本文關(guān)鍵詞：家兔延髓腹側(cè)呼吸組中段疑核內(nèi)P2X受體在機(jī)體低氧呼吸反應(yīng)中的作用　出處：《山東大學(xué)》2008年碩士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

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【摘要】： 目的:(1)觀察向家兔NA內(nèi)微量注射P2X受體內(nèi)源激動(dòng)劑ATP,P2X受體拮抗劑PPADS(pyridoxal-5'-phosphate-6'-azophenyl-2',4'-disulphonic acid)對(duì)常氧呼吸和低氧呼吸反應(yīng)的影響,探討P2X受體在低氧呼吸反應(yīng)中的作用;(2)進(jìn)一步應(yīng)用免疫組織化學(xué)的方法,觀察P2X受體在NA內(nèi)表達(dá)的數(shù)量變化,探索P2X受體在介導(dǎo)低氧呼吸中的作用及其可能的機(jī)制。 方法:1.電生理學(xué)實(shí)驗(yàn):實(shí)驗(yàn)在麻醉、肌松、人工通氣的成年家兔上進(jìn)行。常氧通氣為醫(yī)用空氣(20%O_2-80%N_2),低氧通氣為10%O_2-90%N_2混合氣體。以膈神經(jīng)放電為呼吸觀察指標(biāo)。實(shí)驗(yàn)在56只健康成年家兔上進(jìn)行,通過(guò)解剖定位和引導(dǎo)呼吸神經(jīng)元放電定位NA。微量注射:向NA內(nèi)微量注射P2X受體內(nèi)源激動(dòng)劑ATP,觀察注射前后,常氧和低氧通氣對(duì)膈神經(jīng)放電以及動(dòng)脈血pH值的變化;為了檢驗(yàn)向NA內(nèi)注射ATP引起的呼吸效應(yīng)是否呈現(xiàn)劑量依賴(lài)性,向NA內(nèi)注射4個(gè)劑量的ATP(0.1,0.3,0.5,0.7μl)。每次注射之間至少間隔1小時(shí);向NA內(nèi)微量注射廣譜P2X受體拮抗劑PPADS(吡多醛衍生物),5分鐘后在同一位點(diǎn)注射ATP 0.3μl,觀察注射前后常氧和低氧通氣對(duì)膈神經(jīng)放電的影響。 2.免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn):健康成年家兔32只,隨機(jī)分為4組:A組(n=8):注射生理鹽水;B組(n=8):注射ATP;C組(n=8):注射PPADS;D組(n=8):不注射。A、B、C組動(dòng)物急性缺氧后快速處死,D組動(dòng)物直接處死,迅速取出腦干,以10%福爾馬林PBS溶液浸泡固定腦組織。石蠟包埋后進(jìn)行切片。采用免疫組織化學(xué)方法SP法觀察P2X受體在NA內(nèi)的表達(dá)情況。 結(jié)果:1.電生理學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果:低氧通氣開(kāi)始后,動(dòng)物膈神經(jīng)放電幅度和呼吸頻率迅速增加,在低氧通氣2分鐘左右時(shí)達(dá)到高峰,隨后有逐漸衰減的趨勢(shì),但在整個(gè)5分鐘的低氧通氣過(guò)程中,始終高于常氧通氣狀態(tài)下的放電幅度和呼吸頻率;向NA內(nèi)微量注射ATP對(duì)常氧通氣下的膈神經(jīng)放電沒(méi)有明顯影響,但能顯著性增強(qiáng)膈神經(jīng)放電對(duì)低氧呼吸的反應(yīng)以及降低動(dòng)脈血pH值;4種劑量的ATP在NA內(nèi)引起的呼吸興奮效應(yīng)呈現(xiàn)顯著的劑量依賴(lài)性,微量注射大劑量ATP對(duì)膈神經(jīng)放電的興奮效應(yīng)明顯大于小劑量ATP;向NA內(nèi)微量注射PPADS對(duì)常氧通氣下的膈神經(jīng)放電沒(méi)有明顯影響但削弱ATP引起的低氧呼吸反應(yīng)。 2.免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn):(1)各組均在NA處觀察到P2X受體的表達(dá)。(2)統(tǒng)計(jì)分析顯示低氧通氣組動(dòng)物P2X受體數(shù)目比常氧組顯著增多,即A、B、C三組P2X受體數(shù)目比D組表達(dá)明顯增加(P＜0.01)。 結(jié)論:在常氧通氣即生理狀態(tài)下,腦干NA的P2X受體在呼吸調(diào)控中無(wú)明顯作用,但均參與了低氧呼吸反應(yīng)的形成,增強(qiáng)低氧呼吸反應(yīng),而P2X受體阻斷劑PPADS削弱ATP引起的低氧呼吸反應(yīng)效應(yīng)。 在免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),P2X受體在家兔NA中有表達(dá),且在低氧通氣后表達(dá)顯著增強(qiáng)。 意義:P2X受體在低氧通氣后的家兔延髓NA區(qū)的明顯表達(dá),為ATP對(duì)呼吸節(jié)律的調(diào)節(jié)提供了功能結(jié)合位點(diǎn),為進(jìn)一步深入研究在通氣反應(yīng)中,機(jī)體感受Po_2、Pco_2和氫離子濃度變化后,如何將信息傳入呼吸中樞提供了一條新途徑。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類(lèi)號(hào)】：R332

【參考文獻(xiàn)】

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1 谷啟海,李之望,樊友珍;緩激肽對(duì)大鼠背根神經(jīng)節(jié)分離神經(jīng)元ATP激活電流的調(diào)制作用[J];生理學(xué)報(bào);1998年01期

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本文編號(hào)：1351265