本文關(guān)鍵詞：嗎啡孵育對HU210誘導(dǎo)的大鼠腦星形膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)鈣振蕩的影響　出處：《陜西師范大學(xué)》2013年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞是一類廣泛分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng)和周圍神經(jīng)系統(tǒng)中的神經(jīng)組織細(xì)胞。隨著對膠質(zhì)細(xì)胞的進(jìn)一步研究,現(xiàn)在的觀點(diǎn)認(rèn)為在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中膠質(zhì)細(xì)胞不僅簡單的起著支持、絕緣、屏障和營養(yǎng)的作用,而且在突觸的形成及可塑性、神經(jīng)遞質(zhì)的分泌和攝取等方面也發(fā)揮重要作用,并以此來調(diào)控神經(jīng)元的信息傳遞及其各項(xiàng)生理活動。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中,星形膠質(zhì)細(xì)胞是膠質(zhì)細(xì)胞中數(shù)量最多、體積最大的一種亞型細(xì)胞。神經(jīng)元興奮的表現(xiàn)方式是產(chǎn)生動作電位,與其不同的是,星形膠質(zhì)細(xì)胞主要是通過其胞內(nèi)游離Ca2+濃度([Ca2+]i)的變化來表現(xiàn)細(xì)胞的興奮性,而該類細(xì)胞興奮后可通過細(xì)胞內(nèi)多種信號通路指導(dǎo)膠質(zhì)遞質(zhì)合成并將其釋放,被釋放的膠質(zhì)遞質(zhì)進(jìn)而反作用于神經(jīng)元,從而調(diào)節(jié)突觸的功能及突觸可塑性,因此關(guān)于星形膠質(zhì)細(xì)胞[Ca2+]i的變化就成為近年來研究的熱點(diǎn)。 本實(shí)驗(yàn)以原代培養(yǎng)的Sprague-Dawley (SD)大鼠大腦皮層星形膠質(zhì)細(xì)胞為模型,采用嗎啡中、短期孵育的作用模式,通過觀察大麻素急性作用于培養(yǎng)的細(xì)胞所引起胞內(nèi)鈣信號的變化程度來了解大麻素類藥物對星形膠質(zhì)細(xì)胞的影響及嗎啡孵育對HU210作用效應(yīng)的影響。 實(shí)驗(yàn)以1-3d齡的SD大鼠為實(shí)驗(yàn)材料,通過無菌操作技術(shù)對大鼠大腦皮層中的星形膠質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行分離及純化培養(yǎng),使培養(yǎng)出的星形膠質(zhì)細(xì)胞純度達(dá)到95%及以上,并應(yīng)用GFAP免疫組化法對其純度進(jìn)行鑒定。在檢測細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度變化時選用Fura-2/AM為Ca2+指示劑,通過灌流HU210分別觀察加藥前后對照組、嗎啡組和納洛酮+嗎啡組的膠質(zhì)細(xì)胞[Ca2+]i的變化。此外,實(shí)驗(yàn)還分別用AM281(CB1受體的拮抗劑)和納洛酮(阿片受體的拮抗劑)孵育星形膠質(zhì)細(xì)胞,目的是進(jìn)一步觀察在阻斷CB1受體和阿片受體后灌流HU210對膠質(zhì)細(xì)胞胞內(nèi)鈣振蕩的影響。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,HU210分別灌流經(jīng)Fura-2/AM加載后的對照組、嗎啡組和納洛酮+嗎啡組的星形膠質(zhì)細(xì)胞,各組大部分細(xì)胞熒光值F340/F380明顯升高,這表明,HU210可明顯誘導(dǎo)各組細(xì)胞[Ca2+]i升高。而將HU210發(fā)揮作用的相應(yīng)受體拮抗后,星形膠質(zhì)細(xì)胞[Ca2+]i的升高現(xiàn)象被顯著抑制,由此表明HU210可通過CB1受體誘導(dǎo)星形膠質(zhì)細(xì)胞[Ca2+]i的升高。而嗎啡組與對照組細(xì)胞的[Ca2+]i升高幅值存在差異,加納洛酮干預(yù)后,該差異消失,由此表明嗎啡中期孵育可影響HU210的作用效應(yīng)且這種效應(yīng)可被納洛酮反轉(zhuǎn)。 綜合以上結(jié)果可知：HU210可通過CB1受體急性作用星形膠質(zhì)細(xì)胞并引起細(xì)胞內(nèi)[Ca2+]i的升高,而經(jīng)嗎啡孵育不同時間后,HU210作用于星形膠質(zhì)細(xì)胞引起的[Ca2+]i升高的效應(yīng)受到影響,納洛酮可反轉(zhuǎn)嗎啡對HU210的這一影響,這一原因可能是由于嗎啡發(fā)揮生理作用所依賴的阿片受體信號系統(tǒng)與HU210發(fā)揮作用所依賴的大麻素信號系統(tǒng)間存在相互影響。
【學(xué)位授予單位】：陜西師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R329.2

【參考文獻(xiàn)】

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1 謝燕,余爭平,朱光緒,方強(qiáng),江海洪,;嗎啡對大鼠培養(yǎng)海馬神經(jīng)元鈣離子作用機(jī)制的研究[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2002年02期

2 熊加祥,黎海蒂,李希成;嗎啡對大鼠海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞[Ca~(2+)]i的影響[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2003年03期

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本文編號：1311308