本文關(guān)鍵詞：幽門螺桿菌CagA羧基端多態(tài)性分析及誘導(dǎo)AGS IL-8表達(dá)水平研究　出處：《中國疾病預(yù)防控制中心》2009年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】： 幽門螺桿菌(Helicobacter pylori,簡稱H.pylori或HP)感染是慢性胃炎、消化性潰瘍、胃癌的主要致病因素,嚴(yán)重胃部疾病患者攜帶的HP通常含cag致病島(cag PAI),其中所包含的cagA基因編碼的細(xì)胞毒素相關(guān)蛋白A(CagA)介導(dǎo)宿主胞內(nèi)一系列信號轉(zhuǎn)導(dǎo)反應(yīng)最終致不同程度的炎性組織損傷甚至癌變。西方國家患者感染cagA~+HP患嚴(yán)重胃腸道疾病幾率明顯增高,而東亞國家患者cagA~+檢出率達(dá)90%以上,不同東亞菌株間CagA羧基端多態(tài)性與不同臨床結(jié)局密切相關(guān)。CagA磷酸化位點位于羧基端EPIYA基序(Glu-Pro-Ⅱe-Tyr-Ala)的酪氨酸殘基,EPIYA多態(tài)性在東西方HP中主要表現(xiàn)在其側(cè)翼保守序列、EPIYA基序本身及其拷貝數(shù)上。目前根據(jù)EPIYA側(cè)翼保守序列特征可將HP分為西方型和東亞型:東亞型HP CagA具有高親和SHP-2 SH2結(jié)構(gòu)域的序列(SHP-2 bindingsequence,ESS),可有效激活胞內(nèi)磷酸化激酶級聯(lián)系統(tǒng),與西方型HP相應(yīng)序列存在明顯差異,西方型HP EPIYA-C基序與上述共有序列匹配程度較低,致病力相對較弱。上述東西方HP CagA羧基端序列特征決定了東亞型HP CagA在功能上不同于西方型HP攜帶的CagA。由于HP的高度重組及變異特征,經(jīng)典HP東西方分型理論依賴的保守區(qū)出現(xiàn)局部或整體缺失、突變,這對現(xiàn)有CagA序列特征與HP致病力的認(rèn)識提出了挑戰(zhàn)。同時,EPIYA-A和B通過抑制性磷酸化基序?qū)ι鲜霏h(huán)路起負(fù)反饋調(diào)節(jié),近年有研究認(rèn)為完整的EPIYA-B基序?qū)P感染引起宿主細(xì)胞前炎性因子IL-8高水平分泌十分關(guān)鍵�？梢�,HP CagA羧基端多態(tài)性與致病力關(guān)系復(fù)雜,尤其在東亞型HP普遍具有CagA蛋白的情況下,引起臨床疾病嚴(yán)重程度差異較大,HP CagA羧基端序列特征、對宿主的致病力機制研究對HP感染的防治具有重要意義。 本實驗選用100株中國浙江HP臨床菌株進(jìn)行CagA羧基端序列擴增,與NCBI核苷酸/氨基酸數(shù)據(jù)庫中世界各地來源的287株該序列區(qū)信息一同進(jìn)行氨基酸水平比對分析,發(fā)現(xiàn)東西方HP又一保守的差異特征標(biāo)志,該段序列長度在6-19個氨基酸殘基,位于CagA第840氨基酸殘基附近,側(cè)翼序列保守性高,利用該標(biāo)志序列可將HP東西方分型效力從經(jīng)典方法的80.10%提高至98.45%,兩種方法一致率99.44%,因而該標(biāo)志點有助于今后在氨基酸序列特征上分析東西方HP致病機制的不同。 本實驗發(fā)現(xiàn)一株攜帶EPIYA-A-D的中國浙江HP菌株,經(jīng)100:1感染比體外攻擊AGS細(xì)胞4小時及36小時均導(dǎo)致宿主細(xì)胞IL-8表達(dá)水平均較攜帶1～2個EPIYA-B的浙江菌株及西方型HP26695高,提示中國HP促進(jìn)宿主細(xì)胞高水平表達(dá)IL-8不依賴EPIYA-B,不同于西方菌株相應(yīng)致炎機制,與HP EPIYA-B具有胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)負(fù)反饋調(diào)控作用結(jié)論一致。此外,HP感染宿主細(xì)胞機制中介導(dǎo)CagA多聚化的CM序列特征在東西方HP中明顯不同,再次提示東西方HP CagA作為毒力因子致病機制的差異及復(fù)雜性。
[Abstract]:Helicobacter pylori (H.pylori) infection is the main pathogenic factor of chronic gastritis, peptic ulcer and gastric cancer. Patients with severe gastric diseases usually carry HP containing cag pathogenicity island (CAG PAI). The cagA gene encodes a cytotoxin associated protein (CagA). Mediating a series of signal transduction reactions in the host cells resulted in different degrees of inflammatory tissue damage and even carcinogenesis. The incidence of severe gastrointestinal diseases in patients with cagA- HP infection in western countries was significantly increased. In East Asian countries, the detection rate of cagA- was more than 90%. The carboxyl terminal polymorphism of CagA among different East Asian strains is closely related to different clinical outcomes. CagA phosphorylation site is located in the carboxyl terminal EPIYA motif Glu-Pro- 鈪，

本文編號：1362185