本文關(guān)鍵詞： 日本血吸蟲 程序性死亡-1 程序性死亡配體-1 程序性死亡配體-2 白細胞介素-4 γ-干擾素　出處：《華中科技大學(xué)》2008年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】： 免疫系統(tǒng)的功能是免疫防御、免疫自穩(wěn)和免疫監(jiān)視。機體抵抗病原體感染的免疫機制包括非特異性免疫與特異性免疫,針對病原體感染產(chǎn)生免疫應(yīng)答的主要目的是清除病原體。免疫應(yīng)答包括抗原識別、免疫細胞的活化和分化、效應(yīng)分子(體液免疫)和效應(yīng)細胞(細胞免疫)對病原體的清除作用以及對免疫應(yīng)答的調(diào)節(jié)。一般隨著病原體的清除后免疫應(yīng)答隨之結(jié)束。但病原體感染會對機體免疫功能產(chǎn)生多方面的影響:既刺激機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答,也可以使機體免疫功能降低,導(dǎo)致感染進入慢性期。免疫抑制主要表現(xiàn)為T細胞產(chǎn)生特異性抗體能力降低,體內(nèi)、外細胞免疫或遲發(fā)型超敏反應(yīng)減弱,特定的淋巴細胞亞群數(shù)量的減少和一定程度的功能抑制。 免疫抑制的形成與細胞間相互作用產(chǎn)生負(fù)性的傳遞信號有著密切的關(guān)系。這些信號限制、終止和/或減弱T細胞應(yīng)答,改變這些協(xié)同刺激因子的表達可以調(diào)控免疫的強度和方向。到目前為止已發(fā)現(xiàn)毒性T淋巴細胞相關(guān)抗原-4(Cytotoxic T lymphocyte associated antigen-4, CTLA-4)、B/T淋巴細胞間抑制信號(B and T lymphocyte attenuator, BTLA)、程序性死亡-1(Programmed death 1,PD-1)等B7-CD28家族的蛋白分子以及調(diào)節(jié)性T細胞(Regulatory T cells, Treg)和細胞因子(如白細胞介素-10)等與免疫負(fù)調(diào)節(jié)有關(guān)。它們發(fā)揮免疫自穩(wěn)的作用,避免過度免疫應(yīng)答形成病理損傷和自身免疫病。其中,PD-1是B7家族的第2個抑制性受體,其兩個配體分別為PD-L1和PD-L2,PD-1與其配體結(jié)合以后向胞內(nèi)傳導(dǎo)負(fù)性信號,成為免疫抑制中的重要傳導(dǎo)通路。PD-L1和PD-L2的表達與細胞因子的分泌相關(guān),其中Th1類的細胞因子如IFN-γ可顯著刺激PD-L1的表達上調(diào),而Th2類的細胞因子如IL-4則使PD-L2表達上調(diào)。 寄生蟲感染可導(dǎo)致宿主的免疫功能受到抑制,例如弓形蟲的感染誘導(dǎo)CTLA-4的釋放;馬來絲蟲可抑制T細胞的增生;非洲錐蟲感染后小鼠體內(nèi)巨噬細胞抗原遞呈功能缺陷。近年來在淋巴細胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒、HIV、HCV等病毒感染和幽門螺旋桿菌、墨西哥利什曼原蟲等細菌或原蟲感染的研究中發(fā)現(xiàn),免疫抑制的形成與PD-1及其配體的高表達密切相關(guān),在曼氏血吸蟲感染中也發(fā)現(xiàn)了PD-1及其配體的表達升高。日本血吸蟲感染亦會造成宿主的免疫功能抑制,其機制是否與PD-1以及配體有關(guān)則未見相關(guān)報道。本文旨在觀察和探討日本血吸蟲不同期抗原免疫后PD-1及其配體PD-L1、PD-L2的表達,以及與相關(guān)細胞因子分泌之間的關(guān)系。 分別用日本血吸蟲可溶性蟲卵抗原(Soluble egg antigen, SEA)和可溶性雄蟲抗原(Soluble male worm antigen, SMWA)腹部皮下多點注射免疫BALB/c小鼠,劑量均為50μg/次,免疫4次,每次間隔1周。正常對照組用PBS代替抗原。末次免疫后4周收集脾細胞,流式細胞術(shù)觀察小鼠脾淋巴細胞表面PD-1的表達及脾樹突狀細胞表面配體PD-L1和PD-L2的表達;將脾細胞在體外短暫培養(yǎng)后, 5μg/ ml ConA刺激,收集上清,夾心ELISA法檢測細胞因子IFN-γ和IL-4的表達。結(jié)果顯示,血吸蟲抗原免疫后淋巴細胞上PD-1的表達顯著增高,且蟲卵抗原免疫后的PD-1的表達高于雄蟲抗原免疫,差異具有顯著性;在樹突狀細胞上PD-L1和PD-L2的表達也較對照組顯著上升,蟲卵抗原免疫后的PD-L2的表達高于雄蟲抗原免疫,而雄蟲抗原免疫后的PD-L1的表達高于蟲卵抗原免疫,差異具有顯著性。ELISA檢測脾細胞培養(yǎng)上清發(fā)現(xiàn),兩種抗原免疫后脾細胞分泌的IFN-γ和IL-4均升高,其中雄蟲抗原免疫后IFN-γ的升高較IL-4更為明顯;而蟲卵抗原免疫后IL-4的分泌增加則較IFN-γ更明顯,說明PD-L1的高表達與日本血吸蟲的雄蟲抗原免疫后產(chǎn)生的IFN-γ有關(guān),而PD-L2的高表達則與日本血吸蟲的蟲卵抗原免疫后產(chǎn)生的IL-4有關(guān)。 本研究首次報道了日本血吸蟲抗原免疫促進了PD-1及其配體的表達,而且雄蟲抗原免疫后脾樹突狀細胞PD-L1的表達與IFN-γ的分泌有關(guān),而蟲卵抗原免疫后脾細胞PD-L2的表達與IL-4的分泌有關(guān)。
[Abstract]:immune response include antigen recognition , activation and differentiation of immune cells , effector molecule ( humoral immunity ) and effector cell ( cellular immunity ) . These signals limit , terminate and / or attenuate T cell responses . These signals limit , terminate , and / or attenuate T cell responses , and alter the expression of these cooperative stimulus factors to regulate the intensity and direction of immunity . In recent years , the expression of PD - 1 and its ligand , PD - 1 and its ligand , PD - 1 and its ligand , PD - L1 , PD - L2 and its relationship with the secretion of related cytokines were observed and discussed . The expression of PD - 1 and the expression of PD - L1 and IL - 4 in spleen cells were detected by ELISA . The results showed that the expression of PD - 1 and IL - 4 in spleen cells were significantly higher than those in control group . In this study , the expression of PD - 1 and its ligands was first reported by the antigen immunization of Schistosoma japonicum , and the expression of PD - L1 in spleen dendritic cells was related to the secretion of IFN - 緯 , while the expression of PD - L2 in spleen cells was related to the secretion of IL - 4 .

【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號】：R392

【參考文獻】

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本文編號：1486989