銅綠假單胞菌外毒素A誘導(dǎo)MLE-12細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷并激活自噬
本文關(guān)鍵詞:銅綠假單胞菌外毒素A誘導(dǎo)MLE-12細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷并激活自噬 出處:《中國微生態(tài)學(xué)雜志》2015年10期 論文類型:期刊論文
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【摘要】:目的觀察銅綠假單胞菌外毒素A(PEA)對MLE-12細(xì)胞的氧化應(yīng)激損傷及其自噬活動的影響。方法體外培養(yǎng)MLE-12細(xì)胞至對數(shù)生長期,分別采用PEA 0、200、400、800和1 000ng/mL處理細(xì)胞1h和2h,之后進(jìn)一步采用PEA 1 000ng/mL處理細(xì)胞15min、30min、1h、2h和3h,應(yīng)用過氧化氫試劑盒檢測H2O2的生成量,Western-blot法檢測微管相關(guān)蛋白1輕鏈3(LC3)的表達(dá),分析LC3II與β-actin之間的比值變化。結(jié)果與對照組細(xì)胞相比較,隨著PEA濃度的增高,細(xì)胞的H2O2檢出量逐漸增加,PEA處理2h后,各組細(xì)胞H2O2檢出量分別是對照組的1.73、2.09、3.82和5.06倍(P0.01)。與此同時,細(xì)胞中自噬標(biāo)記物L(fēng)C3II的表達(dá)量顯著增加。此外,高濃度PEA(1 000ng/mL)處理細(xì)胞后,隨著時間的延長,H2O2檢出量明顯升高,同時伴隨著細(xì)胞自噬活動的增強(qiáng)。結(jié)論 PEA可以誘導(dǎo)MLE-12細(xì)胞產(chǎn)生氧化應(yīng)激損傷,并激活細(xì)胞的自噬活動。
[Abstract]:Objective To observe the effect of Pseudomonas aeruginosa exotoxin A (PEA) effect on MLE-12 cell oxidative stress and autophagy activity. MLE-12 cells were cultured to the logarithmic growth phase in vitro, respectively using PEA 0200400800 and 1H 1 cells treated with 000ng/mL and 2H, then further using PEA 1 cells treated with 000ng/mL 15min, 30min, 1H, 2H and 3H the generation of hydrogen peroxide, kit for detection of H2O2, detection of microtubule associated protein 1 light chain 3 (Western-blot LC3) expression ratio analysis of LC3II and beta -actin. Results compared with the control group cells, with the increase of the concentration of PEA, cell H2O2 detection was gradually increased after 2H treatment, PEA H2O2, the cells were detected respectively is 1.73,2.09,3.82 and 5.06 times higher than the control group (P0.01). At the same time, the expression of autophagy marker LC3II in cells increased significantly. In addition, the high concentration of PEA (1 000ng/mL) after treating cells, With the prolongation of time, the detection of H2O2 increased significantly, accompanied by the enhancement of autophagy. Conclusion PEA can induce oxidative stress damage and activate autophagy in MLE-12 cells.
【作者單位】: 中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院老年醫(yī)學(xué)科;中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院血液內(nèi)科;中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院第二腫瘤病房;
【分類號】:R363
【正文快照】: 銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)是一種革蘭陰性條件致病菌,常見于肺間質(zhì)纖維化、腫瘤、免疫功能缺陷患者的肺部感染。由于其復(fù)雜的發(fā)病機(jī)制及對抗生素的廣泛耐藥性,PA感染的臨床治療面臨著長期挑戰(zhàn)。細(xì)胞自噬作為機(jī)體的一種防御機(jī)制,在感染、免疫過程以及炎癥、腫瘤
【參考文獻(xiàn)】
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