本文關(guān)鍵詞： 妊娠 胎盤 單核-巨噬細(xì)胞 樹突狀細(xì)胞 免疫耐受　出處：《南京醫(yī)科大學(xué)》2010年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：位于母胎界面的蛻膜被認(rèn)為是一個免疫豁免組織,妊娠早期大量白細(xì)胞在此選擇性聚集,其中最主要的是蛻膜NK細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞(dendritic cells,DCs)、單核-巨噬細(xì)胞和T細(xì)胞。這些免疫活性細(xì)胞在局部組織微環(huán)境的調(diào)控下能夠獲得特異性的表型和功能,從而決定局部免疫反應(yīng)的取向--免疫應(yīng)答或免疫耐受形成。 抗原遞呈細(xì)胞(antigen-presenting cells,APC)參與免疫應(yīng)答的調(diào)節(jié)。樹突狀細(xì)胞(DCs)和單核-巨噬細(xì)胞都是重要的抗原遞呈細(xì)胞(APC)。單核細(xì)胞又是DCs的重要前體細(xì)胞之一。在整個妊娠的過程中,巨噬細(xì)胞在胎盤組織都持續(xù)存在,數(shù)量充足,并且大量浸潤于胚胎種植區(qū)域,提示可能與妊娠相關(guān)。利用CD14+免疫磁珠獲得較高純度的胎盤單核-巨噬細(xì)胞。其中DCs是功能最強(qiáng)大的專職性APC。研究證實,在蛻膜存在著DCs,并且可能參與了正常妊娠時對胎兒抗原的免疫耐受以及分娩的發(fā)動,但是其確切的機(jī)制目前仍不明了。因此,研究胎盤單核-巨噬細(xì)胞及由其分化形成的DCs的免疫學(xué)特性,對我們認(rèn)識妊娠耐受和分娩發(fā)動相關(guān)的免疫學(xué)機(jī)制具有重要意義。 我們利用CD14免疫磁珠獲得較高純度的胎盤單核-巨噬細(xì)胞,首先觀察了不同妊娠階段胎盤源性單核-巨噬細(xì)胞生物學(xué)特性的差異;接著利用內(nèi)皮穿越模型,模擬體內(nèi)單核-巨噬細(xì)胞在血管-淋巴管內(nèi)外移行的過程中分化發(fā)育為樹突狀細(xì)胞的過程,將妊娠不同時期胎盤組織局部的的單核巨噬細(xì)胞體外誘導(dǎo)形成DCs,并觀察不同妊娠階段胎盤單核-巨噬細(xì)胞來源的DCs的生物學(xué)特性的差異。繼而綜合分析單核-巨噬細(xì)胞本身及分化形成的DCs在妊娠過程中可能發(fā)揮的作用,以幫助于理解母胎免疫耐受調(diào)節(jié)機(jī)制。 第一部分結(jié)果表明,足月胎盤來源的單核-巨噬細(xì)胞低表達(dá)與細(xì)胞免疫激活有關(guān)的細(xì)胞表面標(biāo)志物CD86、HLA-DR,幾乎不表達(dá)CD80、CD83;表達(dá)M2型巨噬細(xì)胞標(biāo)志CD206;其細(xì)胞培養(yǎng)上清中含有低水平的IL-10,TGF-β;具有較弱的刺激同種異體淋巴細(xì)胞增殖的能力,與同種異體淋巴細(xì)胞混合培養(yǎng)上清中具有低水平的IL-10,高水平的TGF-β。相比之下,中期妊娠胎盤單核-巨噬細(xì)胞CD80、CD86及HLA-DR的表達(dá)水平較高(均P 0.05);M2型巨噬細(xì)胞標(biāo)志CD206的表達(dá)更高(P 0.05);其細(xì)胞培養(yǎng)上清中IL-10、TGF-β水平顯著較高(均P 0.05);其刺激同種異體淋巴細(xì)胞增殖的能力也很弱,混合培養(yǎng)上清中同樣具有高水平的TGF-β,但I(xiàn)L-10水平顯著更高(P 0.05)。這些結(jié)果顯示,妊娠中期和晚期胎盤組織局部的單核巨噬細(xì)胞都不具有免疫激活特性,激活同種異體T細(xì)胞增殖的能力很弱;兩者間最顯著的區(qū)別在于中期妊娠胎盤的單核-巨噬細(xì)胞表達(dá)更高水平的CD206,分泌更高水平的IL-10和TGF-β,因此推出兩者具有不同的免疫狀態(tài)。中期妊娠胎盤來源的單核巨噬細(xì)胞可能具有更顯著的免疫抑制調(diào)節(jié)功能,并可能主要通過誘導(dǎo)IL-10發(fā)揮免疫抑制功能。 第二部分結(jié)果表明,足月妊娠發(fā)動時,晚期胎盤來源的單核-巨噬細(xì)胞經(jīng)過內(nèi)皮單層誘導(dǎo)培養(yǎng)48h后,在內(nèi)皮上方再現(xiàn)的細(xì)胞與其前體細(xì)胞相比,具有了明顯的樹突狀形態(tài),高表達(dá)CD83、CD80、CD86和HLA-DR;分泌較低水平的TGF-β、不分泌IL-10,并具有很強(qiáng)的刺激同種異體T淋巴細(xì)胞增殖的能力,可以誘導(dǎo)與之相作用的T淋巴細(xì)胞更多的表達(dá)Th1型細(xì)胞因子IFN-γ。相比較而言,中期妊娠胎盤來源的單核-巨噬細(xì)胞經(jīng)過內(nèi)皮單層誘導(dǎo)培養(yǎng)48h后,在內(nèi)皮上方再現(xiàn)的細(xì)胞表達(dá)的CD83、CD80、CD86和HLA-DR水平并未見顯著增高,尤其低表達(dá)共刺激分子CD80,分泌高水平的IL-10、TGF-β,刺激同種異體T淋巴細(xì)胞增殖的能力也未較其前體細(xì)胞有所增強(qiáng),對與之相互作用的同種異體T淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)形成較多的IL-10分泌細(xì)胞。這些結(jié)果提示,妊娠不同時期胎盤源性的單核-巨噬細(xì)胞在內(nèi)皮(逆)穿越模型中分化為功能不同的樹突狀細(xì)胞,可能參與了妊娠中期對胎兒抗原的免疫耐受及分娩發(fā)動后對胎兒抗原的免疫激活。
[Abstract]:Decidual membranes located at the interface of the parent fetus are considered to be an immune - exempt organization , and a large number of leukocytes in the early pregnancy are selectively aggregated , among which are decidual NK cells , dendritic cells ( DCs ) , mononuclear - macrophages and T cells . These immunoactive cells are capable of obtaining specific phenotype and function under the regulation of local tissue microenvironment , thereby determining the orientation - immune response or immune tolerance formation of the local immune response . Dendritic cells ( DCs ) and monocytes - macrophages are important antigen - presenting cells ( APC ) , and monocytes are one of the most important precursor cells of DCs . By using CD14 immunomagnetic beads to obtain high - purity placental mononuclear - macrophages , the differences of the biological characteristics of placenta - derived mononuclear - macrophages in different stages of pregnancy were first observed . The results showed that the low expression of IL - 10 and TGF - 尾 in the medium - term pregnant placentae had higher levels of IL - 10 , TGF - 尾 and HLA - DR . The levels of IL - 10 and TGF - 尾 were higher in the supernatant ( P 0.05 ) , and the levels of IL - 10 and TGF - 尾 were higher in the supernatant of the culture supernatant ( P 0.05 ) . These results indicate that both mid - term and late - stage placental tissues have no immune activation characteristics , and the ability to activate allogeneic T - cell proliferation is weak ; the most significant difference between the two is that mononuclear - macrophages in the medium - term pregnancy placenta express a higher level of CD206 , secrete higher levels of IL - 10 and TGF - . beta . , thereby introducing a higher level of IL - 10 and TGF - . In the second part , the expression of CD83 , CD80 , CD86 and HLA - DR in the cells of the medium - trimester placental origin was not significantly higher than that of the precursor cells after 48 hours after the induction of endothelial monolayer . The results suggested that the expression of IL - 10 , TGF - 尾 and HLA - DR in the placenta of the medium - term pregnancy were not significantly higher than those of the precursor cells .

【學(xué)位授予單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R392

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1462479