戊型肝炎病毒高通量中和效價評價模型的建立
本文關(guān)鍵詞:戊型肝炎病毒高通量中和效價評價模型的建立 出處:《病毒學(xué)報》2015年01期 論文類型:期刊論文
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【摘要】:廣泛有效的體外感染模型的缺乏限制了抗戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)抗體及血清定量化中和效價的評估,從而阻礙了對HEV相關(guān)抗體應(yīng)答及免疫機制的深入研究。本研究首先通過在HEV低效復(fù)制細胞系HepG2肝癌細胞株上進行了HEV感染細胞后的連續(xù)監(jiān)測,直到第13d到達病毒載量的檢測下限,驗證了該細胞系建立感染模型的可行性,進一步采用96孔多通道平行感染、核酸提取及實時熒光定量PCR對五株抗HEV的鼠源單克隆抗體及四位戊肝疫苗接種者的接種前、后血清樣本進行了細胞中和試驗。結(jié)果顯示應(yīng)用該模型能夠?qū)崿F(xiàn)對不同中和能力的單抗及接種疫苗前后的血清進行中和效價的定量化評估。表明本研究已成功建立了HEV體外高通量中和評價模型,同時也顯示出該模型在HEV疫苗及抗體應(yīng)答表位研究中所具有的潛在價值。
[Abstract]:The infection model is widely effective in vitro limits of hepatitis E virus (Hepatitis E virus, HEV) antibody and quantitative evaluation of serum neutralization titer, which hinders the further research of HEV antibody response and the immune mechanism. This study first through the HEV complex system inefficient HepG2 cells of hepatocellular carcinoma cell lines continuous monitoring of cells after HEV infection, the detection limit until the 13D reaches the viral load, verify the feasibility of the establishment of the cell line infection model, further by using the 96 hole multi channel parallel infection, vaccination of nucleic acid extraction and real-time fluorescence quantitative PCR in five strains of anti HEV murine monoclonal antibody and four hepatitis E vaccine recipients before the cell neutralization test after serum samples. The results showed that the application of the model can be achieved on different sera before and after neutralizing monoclonal antibody and vaccine for the neutralization titer Quantitative assessment. Evidence of this research have been successfully established in vitro HEV high flux and evaluation model, and show that the model in the HEV vaccine and antibody response has the potential value of the table in the study.
【作者單位】: 廈門大學(xué)分子疫苗學(xué)與分子診斷學(xué)國家重點實驗室 國家傳染病診斷試劑與疫苗工程技術(shù)研究中心 公共衛(wèi)生學(xué)院;廈門大學(xué)分子疫苗學(xué)與分子診斷學(xué)國家重點實驗室 國家傳染病診斷試劑與疫苗工程技術(shù)研究中心 生命科學(xué)院;
【基金】:國家基金(81373061) 重大新藥創(chuàng)制(2013ZX09101017) 廈門市科技計劃項目(3502Z20131001)
【分類號】:R373.21
【正文快照】: 戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)引發(fā)戊型肝炎(Hepatitis E),是全球范圍內(nèi)引發(fā)急性病毒性肝炎的最主要病原體之一。尤其在一些發(fā)展中國家50%的急性病毒性肝炎病例與HEV相關(guān)[1],HEV已經(jīng)成為威脅人群健康的公共衛(wèi)生問題。患戊型肝炎的人群病死率達到0.2%~4%,孕婦中病死率可
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,本文編號:1389209
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