本文關(guān)鍵詞：Jagged-1對(duì)Th17細(xì)胞分化影響的初探　出處：《暨南大學(xué)》2010年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： Jagged-1 Th17 分化 淋巴細(xì)胞 小鼠

【摘要】： 目的：直接用Notch受體的配體可溶性Jagged-1/Fc嵌合蛋白(Jagged-1/Fc)在體外激活Notch信號(hào)通路以誘導(dǎo)小鼠淋巴結(jié)細(xì)胞分化,初步探討Notch信號(hào)通路的活化在Th17細(xì)胞分化中的作用。 方法：不同濃度Jagged-1在不同時(shí)間刺激小鼠淋巴結(jié)細(xì)胞,選用Notch信號(hào)通路抑制劑DAPT和Jagged-1中和抗體以阻斷該信號(hào)通路的活化,通過ELISA檢測(cè)處理細(xì)胞培養(yǎng)上清中白細(xì)胞介素17(IL-17)、白細(xì)胞介素6(IL-6)、白細(xì)胞介素10(IL-10)、白細(xì)胞介素4(IL-4)和干擾素γ(IFN-γ)的表達(dá)水平；通過western blot檢測(cè)外周淋巴細(xì)胞的Jagged-1-Notch信號(hào)通路下游分子NICD、Hes-1、Deltex-1以及p-STAT3的表達(dá)；熒光標(biāo)記單克隆抗體染色技術(shù)結(jié)合流式細(xì)胞儀分析Jagged-1對(duì)外周T淋巴細(xì)胞CD4、IL-17A和IFNγ表達(dá)的影響。 結(jié)果：隨著Jagged-1濃度的增高,IL-17的表達(dá)下降,IFN-γ和IL-10的表達(dá)升高,第3d達(dá)到最高；Notch信號(hào)通路下游蛋白Hes-1和Deltex-1也在第3d達(dá)最高峰；培養(yǎng)3d時(shí),IL-17的表達(dá)隨著Jagged-1濃度變化而降低,western blot檢測(cè)p-STAT3發(fā)現(xiàn)其表達(dá)隨著Jagged-1濃度的增高而下降,而DAPT能夠抑制Jagged-1的這種作用。 結(jié)論：Jagged-1能通過NICD激活Notch通路下游分子Hes-1和Deltex-1,抑制p-STAT3的表達(dá),促進(jìn)IFN-γ和IL-10細(xì)胞因子的生成,并抑制IL-4和IL-17的表達(dá),從而影響外周T淋巴細(xì)胞向Thl7細(xì)胞分化。
[Abstract]:Objective: to directly use the ligand soluble Jagged-1/Fc chimeric protein (Jagged-1 / Fc) of Notch receptor. Notch signaling pathway was activated in vitro to induce the differentiation of mouse lymph node cells. To explore the role of activation of Notch signaling pathway in the differentiation of Th17 cells. Methods: mouse lymph node cells were stimulated with different concentrations of Jagged-1 at different time. Notch signaling pathway inhibitor DAPT and Jagged-1 neutralizing antibody were used to block the activation of the signaling pathway. IL-17, IL-6, IL-10 in the supernatant of cell culture were detected by ELISA. Interleukin-4 (IL-4) and interferon 緯 (IFN- 緯) expression level; The downstream molecule of Jagged-1-Notch signaling pathway, NICD- Hes-1, was detected by western blot. The expression of Deltex-1 and p-STAT3; The expression of IL-17A and IFN 緯 in peripheral T lymphocytes of Jagged-1 was analyzed by fluorescence labeled monoclonal antibody staining and flow cytometry. Results: with the increase of Jagged-1 concentration, the expression of IL-17 decreased and the expression of IFN- 緯 and IL-10 increased, and reached the highest level on the 3rd day. The downstream proteins Hes-1 and Deltex-1 of Notch signaling pathway also reached the peak on the 3rd day. After 3 days of culture, the expression of IL-17 decreased with the change of Jagged-1 concentration. Western blot detection of p-STAT3 showed that the expression of p-STAT3 decreased with the increase of Jagged-1 concentration, while DAPT could inhibit this effect of Jagged-1. ConclusionJagged-1 can activate Hes-1 and Deltex-1 downstream of Notch pathway through NICD and inhibit the expression of p-STAT3. IFN- 緯 and IL-10 cytokines were produced and the expression of IL-4 and IL-17 were inhibited, which affected the differentiation of peripheral T lymphocytes into Thl7 cells.
【學(xué)位授予單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號(hào)】：R392

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