本文關鍵詞：嗎啡孵育對HU210誘導的大鼠腦星形膠質細胞內鈣振蕩的影響　出處：《陜西師范大學》2013年碩士論文　論文類型：學位論文

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【摘要】：神經膠質細胞是一類廣泛分布于中樞神經系統(tǒng)和周圍神經系統(tǒng)中的神經組織細胞。隨著對膠質細胞的進一步研究,現(xiàn)在的觀點認為在中樞神經系統(tǒng)中膠質細胞不僅簡單的起著支持、絕緣、屏障和營養(yǎng)的作用,而且在突觸的形成及可塑性、神經遞質的分泌和攝取等方面也發(fā)揮重要作用,并以此來調控神經元的信息傳遞及其各項生理活動。在中樞神經系統(tǒng)中,星形膠質細胞是膠質細胞中數量最多、體積最大的一種亞型細胞。神經元興奮的表現(xiàn)方式是產生動作電位,與其不同的是,星形膠質細胞主要是通過其胞內游離Ca2+濃度([Ca2+]i)的變化來表現(xiàn)細胞的興奮性,而該類細胞興奮后可通過細胞內多種信號通路指導膠質遞質合成并將其釋放,被釋放的膠質遞質進而反作用于神經元,從而調節(jié)突觸的功能及突觸可塑性,因此關于星形膠質細胞[Ca2+]i的變化就成為近年來研究的熱點。 本實驗以原代培養(yǎng)的Sprague-Dawley (SD)大鼠大腦皮層星形膠質細胞為模型,采用嗎啡中、短期孵育的作用模式,通過觀察大麻素急性作用于培養(yǎng)的細胞所引起胞內鈣信號的變化程度來了解大麻素類藥物對星形膠質細胞的影響及嗎啡孵育對HU210作用效應的影響。 實驗以1-3d齡的SD大鼠為實驗材料,通過無菌操作技術對大鼠大腦皮層中的星形膠質細胞進行分離及純化培養(yǎng),使培養(yǎng)出的星形膠質細胞純度達到95%及以上,并應用GFAP免疫組化法對其純度進行鑒定。在檢測細胞內鈣離子濃度變化時選用Fura-2/AM為Ca2+指示劑,通過灌流HU210分別觀察加藥前后對照組、嗎啡組和納洛酮+嗎啡組的膠質細胞[Ca2+]i的變化。此外,實驗還分別用AM281(CB1受體的拮抗劑)和納洛酮(阿片受體的拮抗劑)孵育星形膠質細胞,目的是進一步觀察在阻斷CB1受體和阿片受體后灌流HU210對膠質細胞胞內鈣振蕩的影響。 實驗結果顯示,HU210分別灌流經Fura-2/AM加載后的對照組、嗎啡組和納洛酮+嗎啡組的星形膠質細胞,各組大部分細胞熒光值F340/F380明顯升高,這表明,HU210可明顯誘導各組細胞[Ca2+]i升高。而將HU210發(fā)揮作用的相應受體拮抗后,星形膠質細胞[Ca2+]i的升高現(xiàn)象被顯著抑制,由此表明HU210可通過CB1受體誘導星形膠質細胞[Ca2+]i的升高。而嗎啡組與對照組細胞的[Ca2+]i升高幅值存在差異,加納洛酮干預后,該差異消失,由此表明嗎啡中期孵育可影響HU210的作用效應且這種效應可被納洛酮反轉。 綜合以上結果可知：HU210可通過CB1受體急性作用星形膠質細胞并引起細胞內[Ca2+]i的升高,而經嗎啡孵育不同時間后,HU210作用于星形膠質細胞引起的[Ca2+]i升高的效應受到影響,納洛酮可反轉嗎啡對HU210的這一影響,這一原因可能是由于嗎啡發(fā)揮生理作用所依賴的阿片受體信號系統(tǒng)與HU210發(fā)揮作用所依賴的大麻素信號系統(tǒng)間存在相互影響。
【學位授予單位】：陜西師范大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R329.2

【參考文獻】

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1 謝燕,余爭平,朱光緒,方強,江海洪,;嗎啡對大鼠培養(yǎng)海馬神經元鈣離子作用機制的研究[J];第三軍醫(yī)大學學報;2002年02期

2 熊加祥,黎海蒂,李希成;嗎啡對大鼠海馬星形膠質細胞[Ca~(2+)]i的影響[J];第三軍醫(yī)大學學報;2003年03期

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本文編號：1311308