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過氧化氫誘導(dǎo)大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞氧化損傷模型的建立

發(fā)布時(shí)間:2017-12-25 11:22

  本文關(guān)鍵詞:過氧化氫誘導(dǎo)大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞氧化損傷模型的建立 出處:《云南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)》2015年03期  論文類型:期刊論文


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【摘要】:目的采用過氧化氫(H2O2)誘導(dǎo)大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞(SVAREC)氧化損傷,建立SVAREC氧化損傷模型。方法體外培養(yǎng)SVAREC細(xì)胞,繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線,用不同濃度的H2O2刺激細(xì)胞,并在不同時(shí)間點(diǎn)用MTS法測(cè)定細(xì)胞存活率,以確定SVAREC氧化損傷模型條件。倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化,微孔酶標(biāo)法測(cè)乳酸脫氫酶(LDH)活力,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率,WB檢測(cè)細(xì)胞中半胱氨酸蛋白酶(Caspase-3)的表達(dá)情況。結(jié)果與空白對(duì)照組細(xì)胞比較,當(dāng)H2O2濃度為100μM,作用時(shí)間為2 h時(shí),造成細(xì)胞損傷,其細(xì)胞凋亡率和Caspase-3蛋白表達(dá)量明顯高于空白對(duì)照組。結(jié)論該實(shí)驗(yàn)條件下H2O2濃度為100μmol/L,作用時(shí)間為2 h是模型的最佳復(fù)制條件。
【作者單位】: 浙江中醫(yī)藥大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【基金】:中國(guó)博士后科學(xué)基金(2014M550335)
【分類號(hào)】:R-332
【正文快照】: 血管內(nèi)皮細(xì)胞直接覆蓋于血管內(nèi)膜表面,是細(xì)胞與血液物質(zhì)交換的第一屏障,具有多種自分泌和旁分泌功能,對(duì)維持正常血液循環(huán)有重要作用。血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和分化需要保持動(dòng)態(tài)平衡,一旦失衡,血管內(nèi)皮細(xì)胞受損,將導(dǎo)致多種血管性疾病的發(fā)生[1-2]。氧化應(yīng)激是指細(xì)胞暴露于高濃度氧

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