本文關(guān)鍵詞：戈登鏈球菌抗結(jié)核粘膜疫苗重構(gòu)的研究　出處：《重慶醫(yī)科大學(xué)》2009年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 戈登鏈球菌 粘膜疫苗 ESAT6基因

【摘要】： 目的:構(gòu)建結(jié)核分枝桿菌(MTb)ESAT6基因表達(dá)載體并在戈登鏈球菌GP251中進(jìn)行分泌表達(dá)。 方法:以結(jié)核桿菌H37Rv基因組DNA為模板擴(kuò)增ESAT6基因,將ESAT6基因克隆到質(zhì)粒PSMB104,生成PSMB104- ESAT6重組載體,用于轉(zhuǎn)化感受態(tài)戈登鏈球菌表達(dá)菌株GP251 ,構(gòu)建戈登鏈球菌粘膜疫苗重構(gòu)體。用Tricine-SDS-PAGE和Western印跡檢測(cè)ESAT6蛋白的表達(dá),并用ELISA技術(shù)檢測(cè)該蛋白的分泌表達(dá)量。 結(jié)果:經(jīng)測(cè)定證實(shí)ESAT6基因表達(dá)載體構(gòu)建成功,轉(zhuǎn)化戈登鏈球菌表達(dá)菌株GP251后可分泌表達(dá)出相對(duì)分子質(zhì)量約10KD的ESAT6蛋白,Western印跡證明蛋白有較好的免疫原性。 結(jié)論:ESAT6基因表達(dá)載體成功構(gòu)建并能在戈登鏈球菌GP251中進(jìn)行分泌表達(dá),為構(gòu)建新型抗結(jié)核粘膜疫苗提供了一些參考。
[Abstract]:Aim: to construct an ESAT6 gene expression vector of Mycobacterium tuberculosis and express it in GP251 of Streptococcus Gordon. Methods: the ESAT6 gene was amplified from the genomic DNA of Mycobacterium tuberculosis H37Rv, and the ESAT6 gene was cloned into plasmid PSMB104. PSMB104- ESAT6 recombinant vector was generated and used to transform the expression strain GP251 of Streptococcus Gordon. The recombinant mucosal vaccine of Streptococcus Gordon was constructed and the expression of ESAT6 protein was detected by Tricine-SDS-PAGE and Western blot. The secretory expression of the protein was detected by ELISA. Results: the ESAT6 gene expression vector was successfully constructed, and the ESAT6 protein with relative molecular weight of about 10KD was secreted after transformed into Streptococcus Gordon expressed strain GP251. Western blot showed that the protein had good immunogenicity. Conclusion the expression vector of ESAT6 gene was successfully constructed and secreted in Streptococcus Gordon GP251, which provided some references for the construction of novel anti-tuberculosis mucosal vaccine.
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號(hào)】：R392

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