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化療藥物對結(jié)腸癌細胞SW480中免疫共刺激分子B7-H1的誘導及機理

發(fā)布時間:2018-02-04 03:45

  本文關(guān)鍵詞: 結(jié)腸癌 SW480 B7-H1 出處:《華中科技大學》2010年碩士論文 論文類型:學位論文


【摘要】:目的:研究常用化療藥物5-氟尿嘧啶和紫杉醇在結(jié)腸癌細胞中對免疫共刺激分子B7-H1表達的誘導及機理。 方法:5-氟尿嘧啶和紫杉醇處理SW480細胞24小時后用RT-PCR檢測B7-H1的mRNA,48小時后用免疫熒光和流式細胞儀檢測B7-H1的蛋白。 結(jié)果:5-氟尿嘧啶和紫杉醇在SW480細胞中可引起免疫共刺激分子B7-H1的表達:用5-氟尿嘧啶( 10μg/ml )和紫杉醇( 2.5μM )處理結(jié)腸癌SW480細胞48小時,可用免疫熒光定性檢測到B7-H1蛋白的免疫熒光信號,也可以用流式細胞術(shù)半定量檢測到增加的B7-H1蛋白。然而,半定量RT-PCR檢測發(fā)現(xiàn),B7-H1的mRNA在5-氟尿嘧啶( 10μg/ml )和紫杉醇( 2.5μM )刺激SW480細胞24小時后,并沒有像蛋白一樣出現(xiàn)增加。在本實驗作為引起B(yǎng)7-H1蛋白增加陽性對照的γ-干擾素也不引起B(yǎng)7-H1 mRNA的增加。 結(jié)論:化療藥物在治療腫瘤的同時會引起B(yǎng)7-H1蛋白的表達,這可能與化療不確切的治療效果相關(guān),同時我們也證實B7-H1分子的轉(zhuǎn)錄后調(diào)控在蛋白表達中起重要作用。
[Abstract]:Aim: to investigate the induction and mechanism of immunostimulatory molecule B7-H1 by 5-fluorouracil and paclitaxel in colon cancer cells. Methods SW480 cells were treated with 10% 5-fluorouracil and paclitaxel for 24 hours. The mRNA of B7-H1 was detected by RT-PCR. After 48 hours, the protein of B 7 H 1 was detected by immunofluorescence and flow cytometry. Results the expression of B7-H1 was induced in SW480 cells by using 5 fluorouracil (10 渭 g / ml) and paclitaxel (10 渭 g / ml). SW480 cells were treated with 2.5 渭 M for 48 hours. The immunofluorescence signal of B7-H1 protein could be detected qualitatively by immunofluorescence, and the increased B7-H1 protein could also be detected by flow cytometry. However, semi-quantitative RT-PCR was used to detect B7-H1 protein. B7-H1 mRNA was stimulated by 5-fluorouracil (10 渭 g / ml) and paclitaxel (2.5 渭 M) for 24 hours. There was no increase in B7-H1 protein, nor did interferon 緯 -interferon (IFN- 緯), which was used as a positive control to induce B7-H1 protein increase, increase B7-H1 mRNA in this experiment. Conclusion: chemotherapy drugs can induce the expression of B7-H1 protein at the same time, which may be related to the inexact therapeutic effect of chemotherapy. We also confirm that the posttranscriptional regulation of B _ 7-H _ 1 plays an important role in protein expression.
【學位授予單位】:華中科技大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2010
【分類號】:R392

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