本文關(guān)鍵詞： 中子 免疫 凋亡 caspase3 Th1/Th2 IL-2 IL-4 rhIL-11　出處：《中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院》2010年碩士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

【摘要】： 目的意義 免疫器官對(duì)電離輻射高度敏感,且損傷重、恢復(fù)慢、難治愈,其損傷機(jī)制尚未闡明,亦無(wú)有效防治措施。由于中子照射研究要求條件高,中子損傷動(dòng)物模型復(fù)制難度大,不同劑量中子對(duì)免疫組織損傷的病變特點(diǎn)和規(guī)律均尚有待闡明。根據(jù)以往研究結(jié)果,本文關(guān)于中子免疫損傷的機(jī)制的研究從細(xì)胞凋亡和Th1/Th2失衡兩個(gè)方面進(jìn)行;并且應(yīng)用rhIL-11進(jìn)行治療的探索,本研究對(duì)于進(jìn)一步闡明中子免疫損傷的病理學(xué)特點(diǎn)、規(guī)律和機(jī)制以及防治具有重要意義。 材料方法 二級(jí)雄性健康BALB/c小鼠90只,隨機(jī)分為對(duì)照組30只、3Gy中子照射組30只、rhIL-11治療組30只。中子與γ射線混合比例為9:1,吸收劑量為3.0 Gy。rhIL-11按600μg/kg/d的腹腔注射給藥,每天給藥1次。各組小鼠分別于照射后6h、1d、3d和5d進(jìn)行取材。通過(guò)外周血淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、胸腺和脾臟重量指數(shù)、胸腺和脾臟光鏡和電鏡下形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化等方面進(jìn)行觀察,從大體、組織、細(xì)胞及亞細(xì)胞等多層面,系統(tǒng)研究中子照射對(duì)小鼠脾臟和胸腺形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響及rhIL-11對(duì)中子照射所致免疫損傷的治療作用;進(jìn)一步通過(guò)原位末端標(biāo)記檢測(cè)細(xì)胞凋亡、免疫組織化學(xué)檢測(cè)caspase3、IL-2和4的表達(dá)等探討中子輻射對(duì)免疫組織損傷的機(jī)制。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 1. 3Gy中子照射后小鼠外周血白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)的改變:3Gy中子照射后3d內(nèi),白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著低于對(duì)照組,且呈進(jìn)行性降低。 2. 3Gy中子照射后脾臟和胸腺重量指數(shù)的改變:中子照后3d胸腺和脾臟重量指數(shù)顯著低于對(duì)照組,且呈進(jìn)行性降低。 3. 3Gy中子照射后小鼠胸腺和脾臟的病理形態(tài)改變:(1)胸腺的病理改變:照射后6h,大量淋巴細(xì)胞凋亡或壞死;照射后1d,淋巴細(xì)胞數(shù)量顯著減少,偶見(jiàn)凋亡細(xì)胞,少量核碎片;照射后3d,淋巴細(xì)胞數(shù)量極度減少,網(wǎng)狀細(xì)胞及成纖維細(xì)胞等間質(zhì)細(xì)胞數(shù)量增多;照射后5d,胸腺淋巴組織出現(xiàn)增生,主要在皮質(zhì)區(qū)小動(dòng)脈周?chē)?2)脾臟的病理改變:照射后6h,大量淋巴細(xì)胞凋亡或壞死,以壞死細(xì)胞更為多見(jiàn);照射后1d,淋巴細(xì)胞數(shù)量顯著減少,偶見(jiàn)凋亡細(xì)胞,少量核碎裂、核溶解;照射后3d,淋巴細(xì)胞數(shù)量極度減少,仍可見(jiàn)大小不等的核碎片,漿細(xì)胞、網(wǎng)狀細(xì)胞及成纖維細(xì)胞等間質(zhì)細(xì)胞數(shù)量增多;照射后5d,淋巴組織出現(xiàn)增生修復(fù)。 (3)超微結(jié)構(gòu)的改變:3Gy中子照射后6h,胸腺和脾臟淋巴細(xì)胞凋亡壞死并存,以壞死為主,可見(jiàn)核染色質(zhì)濃縮、邊移,半月形改變,凋亡小體形成;核碎裂及核溶解多見(jiàn)。 4. 3Gy中子照射后小鼠胸腺和脾臟原位末端標(biāo)記檢測(cè)細(xì)胞凋亡結(jié)果:胸腺和脾臟結(jié)果相似,均于照射后6h和1d凋亡的細(xì)胞數(shù)顯著多于對(duì)照組;照射后3d陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)與對(duì)照組無(wú)顯著差異。 5. 3Gy中子照射后小鼠胸腺和脾臟caspase3的表達(dá)變化:(1)脾臟:照射后6h,白髓區(qū)可見(jiàn)大量強(qiáng)陽(yáng)性細(xì)胞,主要為淋巴細(xì)胞,照射后3d和5d,僅見(jiàn)少數(shù)陽(yáng)性淋巴細(xì)胞;caspase3表達(dá)的MOD和IOD均顯著高于其它各組。(2)胸腺:照射后6h和1d,皮質(zhì)區(qū)可見(jiàn)大量強(qiáng)陽(yáng)性細(xì)胞,主要為淋巴細(xì)胞;照射后3d和5d,僅見(jiàn)少數(shù)陽(yáng)性淋巴細(xì)胞。 6. 3Gy中子照射后小鼠脾臟IL-2的表達(dá)變化:照射后6h,白髓和紅髓區(qū)可見(jiàn)大量強(qiáng)陽(yáng)性細(xì)胞,主要為淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞,IL-2表達(dá)的MOD和IOD均顯著高于其它各組;照射后1d、3d和5d,陽(yáng)性細(xì)胞明顯減少,且主要為巨噬細(xì)胞。 7. 3Gy中子照射后小鼠脾臟IL-4的表達(dá)變化:對(duì)照組小鼠脾臟白髓和紅髓均可見(jiàn)大量陽(yáng)性細(xì)胞,包括淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和巨核細(xì)胞等;照射后6h和1d,陽(yáng)性細(xì)胞減少且表達(dá)減弱;照射后3d,陽(yáng)性細(xì)胞增多,且陽(yáng)性增強(qiáng)。3Gy中子照射后各時(shí)間點(diǎn),IL-4表達(dá)的MOD和IOD均顯著低于對(duì)照組。 8. rhIL-11治療對(duì)照射后小鼠外周血白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)的影響: rhIL-11治療后3d和5d,治療組白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)及淋巴細(xì)胞百分比均顯著低于對(duì)照組,但與照射組相比無(wú)顯著差異;治療3d和5d組無(wú)顯著差異。 9. rhIL-11治療對(duì)照射后小鼠胸腺和脾臟重量指數(shù)的變化:胸腺和脾臟指數(shù)的變化規(guī)律相似:rhIL-11治療后3d和5d,治療組顯著低于對(duì)照組,但與照射組相比無(wú)顯著差異。 10. rhIL-11治療對(duì)照射后小鼠胸腺和脾臟形態(tài)的影響:(1)胸腺:rhIL-11治療后3d和5d,皮質(zhì)區(qū)淋巴組織即出現(xiàn)增生,主要在小動(dòng)脈周?chē)?2)脾臟: rhIL-11治療后3d和5d,白髓區(qū)淋巴組織即出現(xiàn)增生,小動(dòng)脈周?chē)馨图?xì)胞數(shù)量增多。 結(jié)論 1. 3.0 Gy中子照射可導(dǎo)致脾臟和胸腺形態(tài)結(jié)構(gòu)破壞:(1)病變特點(diǎn)和規(guī)律為:淋巴細(xì)胞損傷表現(xiàn)為凋亡或壞死,以壞死為主;胸腺皮質(zhì)區(qū)淋巴細(xì)胞的凋亡和壞死較髓質(zhì)區(qū)更為嚴(yán)重;脾臟白髓細(xì)胞凋亡和壞死較紅髓更為嚴(yán)重;照射后淋巴細(xì)胞損傷出現(xiàn)早,病變發(fā)展迅速;淋巴細(xì)胞增生出現(xiàn)的較早。(2)病理分期為:淋巴組織細(xì)胞凋亡壞死期;淋巴組織細(xì)胞殘留枯竭期;淋巴細(xì)胞增生期。 2.細(xì)胞凋亡是中子輻射致免疫組織損傷重要死亡方式之一,caspase3在中子照射所致淋巴細(xì)胞凋亡中發(fā)揮調(diào)控作用。 3.中子照射導(dǎo)致Th1和Th2型細(xì)胞因子失衡:早期為T(mén)h1型反應(yīng)優(yōu)勢(shì),細(xì)胞免疫為主,導(dǎo)致免疫組織細(xì)胞損傷;后期為T(mén)h2型反應(yīng)優(yōu)勢(shì),體液免疫為主,抑制免疫炎癥,減少過(guò)度損傷。 4. rhIL-11對(duì)中子照射所致免疫組織損傷具有一定治療作用。
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【學(xué)位授予單位】：中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類(lèi)號(hào)】：R363

【參考文獻(xiàn)】

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1 呂U，

本文編號(hào)：1475250