發(fā)布時間：2018-01-04 08:02

  本文關(guān)鍵詞：云南元江—紅河流域乙型腦炎媒介蚊蟲群落特征研究　出處：《大理學(xué)院》2010年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：目的：通過對云南元江-紅河流域不同地理氣候環(huán)境梯度中的媒介蚊蟲組成、分布和對健康人群血清學(xué)及其媒介蚊蟲乙型腦炎帶毒調(diào)查,探討該流域乙型腦炎媒介蚊蟲物種多樣性特征及其疾病的實(shí)際流行水平。 內(nèi)容：(1)乙型腦炎媒介蚊蟲群落特征調(diào)查：在元江-紅河流域不同環(huán)境梯度(緯度和海拔)采用誘蚊燈通宵捕蚊,以觀察媒介蚊蟲的組成與分布等特點(diǎn)。(2)乙型腦炎血清學(xué)調(diào)查：在各觀察點(diǎn)采集健康人群血清,采用血凝抑制實(shí)驗檢測健康人群乙型腦炎抗體IgG水平。(3)蚊蟲乙型腦炎病毒自然帶毒情況調(diào)查：對采集的部分蚊蟲標(biāo)本進(jìn)行研磨,用RT-PCR、免疫熒光等實(shí)驗方法進(jìn)行病毒鑒定,上清液接種組織培養(yǎng)細(xì)胞以分離乙型腦炎病毒, 方法：(1)媒介蚊蟲群落特征調(diào)查：在元江紅河流域北緯23。-26。、東經(jīng)100°-104。之間和海拔170-1642米之間的元江紅河流域區(qū)域內(nèi),采用重點(diǎn)普查和抽樣調(diào)查相結(jié)合的方法,選擇不同經(jīng)緯度(以每個緯度或經(jīng)度為一水平梯度)、海拔(以每500米海拔高度為—垂直梯度)、地理氣候及植被等梯度環(huán)境內(nèi)的各類型生境地進(jìn)行蚊蟲媒介物種多樣性及相關(guān)生物學(xué)的調(diào)查取樣。方法采用誘蚊燈對不同環(huán)境梯度內(nèi)的人、畜房通宵捕捉成蚊,以觀察不同生境的蚊蟲組成；通過不同環(huán)境內(nèi)所獲的蚊蟲標(biāo)本、資料和數(shù)據(jù)進(jìn)行蚊蟲多樣性分析。(2)乙型腦炎血清學(xué)調(diào)查：在元江-紅河流域的上中下游分別選取景東、新平、景谷、金平4縣采集健康人血清,采用血凝抑制實(shí)驗檢測正常人群乙型腦炎抗體IgG水平。(3)蚊蟲乙型腦炎病毒自然帶毒調(diào)查：對現(xiàn)場調(diào)查中所捕獲的成蟲,經(jīng)分類鑒定后分裝,置于液氮罐內(nèi)低溫保存,帶回實(shí)驗室(P2或P3實(shí)驗室)進(jìn)行乙型腦炎病毒的檢測或分離；蚊蟲標(biāo)本病毒檢測或分離方法主要采取研磨、離心等處理后用RT-PCR、免疫熒光實(shí)驗等方法進(jìn)行鑒定,再通過接種組織培養(yǎng)C6/36細(xì)胞方法分離出乙型腦炎病毒。 結(jié)果：(1)共捕獲蚊蟲6屬37種(亞種)87875只,其中三帶喙庫蚊和中華按蚊屬于當(dāng)?shù)氐膬?yōu)勢蚊種。結(jié)果分析發(fā)現(xiàn),本研究區(qū)域蚊類物種多樣性與均勻度成顯著正相關(guān)(r=0.951),與生態(tài)優(yōu)勢度成高度負(fù)相關(guān)(r=-0.976),與緯度呈負(fù)相關(guān)(r=-0.561),與經(jīng)度梯度呈正相關(guān)(r=0.411),但與海拔梯度的變化及物種多樣性的關(guān)系不明顯(r=0.177)。(2)景東、新平、景谷和金平共采集各縣正常人血清803份,乙型腦炎病毒IgG陽性率為61.89%,其中金平縣陽性率最高(75.62%),并且1-5歲兒童年齡組的抗體水平相對較低(45.21%)。(3)經(jīng)采用乙型腦炎病毒引物對2屬2種40批3321只雌性成蚊進(jìn)行乙型腦炎病毒RT-PCR檢測,結(jié)果4株為陽性,其中從三帶喙庫蚊中檢測到2株和中華按蚊2株；后經(jīng)核酸序列測定分析證實(shí)為乙型腦炎病毒；這4株病毒均對C6/36細(xì)胞能產(chǎn)生明顯的細(xì)胞病變,經(jīng)間接免疫熒光試驗為乙型腦炎病毒(JEV)。 結(jié)論：(1)三帶喙庫蚊和中華按蚊是元江-紅河流域地區(qū)居民點(diǎn)的優(yōu)勢蚊種,蚊蟲多樣性及其豐富度與調(diào)查點(diǎn)所處的緯度梯度具有一定的關(guān)系。(2)該流域健康人群中流行性乙型腦炎病毒抗體水平較高,說明這些地區(qū)乙型腦炎流行程度較高。(3)乙型腦炎媒介復(fù)雜,三帶喙庫蚊和中華按蚊屬于當(dāng)?shù)豃EV的重要媒介。
[Abstract]:Objective: through the Yunnan Yuanjiang - Red River geographical and climatic gradient in mosquitoes, and distribution of virus serological investigation and mosquito vectors of Japanese encephalitis with healthy people, to explore the basin of Japanese encephalitis mosquito species diversity characteristics and actual disease prevalence levels.
Content: (1) investigation of Mosquito Community Characteristics of Japanese encephalitis in Yuanjiang - Red River environmental gradient (latitude and elevation) night mosquito mosquito lamp used to observe the characteristics of the composition and distribution of mosquitoes. (2) survey of Japanese encephalitis serological: collecting the serum of healthy individuals at each observation point, inhibition test detection of health JE antibody IgG by hemagglutination. (3) survey the natural carriers of mosquito encephalitis virus: the mosquito samples for grinding, RT-PCR, immunofluorescence test and other methods for virus identification and isolation of Japanese encephalitis virus in the supernatant were inoculated tissue culture cells,
Methods: (1) investigation of the characteristics of mosquito community media: in the Yuanjiang Red River 23.-26. north latitude, longitude 100 degrees between -104. and elevation of 170-1642 meters between the Yuanjiang Red River area, the key method of combining general and sampling survey, select the different latitude and longitude (latitude or longitude for each to a level of elevation (gradient). Every 500 meters above sea level for vertical gradient), sampling of various types of habitats and vegetation geography and climate environment in the gradient of mosquito species diversity and biology. Methods using mosquito light to different environmental gradients within the human animal, real overnight mosquito to catch mosquitoes, observe in different habitats through the different environment; the mosquito samples, data and data analysis of insect diversity. (2) survey of Japanese encephalitis serological: in the Yuanjiang Red River: selected Jingdong, new Ping, Jinping County Jinggu, 4 acquisition of healthy human serum, inhibition test to detect JE antibody level by IgG blood coagulation. (3) with natural toxins in Japanese encephalitis virus in adult mosquitoes captured in the field investigation, were identified after packing them in liquid nitrogen cryopreservation, back to the lab (P2 or P3) for Laboratory of Japanese encephalitis virus detection or isolation; mosquitoes collected virus detection and separation method mainly adopts the centrifugal grinding, etc. after treatment with RT-PCR, immunofluorescence experiments were identified by inoculating tissue culture method of C6/36 cell isolation of Japanese encephalitis virus.
Results: (1) a total of 6 genera and 37 species of mosquitoes captured (subspecies) 87875, of which three Culex and Anopheles sinensis were the dominant species. The results showed that the study area of mosquito species diversity was positively correlated with uniformity (r=0.951), and a high degree of negative ecological dominance related (r=-0.976), and negatively correlated with latitude, longitude (r=-0.561) associated with positive gradient (r=0.411), but the relationship with altitudinal variation and species diversity is not obvious (r=0.177). (2) Jing Dong, Xinping, Jinggu and Jinping counties were collected in normal human serum 803, the positive rate of hepatitis B encephalitis virus IgG was 61.89%, the positive rate of Jinping County is the highest (75.62%), and the antibody level of children aged 1-5 years old age group is relatively low (45.21%). (3) the Japanese encephalitis virus primers on 2 genera and 2 species of the 40 batch of 3321 adult female mosquitoes of Japanese encephalitis virus RT-PCR detection results of 4 strains from the positive. Three strains of Culex pipiens pallens were detected in 2 strains and 2 strains of Anopheles sinensis. They were confirmed as Japanese encephalitis virus by nucleic acid sequence analysis. These 4 viruses all had obvious cytopathic effects on C6/36 cells, and indirect immunofluorescence test was Japanese encephalitis virus (JEV).
Conclusion: (1) three Culex and Anopheles sinensis was the dominant species in Yuanjiang - Red River settlements, the latitudinal gradient mosquito diversity and richness and survey points have certain relationship. (2) encephalitis B virus antibody level of healthy population in the high prevalence in these areas Japanese encephalitis in a higher degree. (3) Japanese encephalitis complex, an important medium of three Culex and Anopheles sinensis belongs to the local JEV.

【學(xué)位授予單位】：大理學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R384

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本文編號：1377725