本文關鍵詞：Apr3條件性基因敲除小鼠模型的建立及初步表型研究　出處：《上海交通大學學報(醫(yī)學版)》2015年08期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：目的建立凋亡相關蛋白3(Apr3)條件性基因敲除小鼠模型,并初步研究其表型。方法設計基因敲除方案,獲得Apr3flox(+/-)嵌合體小鼠,繁殖獲得Apr3(-/+)小鼠后,再自交得到Apr3基因全身敲除Apr3(-/-)純合小鼠和對照野生型小鼠。提取小鼠鼠尾組織基因組DNA,PCR擴增野生型和敲除基因片段,在DNA水平判斷小鼠的基因型;提取小鼠肝臟RNA和蛋白,利用RT-PCR和Western blotting技術檢驗Apr3基因的表達;觀察基因敲除小鼠的遺傳性狀、體質量變化趨勢以及可能影響生長發(fā)育和代謝的指標如血糖、血脂、肝功能;對小鼠溶酶體富集的主要臟器行蘇木精-伊紅染色(H-E染色)觀察。結果成功建立Apr3基因敲除小鼠模型,其中Apr3(-/-)小鼠存活并且可育,在2月齡時體質量落后于野生型小鼠。肝功能檢測結果顯示,2月齡Apr3(-/-)小鼠谷草轉氨酶(AST)較野生型小鼠升高(P0.05);H-E染色結果顯示,肝組織出現(xiàn)明顯肝細胞水腫樣變性和匯管區(qū)炎癥細胞浸潤。結論初步建立了Apr3條件性基因敲除小鼠模型;Apr3基因敲除引起2月齡小鼠體質量落后、肝臟組織形態(tài)學異常和AST升高。
[Abstract]:Objective to establish the apoptosis related protein 3 (Apr3) gene conditional knockout mice, and to study the method of gene knockout phenotype. The design scheme, Apr3flox (+ / -) chimeric mice, Apr3 (- / +) mice reproduction, and self Apr3 gene knockout body Apr3 (- / -) homozygous mice and controls the wild type mice. Genomic DNA was extracted from the mouse tail tissue, PCR amplification of wild-type and knockout gene fragment, determine the genotype of mice at DNA level; extraction of mouse liver RNA and protein expression by RT-PCR and Western blotting test of Apr3 gene; gene knockout mice to observe genetic traits, body weight changes and trends may affect the growth and metabolism indexes such as blood glucose, blood lipid, liver function; the main organs of mouse lysosomal accumulation of hematoxylin eosin staining (H-E staining) were observed. Results the successful establishment of Apr3 gene knockout mice, The Apr3 (- / -) mice survival and fertility, in February at the age of mass behind the wild type mice. Liver function test results showed that the February age Apr3 (- / -) mice aspartate aminotransferase (AST) increased compared with wild-type mice (P0.05); H-E staining showed that the liver tissue appeared obvious liver cell edema like periportal degeneration and inflammatory cell infiltration. Conclusion the initial establishment of the Apr3 conditional gene knockout mice; Apr3 gene knockout mice caused by body mass in February behind, liver tissue morphological abnormalities and AST increased.

【作者單位】： 上海交通大學醫(yī)學院附屬新華醫(yī)院上海市兒科醫(yī)學研究所內分泌遺傳代謝病研究室;
【基金】：國家自然科學基金(81071121)~~
【分類號】：R-332;R363
【正文快照】： 凋亡相關蛋白3(apoptosis related protein 3,APR3)為功能尚未明確的溶酶體膜蛋白(lysosomalmembrane proteins,LAMPs)。目前,對該基因功能的研究較少。最初對CD34+造血干細胞中未定義表達基因的研究表明,APR3參與造血干細胞的形成和分化[1]。有研究在全反式維甲酸處理的人早

【共引文獻】

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