學(xué)家揭開(kāi)大腸癌的發(fā)生及轉(zhuǎn)移之謎[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2007年

9 張建松;中科院提出艾滋病治療新思路[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2000年

10 記者 時(shí)駿;中醫(yī)博士在美國(guó)出了成果[N];健康報(bào);2001年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 張小俊;Fractalkine/CX3CR1在腫瘤細(xì)胞的表達(dá)及其在NK細(xì)胞依賴的免疫監(jiān)視機(jī)制中的重要作用[D];中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué);2007年

2 嚴(yán)小楓;念珠菌病細(xì)胞免疫機(jī)制的研究[D];華中科技大學(xué);2007年

3 賀銀燕;早孕期人蛻膜基質(zhì)細(xì)胞趨化因子CCL2表達(dá)調(diào)控及其在母—胎界面Th2型偏移中的調(diào)節(jié)作用[D];復(fù)旦大學(xué);2007年

4 余克強(qiáng);青藤堿對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎樹(shù)突狀細(xì)胞趨化因子及受體的影響和機(jī)制[D];南方醫(yī)科大學(xué);2009年

5 汪云;異位灶趨化因子TECK與其受體CCR9異常調(diào)控導(dǎo)致子宮內(nèi)膜異位癥的分子機(jī)制[D];復(fù)旦大學(xué);2009年

6 蘇麗萍;CXCR4在肺癌侵襲轉(zhuǎn)移中的作用及其機(jī)制[D];復(fù)旦大學(xué);2005年

7 邱磊;超氧化物歧化酶介導(dǎo)趨化因子受體5的功能[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2007年

8 王海梁;趨化因子CXC亞族及其受體CXCR3在肝移植急性排斥反應(yīng)中的作用[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2008年

9 謝競(jìng);趨化因子受體CCR7在乳腺癌淋巴管浸潤(rùn)中的作用及相關(guān)機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2008年

10 邢志軍;Cofilin在人成骨肉瘤細(xì)胞遷移中的作用研究[D];吉林大學(xué);2009年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 于清揚(yáng);去甲腎上腺素對(duì)NK92-MI細(xì)胞遷移及趨化因子受體表達(dá)的影響[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2010年

2 李興澤;骨髓基質(zhì)細(xì)胞遷移機(jī)制的體外實(shí)驗(yàn)研究[D];青島大學(xué);2009年

3 龍潤(rùn);急性胰腺炎患者血清單核細(xì)胞趨化蛋白-1測(cè)定及其意義[D];河北醫(yī)科大學(xué);2009年

4 甘樹(shù)杰;趨化因子Mig、IP10、I-TAC及受體CXCR3在肝移植后急性排斥反應(yīng)中的表達(dá)及意義[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2006年

5 柏保利;PBC患者肝內(nèi)和外周血淋巴細(xì)胞CCR5、CXCR3、CXCR6和CXCR7的表達(dá)及意義[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2009年

6 楊敏慧;CCR2b基因190G/A多態(tài)性與腦出血的相關(guān)性研究[D];中南大學(xué);2010年

7 李明;CCR3和CXCR4在變應(yīng)性鼻炎患者鼻粘膜中表達(dá)的研究[D];華中科技大學(xué);2006年

8 蔣作yN;肝癌候選標(biāo)志物NAP-2（73）在肝癌細(xì)胞和組織中的驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2009年

9 王志華;CXCL11/I-TAC及其受體CXCR3在扁平苔蘚皮損中的表達(dá)[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2009年

10 李偉;CXCR1/CXCR2受體拮抗劑-G31P對(duì)小鼠綠膿桿菌肺炎的治療[D];大連醫(yī)科大學(xué);2008年

，

本文編號(hào)：1493770